Studium genotypu a charakterizace fenotypu u Duchennovy svalové dystrofie s malými mutacemi

V posledních letech pomohla motorická funkční hodnocení definovat lepší přirozenou anamnézu pacientů s DMD, ukazující různé shlukování progrese onemocnění podle genotypu a lokusu mutace. V rámci spektra závažnosti DMD byla již dříve popsána variabilita ve fenotypu mezi delecemi. Všechna klinická hodnocení však mají společnou nevýhodu, že jsou závislá na spolupráci pacienta a interakci s vyšetřujícím. Potřeba identifikovat nové biomarkery jako měřitelné indikátory biologického stavu se proto stala důležitou. K dnešnímu dni několik studií ukázalo, že zobrazování magnetickou rezonancí (MRI) a spektroskopie poskytují citlivé markery svalové patologie a progrese onemocnění jak u horních, tak u dolních končetin pacientů s DMD, což naznačuje, že MRI je slibným neinvazivním kandidátním biomarkerem. MRI svalů má tu výhodu, že je relativně nezávislá na spolupráci pacienta. V předchozích studiích kvantitativní hodnoty MRI stehenního svalu vysoce korelovaly s klinickými výsledky a ztrátou chůze (LOA) a kvalitativní hodnocení hodnocení ukázaly přímou korelaci s délkou onemocnění a změnami fibrotut. Nedávno náš tým našel vztah mezi funkčním skóre a závažným postižením na MRI svalů horní končetiny u ambulantních i nechodících chlapců s DMD. Kromě toho v posledních desetiletích důkazy, že se věk LOA u jedinců s DMD nesoucích mutace rušící expresi dystrofinu liší, naznačují existenci trans-působících variant v modifikačních genech. Nedávno bylo oznámeno, že některé jednonukleotidové polymorfismy (SNP) v několika identifikovaných genech lze považovat za modifikátory DMD a odpovědné za některé interindividuální variability pozorované v klinickém průběhu onemocnění. Dosud byly varianty v pěti lokusech spojovány s variabilitou subfenotypů lidských DMD: secernovaný fosfoprotein 1 (SPP1), latentní transformující růstový faktor-Beta vazebný protein 4 (LTBP4), klastr diferenciace 40 (CD40), alfa-aktinin -3 (ACTN3) a trombospondin 1 (THBS1). Tyto geny se podílejí na několika vzájemně propojených molekulárních drahách regulujících zánětlivou reakci na poškození svalů, regeneraci, fibrózu nebo se přímo podílejí na svalové síle a sprintovém výkonu. Popsané varianty mají regulační funkci nebo mění proteinovou sekvenci a mohly by zpozdit medián LOA přibližně o 1 až 2 roky. Kromě toho bylo nedávno prokázáno, že nativní kmenové buňky derivované z moči exprimují dystrofinový transkript a protein (po diferenciaci myoblastového determinačního proteinu 1 (MyoD)) jak u pacientů s DMD, tak u kontrolní skupiny a lze je považovat za platný buněčný nástroj pro charakterizaci genotypu a funkční studie jak DMD transkriptu, tak dystrofinového (DYS) proteinu. Dosavadní výsledky literatury o malých mutacích uvádějí širokou variabilitu klinických nálezů a lze předpokládat, že proměnlivé trajektorie progrese a celková závažnost a ztráta důležitých milníků mohou záviset na několika faktorech. Dalo by se předpokládat, že toto zjištění by mohlo souviset s odlišným místem mutací a specifickým zapojením exonu nebo s typem aminokyselinových změn, které by mohly produkovat různé exprese reziduálního proteinu s následnými rozdíly v závažnosti fenotypů. Tyto body nebyly systematicky prozkoumány a použití biomarkerů může usnadnit identifikaci odlišných fenotypů a jejich korelaci s různými genotypy. Tento projekt si klade za cíl zjistit, zda by specifická charakterizace genotypu, funkční hodnocení, svalová MRI mohla pomoci vytvořit lepší charakterizaci genotypu a fenotypu u skupiny pacientů s DMD nesoucích malé mutace. Předpokládám, že tyto nástroje samy o sobě nebo v kombinaci mohou pomoci k popisu přirozené historie.