Účinky Er,Cr:YSGG, diodových laserů na hladiny cytokinů GCF

Do naší studie bylo zahrnuto celkem 26 jedinců. Diagnózy byly stanoveny po klinických a radiografických vyšetřeních u pacientů, kteří se v letech 2014-2015 přihlásili na Stomatologickou fakultu Univerzity Yuzuncu Yil, oddělení parodontologických klinik. Bylo zajištěno, že jedinci, kteří byli zařazeni do studie, neměli žádné systémové onemocnění; nebyly v menopauze, těhotné nebo kojící; v předchozích šesti měsících neužíval antibiotika ani jiné léky ovlivňující imunitní systém; byli nekuřáci; měli v ústech alespoň 16 zubů; a v předchozích 6 měsících nepodstoupila žádnou periodontální léčbu. Subjektům zapojeným do studie byl klinickým lékařem sdělen cíl a obsah studie a oni podepsali schvalovací formulář s prohlášením, že se průzkumu dobrovolně účastnili. Každý jednotlivec si před vstupem do studie přečetl Helsinskou deklaraci. K provedení studie dal souhlas Výbor pro výzkum lidské etiky Univerzity Yuzuncu Yil (č. B.30.2.YYU.0.01.00.00/44-100912).

Zahrnující kritéria byla aplikována při diagnostice generalizované agresivní parodontitidy (International Workshop for Classification of Periodontal Diseases v roce 1999). Klinická vyšetření parodontu, včetně stavu parodontu, byla prováděna měřením krvácení při sondování (BOP), indexu plaku (PI), indexu dásní (GI), hloubky kapsy sondy (PPD) a úrovně klinického připojení (CAL) na 6 místech na zub. jiným lékařem. Klinické periodontální indexy měřené během výzkumu byly vyhodnoceny místně specificky se zahrnutím meziálních a distálních zubů, ze kterých byly získány vzorky GCF.

Všichni jedinci podstoupili nechirurgickou počáteční periodontální léčbu. Na začátku studie byla u všech kvadrantů prokázána podobnost s periodontálním onemocněním. Postupy uvedené níže byly aplikovány na všechny jedince ve studii v náhodně vybraných třech různých kvadrantech. Studie byla navržena jako studie „split-mouth“.

1. Pouze skupina SRP (SRP-Control)
2. SRP+Er,Cr:YSGG laserová skupina (SRP+Er,Cr:YSGG)
3. SRP+940±15 nm diodová laserová skupina (SRP+Diode) Vzorková místa GCF byla vybrána po provedení sondážních měření. Vzorky GCF byly odebrány na začátku studie a 3. měsíc po léčbě. Vzorky GCF byly odebrány z nejhlubší kapsy ve všech kvadrantech. Vzorky byly odebrány pomocí papírových proužků (Periopaper Oraflow, NewYork, USA), které byly nařezány na standardní velikost. Před odběrem vzorků byl odstraněn supragingivální plak a poté byla místa izolována ze slin pomocí sterilního pufru a sterilních bavlněných smotků. Vzorky povrchů zubů byly vysušeny mírným ofouknutím vzduchu na ně. Papírové proužky byly vkládány, dokud nebyl pociťován lehký odpor v sulku, a byly tam ponechány po dobu 30 sekund. Proužky, které byly kontaminovány krví, nebyly zahrnuty do hodnocení. Množství tekutiny bylo měřeno zařízením Periotron (Periotron 8000, Oraflow, NewYork, USA) a bylo převedeno na objem GCF v jednotkách ml. Čtyři proužky, které byly získány od každého pacienta, byly umístěny do jednotlivých Eppendorfových zkumavek, z nichž každá obsahovala 500 μl kapaliny (Phosphate Buffer Saline (PBS)-pH 7,4) a papírový proužek a byly skladovány při -80 °C.

SRP byla nejprve provedena u kontrolních kvadrantů jedinců s diagnózou GAgP; po proceduře SRP byl aplikován Er,Cr:YSGG laser. Diodový laser 940±15 nm byl aplikován před SRP, na rozdíl od Er,Cr:YSGG laseru (aby se zabránilo změně účinnosti diodového laseru po krvácení). Ve studii byl použit laser Er,Cr:YSGG (Waterlase, Biolase, Irvine, CA, USA) a diodový laser 940±15 nm (Ilase, Biolase, Irvine, CA, USA). Pro Er,Cr:YSGG laser byl použit 14mm hrot Z-6 (600 μm vláknový hrot, vhodný pro parodontální použití) vyznačený do hloubky kapsy při nastavení 10 Hz, 1,5 W (150 mJ) , 65 % vzduch, 55 % voda s režimem H, délka pulzu 140 μs. Celková doba ozařování byla 30 sekund. Diodový laser 940±15 nm se standardním hrotem MZ6-14 mm byl použit v režimu spojité vlny. Doby ozařování pro 940±15 nm diodový laser byly upraveny na 20 s.

Analýza TNF-a, IL-lp a IL-8 v GCF byla provedena metodou ELISA pomocí komerčních souprav ELISA.