Subendometriální aplikace versus intrauterinní infuze plazmy bohaté na krevní destičky u žen s opakovaným selháním implantace .Prospektivní randomizovaná kontrolovaná studie

Tato prospektivní randomizovaná kontrolovaná studie bude provedena v soukromých centrech IVF v guvernorátu Minia od ledna 2024 do prosince 2025 po schválení místním etickým výborem oddělení a od účastníků bude získán písemný informovaný souhlas.

Inkluzní kritéria: do studie budou zařazeny pacientky s následujícími inkluzními kritérii: byly rekrutovány ženy s anamnézou nevysvětleného opakovaného selhání implantace (RIF) podstupující transfer zmražených embryí (FET) s následujícími kritérii:

1. Věk 18–40 let
2. BMI < 30 kg/m²
3. IVF procedura vedoucí k alespoň jednomu embryu nejvyšší kvality
4. Alespoň jedna anamnéza zrušení transferu embrya kvůli tenkému endometriu (nedosažení tloušťky endometria 7 mm v cyklu) v cyklech transferu zmražených embryí (FET) po standardní hormonální terapii.
5. Ženy měly anamnézu selhání dosažení těhotenství po dvou nebo více transferech embryí s embryi vysoké kvality.

Exkluzní kritéria:

ženy s dalšími faktory, které mohou ovlivnit úspěšnost implantace, jsou vyloučeny: BMI > 30 kg/m², neléčené abnormality dělohy, neléčené hydrosalpingy, trombofilie, nekontrolovaná endokrinopatie, závažný mužský faktor infertility, obtížný transfer embrya, dostupná pouze embrya nízké kvality a pár s chromozomálními abnormalitami, hematologické poruchy (rakovina krve, trombocytopenie), hormonální poruchy (DM, poruchy štítné žlázy), imunologické poruchy (antifosfolipidový syndrom), selhání ledvin, genetické, chromozomální abnormality.

Všem pacientkám bude poskytnuto poradenství ohledně zařazení do této studie, od každé pacientky bude před účastí v této studii získán písemný informovaný souhlas.

Rekrutované pacientky budou náhodně rozděleny do 3 skupin pomocí neprůhledných uzavřených obálek.

Velikost vzorku:

Na základě předchozích studií a pomocí výpočtu velikosti vzorku softwaru GPower verze 3.1.9.6 (Franz Faul, Kielská univerzita, Německo) s nastavením β na 95 % a α na 0,05. To dává velikost vzorku 47 pro každou skupinu. Toto číslo bude zaokrouhleno na 25. Při předpokládané míře odpadnutí 12 % bude velikost vzorku 60 pro každou skupinu.

(Skupina 1) – (subendometriální PRP skupina) SE-PRP (n=60): této skupině bude injikováno 4 ml PRP do subendometriálního prostoru (1–2 ml) pod endometrium na více místech transvaginálně a přes děložní hrdlo po zavedení Cusco spekula pomocí jehly pro odběr vajíček pod ultrazvukovou kontrolou v luteální fázi předchozího cyklu FET.

(Skupina 2) – (intrauterinní PRP skupina) IU-PRP (n=60) Bude provedena intrauterinní infuze 4 ml PRP během cyklu FET, když endometrium dosáhne 7 mm.

(Skupina 3) Kontrolní skupina (n=60) podstoupí standardní FET bez intervence, pouze hormonální přípravu.

Příprava endometria:

U všech skupin bude endometrium připraveno kombinovaným protokolem estrogenu a progesteronu schváleným centry IVF. Estradiol valerát bude zahájen 2.–3. den cyklu FET v dávce 6 mg s měřením tloušťky endometria 10. den cyklu a každých 48 hodin a jakmile endometrium dosáhne >7 mm, bude nabídnut progesteron ve vaginálních pesarech 400 mg dvakrát denně pro luteální podporu po dobu 3–5 dnů, poté budou všem pacientkám transferována embrya stejného počtu a stejné kvality (embrya nejvyšší kvality stupně A). Estradiol a progesteron budou pokračovat po transferu až do 12. týdne gestačního věku, pokud dojde k těhotenství.

Cyklus FET bude zrušen, pokud tloušťka endometria ve všech skupinách nedosáhne 7 mm nebo více nejpozději do 17. dne cyklu.

Příprava PRP:

PRP bude připraveno z autologní krve pomocí modifikovaného dvoukrokového centrifugálního procesu. 8,5 ml periferní žilní krve bude odebráno do stříkačky obsahující 1,5 ml antikoagulačního roztoku Acid Citrate A (ACD-A) a okamžitě centrifugováno při 1600 g po dobu 10 minut. Krev bude rozdělena do tří vrstev: červené krvinky na dně, buněčná plazma v supernatantě a vrstva buffy coat mezi nimi. Vrstva plazmy a buffy coat bude převedena do další zkumavky a znovu centrifugována při 3500 g po dobu 5 minut, aby se získalo 1,5 ml PRP s 4–5násobnou koncentrací.

Míra implantace byla definována jako poměr gestačních váčků k počtu transferovaných embryí.

Chemické těhotenství bylo definováno jako sérový B-hCG 50 IU/L 14 dní po transferu embrya.

Klinické těhotenství jako přítomnost gestačního váčku se srdeční akcí zjištěné ultrazvukem 5 týdnů po transferu embrya.

Výsledné ukazatele:

Hlavní výsledné ukazatele jsou:

míra implantace, míra chemického těhotenství, míra klinického těhotenství.

Vše bude porovnáno mezi všemi skupinami pacientek.