Undersøgelse af genotype og fænotypekarakterisering i Duchenne muskeldystrofi med små mutationer

I de sidste år har motoriske funktionelle vurderinger bidraget til at definere en bedre naturhistorie for DMD-patienter, der viser forskellige grupperinger af sygdomsprogression i henhold til genotypen og mutationsstedet. Inden for spektret af sværhedsgrad af DMD er variabilitet i fænotype blandt deletioner tidligere blevet rapporteret. Men alle kliniske vurderinger har den fælles ulempe, at de er afhængige af patientsamarbejde og interaktion med undersøgeren. Derfor er behovet for at identificere nye biomarkører som målbare indikatorer for biologisk tilstand blevet vigtigt. Til dato har adskillige undersøgelser vist, at magnetisk resonansbilleddannelse (MRI) og spektroskopi giver følsomme markører for muskelpatologi og sygdomsprogression i både øvre og nedre lemmer hos DMD-personer, hvilket tyder på MR som en lovende ikke-invasiv biomarkørkandidat. Muskel-MR har fordelen af ​​at være relativt uafhængig af patientsamarbejde. I tidligere undersøgelser viste kvantitative lårmuskel-MRI-værdier i høj grad korreleret med kliniske resultatmål og tab af ambulation (LOA) og kvalitativ vurderingsscoring en direkte sammenhæng med varigheden af ​​sygdom og fibrofedtændringer. For nylig fandt vores team en sammenhæng mellem de funktionelle scores og alvorlig involvering af muskel-MR af øvre lemmer hos både ambulante og ikke-ambulante DMD-drenge. Ydermere har beviserne for, at alderen af ​​LOA varierer mellem DMD-individer, der bærer mutationer, der afskaffer dystrofinekspression, i de sidste årtier antydet eksistensen af ​​transvirkende varianter i modificerende gener. Det er for nylig blevet rapporteret, at nogle enkelte nukleotidpolymorfier (SNP'er) i nogle få identificerede gener kan betragtes som DMD-modifikatorer og ansvarlige for noget af den interindividuelle variabilitet, der observeres i det kliniske sygdomsforløb. Til dato er varianter i fem loci blevet forbundet med variabilitet i humane DMD-subfænotyper: Sekreteret Phosphoprotein 1 (SPP1), Latent Transforming Growth Factor-Beta Binding Protein 4 (LTBP4), Cluster of differentiation 40 (CD40), alfa-actinin -3 (ACTN3) og Thrombospondin 1 (THBS1). Disse gener er impliceret i flere indbyrdes forbundne molekylære veje, der regulerer inflammatorisk respons på muskelskade, regenerering, fibrose eller er mere direkte impliceret i muskelkraft og sprintpræstation. Beskrevne varianter har en regulatorisk funktion eller ændrer proteinsekvens og kan forsinke median LOA med ca. 1 til 2 år. For nylig blev native urin-afledte stamceller desuden påvist at udtrykke dystrofintranskript og protein (efter myoblastbestemmelse protein 1 (MyoD) differentiering) i både DMD-patienter og kontrolgruppe, og de kunne betragtes som et gyldigt celleværktøj til enten genotypekarakterisering og funktionelle undersøgelser af både DMD transkript og dystrofin (DYS) protein. Indtil videre rapporterer resultaterne af litteraturen om små mutationer en bred variation af kliniske fund, og det kunne antages, at de variable progressionsforløb og den samlede sværhedsgrad og tab af vigtige milepæle kan afhænge af flere faktorer. Man kunne antage, at dette fund kunne være relateret til det forskellige sted for mutationer og specifik exon-involvering eller til typen af ​​de aminosyreændringer, der kunne være i stand til at producere forskellige udtryk af resterende protein med efterfølgende forskelle i sværhedsgraden af ​​fænotyper. Disse punkter er ikke blevet systematisk undersøgt, og brugen af ​​biomarkører kan gøre det lettere at identificere forskellige fænotyper og deres korrelation med forskellige genotyper. Dette projekt har til formål at undersøge, om specifik genotypekarakterisering, funktionelle vurderinger, muskel-MR kan hjælpe med at etablere en bedre genotype og fænotypekarakterisering hos en gruppe DMD-patienter, der bærer små mutationer. Jeg antager, at disse værktøjer alene eller kombineret kan hjælpe med at beskrive naturhistorien.