Wstrzyknięcie podbłonówkowe a infuzja wewnątrzmaciczna osocza bogatopłytkowego u kobiet z nawracającymi niepowodzeniami implantacji. Prospektywne, randomizowane badanie kontrolowane

To prospektywne randomizowane kontrolowane badanie zostanie przeprowadzone w prywatnych ośrodkach IVF w gubernatorstwie Minia od stycznia 2024 do grudnia 2025 roku, po uzyskaniu zgody lokalnej Komisji Etyki Wydziału oraz pisemnej świadomej zgody od uczestników.

Kryteria włączenia: do badania zostaną włączeni pacjenci spełniający następujące kryteria włączenia: rekrutowano kobiety z historią niewyjaśnionej nawracającej porażki implantacji (RIF) poddawane transferowi zamrożonych zarodków (FET), w tym następujące kryteria:

1. Wiek 18-40 lat
2. BMI<30 kg/m²
3. Procedura IVF zakończona uzyskaniem co najmniej jednego zarodka najwyższej jakości
4. Co najmniej jedna historia odwołania transferu zarodka z powodu cienkiego endometrium (nieosiągnięcie 7 mm grubości endometrium w cyklu) w cyklach transferu zamrożonych zarodków (FET) po otrzymaniu standardowej terapii hormonalnej.
5. Kobiety z historią niepowodzenia w osiągnięciu ciąży po dwóch lub więcej transferach zarodków wysokiej jakości.

Kryteria wykluczenia:

wykluczone są kobiety z innymi czynnikami, które mogą wpływać na sukces implantacji: BMI >30 kg/m², nieleczone nieprawidłowości macicy, nieleczone wodniaki jajowodów, trombofilia, niekontrolowana endokrynopatia, ciężki czynnik męskiej niepłodności, trudny transfer zarodka, dostępne tylko zarodki słabej jakości oraz para z nieprawidłowościami chromosomalnymi, zaburzenia hematologiczne (nowotwór krwi, małopłytkowość), zaburzenia hormonalne (cukrzyca, zaburzenia tarczycy), zaburzenia immunologiczne (zespół antyfosfolipidowy), niewydolność nerek, nieprawidłowości genetyczne, chromosomalne

Wszyscy pacjenci zostaną poinformowani o włączeniu do tego badania, od każdego pacjenta zostanie pobrana pisemna świadoma zgoda przed udziałem w badaniu.

Zrekrutowani pacjenci zostaną losowo przydzieleni do 3 grup przy użyciu nieprzezroczystych zamkniętych kopert.

Wielkość próby:

Na podstawie poprzednich badań oraz przy użyciu obliczeń wielkości próby w oprogramowaniu GPower wersja 3.1.9.6 (Franz Faul, Uniwersytet w Kilonii, Niemcy), z ustawieniem β na 95% i α na 0,05. Daje to wielkość próby 47 dla każdej grupy. Liczba ta zostanie zaokrąglona do 25. Przy założeniu wskaźnika rezygnacji z badania na poziomie 12%, wielkość próby wyniesie 60 dla każdej grupy.

(Grupa 1) – (grupa podendometrialnej PRP) SE-PRP (n=60): w tej grupie 4 ml PRP zostanie wstrzyknięte w przestrzeń podendometrialną (1-2 ml) poniżej endometrium w wielu miejscach przezpochwowo i przez szyjkę macicy po wprowadzeniu wziernika Cusco za pomocą igły do pobierania komórek jajowych pod kontrolą USG w fazie lutealnej poprzedniego cyklu FET.

(Grupa 2) – (grupa wewnątrzmacicznej PRP) IU-PRP (n=60) Wewnątrzmaciczna infuzja 4 ml PRP zostanie wykonana podczas cyklu FET, gdy endometrium osiągnie 7 mm.

(GRUPA 3) Grupa kontrolna (n=60) przejdzie standardowy FET bez interwencji, tylko z przygotowaniem hormonalnym.

Przygotowanie endometrium:

Dla wszystkich grup endometrium będzie przygotowywane za pomocą połączonego protokołu estrogenowo-progesteronowego, zatwierdzonego przez ośrodki IVF. Walerianian estradiolu zostanie rozpoczęty w 2./3. dniu cyklu FET w dawce 6 mg, z pomiarem grubości endometrium w 10. dniu cyklu i co 48 godzin, a gdy endometrium osiągnie >7 mm, zostanie zastosowana dopochwowa pesaria progesteronowa 400 mg dwa razy dziennie w celu wsparcia fazy lutealnej przez 3-5 dni, następnie u wszystkich pacjentek zostaną przetransferowane zarodki tej samej liczby i tej samej jakości (zarodki najwyższej jakości klasy A). Estradiol i progesteron będą kontynuowane po transferze do 12. tygodnia wieku ciążowego, jeśli wystąpi ciąża.

Cykl FET zostanie odwołany, jeśli grubość endometrium nie osiągnie 7 mm lub więcej we wszystkich grupach do 17. dnia cyklu, ostatecznie.

Przygotowanie PRP:

PRP będzie przygotowywane z krwi autologicznej przy użyciu zmodyfikowanego dwuetapowego procesu wirowania. 8,5 ml krwi żylnej obwodowej zostanie pobrane do strzykawki zawierającej 1,5 ml roztworu antykoagulacyjnego Cytrynianu A (ACD-A) i natychmiast odwirowane przy 1600 g przez 10 min. Krew podzieli się na trzy warstwy: krwinki czerwone na dnie, osocze komórkowe w supernatancie oraz warstwa buffy coat między nimi. Warstwa osocza i buffy coat zostanie zebrana do innej probówki i ponownie odwirowana przy 3500 g przez 5 min, aby uzyskać 1,5 ml PRP o 4-5-krotnie większym stężeniu.

Wskaźnik implantacji zdefiniowano jako stosunek liczby pęcherzyków ciążowych do liczby przetransferowanych zarodków.

Częstość ciąży biochemicznej zdefiniowano jako stężenie B-hCG w surowicy 50 IU/L po 14 dniach od transferu zarodka.

Częstość ciąży klinicznej zdefiniowano jako obecność pęcherzyka ciążowego z czynnością serca stwierdzoną w badaniu USG 5 tygodni po transferze zarodka.

Miary wyników:

Główne miary wyników to:

wskaźnik implantacji, częstość ciąży biochemicznej, częstość ciąży klinicznej.

Wszystkie będą porównywane między wszystkimi grupami pacjentów.