In vivo-undersøgelse for at vurdere genopretning og overlevelse af radioaktivt mærkede autologe INTERCEPT-aferese-blodpladekomponenter suspenderet i 100 % plasma opbevaret i op til 7 dage

Undersøgelsen vil blive udført i to faser. Trin 1 er et randomiseret, 2-periods crossover-design. Testblodplader opbevaret i 7 dage vil blive radiomærket baseret på enten BEST- eller Variant 1-metoden (afhængigt af perioden og randomiseringsskemaet for testblodpladerne) for 12 raske forsøgspersoner. Genopretning og overlevelse for testtrombocytter, der er fremstillet med BEST- og Variant 1-metoderne, vil blive sammenlignet med hinanden og med den friske blodpladekontrol. Med aftale fra FDA (BQ200481, 8. juli 2020) er gennemførelse af trin 1 ikke påkrævet.

Stage 2 er et enkeltarmsdesign. Testblodplader fra 24 raske forsøgspersoner, opbevaret i 7 dage, vil blive klargjort til radioaktiv mærkning efter Variant 1-metoden. Genopretningen og overlevelsen for testblodplader vil blive sammenlignet med den friske blodpladekontrol. Fase 1-personer med evaluerbare Variant 1-metodedata vil bidrage til kravet om de 24 forsøgspersoner til Trin 2.

For begge stadier vil undersøgelsespopulationen bestå af raske forsøgspersoner, der opfylder FDA, AABB og stedspecifikke forskningsdonorkriterier for aferese-blodpladedonation. Aferese-blodplader vil blive opsamlet i 100 % plasma på Trima Accel® Automated Blood Collection system.

Hver undersøgelses aferesesamling vil blive behandlet ved hjælp af INTERCEPT Blood System for blodplader. Blodpladekomponenter, der indeholder 3,0 til 7,9 x10^11 blodplader i 300 til 420 ml plasma, vil blive behandlet ved hjælp af INTERCEPT Dual Storage (DS) sættet. INTERCEPT-processen begynder enten på indsamlingsdagen (dag 0) eller dagen efter donation (dag 1); belysning skal ske inden for 24 timer efter afslutningen af ​​indsamlingen. Testblodpladekomponenter vil blive opbevaret i op til 7 dage, fra opsamlingsdagen, i 100 % plasma.

Under hvert trin vil der blive indsamlet prøver til in vitro blodpladetestning før INTERCEPT-behandling (dag 0/1), efter INTERCEPT-behandling og ved slutningen af ​​opbevaring, dag 7 (se in vitro-evaluering af blodplader nedenfor).

Ved slutningen af ​​opbevaringen vil en alikvot af testblodplader blive fjernet aseptisk fra hver forsøgspersons INTERCEPT-trombocytopbevaringsbeholder til forberedelse af prøver til radiomærkning ved brug af enten BEST (stadie 1) eller variant 1 (stadier 1 og 2) metoden. In vitro-kvaliteten af ​​den blodpladeprøve, der anvendes til radioaktiv mærkning, vil blive vurderet før og efter præ-radiomærkning af trombocytprøveforberedelser. Indeksene, der skal måles i trin 1, er volumen, pH22°C, CD62P, blodpladetal, antal røde blodlegemer (RBC) og antal hvide blodlegemer (WBC). Vurderinger af disse indekser vil muliggøre bestemmelse af blodpladebehandlingsgenvinding for hver prøveforberedelsesmetode og evaluering af RBC- og WBC-kontamination i prøver før radiomærkning. I trin 2 vil blodpladebehandlingsgenvinding under prøveforberedelse blive beregnet ud fra volumen og blodpladeantal, og pH22°C vil blive målt i prøven før radiomærkning.

På den dag, der svarer til slutningen af ​​opbevaring af testkomponenten, vil raske forsøgspersoner vende tilbage til stedet, og 43 ml fuldblod (WB) vil blive trukket ind i en sprøjte indeholdende 9 ml antikoagulant citrat dextroseopløsning, formel A (ACD) EN). Prøven vil blive brugt til at fremstille kontrolblodplader efter BEST-metoden. Test- og kontrolblodplader vil blive tilfældigt radiomærket med enten 51Cr (ca. 10-30μCi) som natriumradiochromat (Na251CrO4) eller 111In (ca. 10-30 μCi) som indiumoxin, afhængigt af randomiseringstildelingen og perioden. Forsøgspersoner vil blive randomiseret med samme sandsynlighed til radiomærkningssekvenserne (111In/51Cr vs. 51Cr/111In) for test/kontrol. Isotopmærkerne vil blive tildelt tilfældigt med lige stor sandsynlighed for, at kontrol- og testblodplader vil blive mærket med hver isotop, og den samme randomiseringstildeling af isotopmærker vil blive brugt til begge aferesesamlinger for det samme emne i trin 1. Efter radioaktiv mærkning infunderes de autologe kontrol- og testblodpladeprøver samtidigt i forsøgspersonen (ca. 10 30 ml). En negativ graviditetstest for kvinder i den fødedygtige alder er påkrævet før infusion.

Blodprøver vil blive udtaget umiddelbart før infusion og til radioaktivitetsmålinger 1 time ± 15 minutter og 2 timer ± 15 minutter efter infusion (dag 0), og yderligere 6 prøver vil blive udtaget ved 1, 2, 3, 4 (eller 5) eller 6), 7 eller 8 og 11±1 dage efter infusion (DPI), på omtrent samme tidspunkt på dagen, som den radiomærkede blodpladeinfusion blev administreret (±4 timer). Det nøjagtige tidspunkt for hver prøveudtrækning vil blive registreret.

For forsøgspersoner, der er tilmeldt trin 1, vil der være en minimumsudvaskningsperiode på fire uger mellem de to undersøgelsesperioder (f.eks. fire uger efter den sidste blodprøve ved 11±1 DPI i periode 1). Forsøgspersoner vil blive overvåget for sikkerhed (uønskede hændelser) fra den første afereseprocedure indtil 24 timer efter, at den sidste DPI-blodprøve er taget.