In-vivo-Studie zur Bewertung der Wiederherstellung und des Überlebens von radioaktiv markierten autologen INTERCEPT-Apherese-Thrombozytenkomponenten, die in 100 % Plasma suspendiert und bis zu 7 Tage gelagert wurden

Die Studie wird in zwei Phasen durchgeführt. Stufe 1 ist ein randomisiertes 2-Perioden-Crossover-Design. Für 7 Tage gelagerte Testplättchen werden für 12 gesunde Probanden entweder nach der BEST- oder der Variante 1-Methode (je nach Zeitraum und Randomisierungsschema für die Testplättchen) radioaktiv markiert. Die Erholung und das Überleben von Testplättchen, die mit den Methoden BEST und Variante 1 hergestellt wurden, werden miteinander und mit der frischen Plättchenkontrolle verglichen. Mit Zustimmung der FDA (BQ200481, 8. Juli 2020) ist der Abschluss von Stufe 1 nicht erforderlich.

Stufe 2 ist ein einarmiges Design. Testplättchen von 24 gesunden Probanden, die 7 Tage lang gelagert wurden, werden für die radioaktive Markierung nach der Methodik von Variante 1 vorbereitet. Die Erholung und das Überleben der Testplättchen werden mit der frischen Plättchenkontrolle verglichen. Probanden der Stufe 1 mit auswertbaren Methodendaten der Variante 1 tragen zum Bedarf der 24 Probanden für Stufe 2 bei.

Für beide Phasen besteht die Studienpopulation aus gesunden Probanden, die die FDA-, AABB- und standortspezifischen Eignungskriterien für Forschungsspender für die Apherese-Thrombozytenspende erfüllen. Apherese-Thrombozyten werden in 100 % Plasma auf dem Trima Accel® Automated Blood Collection System gesammelt.

Jede Apherese-Sammlung der Studie wird mit dem INTERCEPT Blood System for Platelets verarbeitet. Thrombozytenkomponenten mit 3,0 bis 7,9 x 10^11 Thrombozyten in 300 bis 420 ml Plasma werden mit dem INTERCEPT Dual Storage (DS)-Set verarbeitet. Der INTERCEPT-Prozess beginnt entweder am Tag der Sammlung (Tag 0) oder am Tag nach der Spende (Tag 1); Die Beleuchtung muss innerhalb von 24 Stunden nach Ende der Sammlung erfolgen. Testplättchenkomponenten werden ab dem Tag der Entnahme bis zu 7 Tage in 100 % Plasma gelagert.

Während jeder Stufe werden Proben für In-vitro-Thrombozytentests vor der INTERCEPT-Behandlung (Tag 0/1), nach der INTERCEPT-Behandlung und am Ende der Lagerung, Tag 7, entnommen (siehe In-vitro-Bewertung von Thrombozyten unten).

Am Ende der Lagerung wird ein Aliquot der Testplättchen aseptisch aus dem INTERCEPT-Plättchenaufbewahrungsbehälter jedes Probanden entnommen, um Proben für die radioaktive Markierung unter Verwendung der BEST-Methode (Stufe 1) oder Variante 1 (Stufen 1 und 2) vorzubereiten. Die In-vitro-Qualität der für die radioaktive Markierung verwendeten Testplättchenprobe wird vor und nach der Vorbereitung der Blutplättchenprobe vor der radioaktiven Markierung bewertet. Die in Stufe 1 zu messenden Indizes sind Volumen, pH22°C, CD62P, Blutplättchenzahl, Zahl der roten Blutkörperchen (RBC) und Zahl der weißen Blutkörperchen (WBC). Die Bewertung dieser Indizes ermöglicht die Bestimmung der Thrombozytenverarbeitungswiederfindung für jede Probenvorbereitungsmethode und die Bewertung der RBC- und WBC-Kontamination in Proben vor der radioaktiven Markierung. In Phase 2 der Thrombozytenverarbeitung wird die Erholung während der Probenvorbereitung anhand des Volumens und der Thrombozytenzahl berechnet und der pH-Wert 22 °C wird in der Probe vor der radioaktiven Markierung gemessen.

An dem Tag, der dem Ende der Lagerung der Testkomponente entspricht, kehren gesunde Probanden an den Ort zurück und 43 ml Vollblut (WB) werden in eine Spritze aufgezogen, die 9 ml Antikoagulans-Citrat-Dextrose-Lösung, Formel A (ACD EIN). Die Probe wird zur Herstellung von Kontrollplättchen nach der BEST-Methodik verwendet. Test- und Kontrollblutplättchen werden zufällig entweder mit 51Cr (ca. 10–30 μCi) als Natriumradiochromat (Na251CrO4) oder 111In (ca. 10–30 μCi) als Indiumoxin radioaktiv markiert, je nach Randomisierungszuweisung und -zeitraum. Die Probanden werden mit gleicher Wahrscheinlichkeit zu den radioaktiv markierten Sequenzen (111In/51Cr vs. 51Cr/111In) für Test/Kontrolle randomisiert. Die Isotopenkennzeichnungen werden zufällig mit gleicher Wahrscheinlichkeit zugewiesen, dass Kontroll- und Testplättchen mit jedem Isotop gekennzeichnet werden, und dieselbe zufällige Zuweisung von Isotopenkennzeichnungen wird für beide Apheresesammlungen für denselben Probanden in Stufe 1 verwendet. Nach der radioaktiven Markierung werden dem Probanden gleichzeitig die autologe Kontroll- und Testplättchenprobe infundiert (ungefähr 10 30 ml). Vor der Infusion ist bei Frauen im gebärfähigen Alter ein negativer Schwangerschaftstest erforderlich.

Blutproben werden unmittelbar vor der Infusion und für Radioaktivitätsmessungen 1 Stunde ± 15 Minuten und 2 Stunden ± 15 Minuten nach der Infusion (Tag 0) entnommen, und 6 weitere Proben werden am 1., 2., 3., 4. (oder 5 oder 6), 7 oder 8 und 11 ± 1 Tage nach der Infusion (DPI), ungefähr zur gleichen Tageszeit, zu der die Infusion mit radioaktiv markierten Blutplättchen verabreicht wurde (± 4 Stunden). Der genaue Zeitpunkt jeder Probenentnahme wird protokolliert.

Für Probanden, die in Stufe 1 eingeschrieben sind, gibt es zwischen den beiden Studienperioden eine minimale Auswaschphase von vier Wochen (z. B. vier Wochen nach der letzten Blutprobe bei 11 ± 1 DPI in Periode 1). Die Probanden werden vom ersten Aphereseverfahren bis 24 Stunden nach der letzten DPI-Blutprobe auf Sicherheit (Nebenwirkungen) überwacht.