Estudo in vivo para avaliar a recuperação e a sobrevivência de componentes plaquetários de aférese autóloga radiomarcados do INTERCEPT suspensos em plasma 100% armazenado por até 7 dias

O estudo será realizado em duas etapas. O estágio 1 é um design cruzado aleatório de 2 períodos. As plaquetas de teste armazenadas por 7 dias serão radiomarcadas com base nos métodos BEST ou Variante 1 (dependendo do período e esquema de randomização para as plaquetas de teste) para 12 indivíduos saudáveis. A recuperação e a sobrevivência das plaquetas de teste preparadas com os métodos BEST e Variante 1 serão comparadas entre si e com o controle de plaquetas frescas. Com o acordo do FDA (BQ200481, 8 de julho de 2020), a conclusão do Estágio 1 não é necessária.

O estágio 2 é um projeto de braço único. As plaquetas de teste de 24 indivíduos saudáveis, armazenadas por 7 dias, serão preparadas para radiomarcação seguindo a metodologia da Variante 1. A recuperação e a sobrevivência das plaquetas de teste serão comparadas com o controle de plaquetas frescas. Os indivíduos do Estágio 1 com dados avaliáveis ​​do método da Variante 1 contribuirão para o requisito dos 24 indivíduos para o Estágio 2.

Para ambos os estágios, a população do estudo consistirá em indivíduos saudáveis ​​que atendem aos critérios de elegibilidade de doadores de pesquisa da FDA, AABB e específicos do local para doação de plaquetas por aférese. As plaquetas de aférese serão coletadas em plasma 100% no sistema automatizado de coleta de sangue Trima Accel®.

Cada coleta de aférese do estudo será processada usando o Sistema de Sangue para Plaquetas INTERCEPT. Componentes de plaquetas contendo 3,0 a 7,9 x10^11 plaquetas em 300 a 420 mL de plasma serão processados ​​usando o conjunto INTERCEPT Dual Storage (DS). O processo INTERCEPT terá início no dia da recolha (Dia 0) ou no dia seguinte à dádiva (Dia 1); a iluminação deve ocorrer em até 24 horas após o término da coleta. Os componentes das plaquetas de teste serão armazenados por até 7 dias, a partir do dia da coleta, em plasma 100%.

Durante cada estágio, amostras para teste de plaquetas in vitro serão coletadas antes do tratamento INTERCEPT (Dia 0/1), após o tratamento INTERCEPT e no final do armazenamento, Dia 7 (consulte Avaliação in vitro de plaquetas abaixo).

No final do armazenamento, uma alíquota de plaquetas de teste será removida assepticamente do recipiente de armazenamento de plaquetas INTERCEPT de cada indivíduo para preparação de amostras para radiomarcação usando a metodologia BEST (Estágio 1) ou Variante 1 (Estágios 1 e 2). A qualidade in vitro da amostra de plaquetas de teste usada para marcação radioativa será avaliada antes e após as preparações de amostras de plaquetas pré-marcação radioativa. Os índices a serem medidos no Estágio 1 são volume, pH22°C, CD62P, contagem de plaquetas, contagem de glóbulos vermelhos (RBC) e contagem de glóbulos brancos (WBC). As avaliações desses índices permitirão a determinação da recuperação do processamento de plaquetas para cada método de preparação de amostra e a avaliação da contaminação de hemácias e glóbulos brancos em amostras antes da marcação radioativa. No estágio 2, a recuperação do processamento de plaquetas durante a preparação da amostra será calculada a partir do volume e da contagem de plaquetas e o pH de 22°C será medido na amostra antes da marcação radioativa.

No dia correspondente ao término do armazenamento do componente de Teste, os indivíduos saudáveis ​​retornarão ao local e 43 mL de sangue total (WB) serão colhidos em uma seringa contendo 9 mL de Solução Anticoagulante Citrato Dextrose, Fórmula A (ACD UMA). A amostra será utilizada para preparar plaquetas de controle seguindo a metodologia BEST. As plaquetas de teste e controle serão radiomarcadas aleatoriamente com 51Cr (aproximadamente 10-30μCi) como radiocromato de sódio (Na251CrO4) ou 111In (aproximadamente 10-30 μCi) como oxina de índio, dependendo da atribuição de randomização e do período aplicável. Os indivíduos serão randomizados com igual probabilidade para as sequências de radiomarcação (111In/51Cr vs. 51Cr/111In) para Teste/Controle. Os rótulos de isótopos serão atribuídos aleatoriamente com igual probabilidade de que as plaquetas de controle e teste sejam marcadas com cada isótopo, e a mesma atribuição aleatória de rótulos de isótopos será utilizada para ambas as coletas de aférese para o mesmo sujeito no Estágio 1. Após a marcação radioativa, as amostras autólogas de plaquetas Controle e Teste serão infundidas simultaneamente no indivíduo (aproximadamente 10 30 mL). Um teste de gravidez negativo para mulheres com potencial para engravidar é necessário antes da infusão.

Amostras de sangue serão coletadas imediatamente antes da infusão e para medições de radioatividade em 1 hora ± 15 min e 2 horas ± 15 min pós-infusão (Dia 0), e mais 6 amostras serão coletadas em 1, 2, 3, 4 (ou 5 ou 6), 7 ou 8 e 11±1 dias pós-infusão (DPI), aproximadamente na mesma hora do dia em que foi administrada a infusão de plaquetas radiomarcadas (±4 horas). A hora exata de cada coleta de amostra será registrada.

Para indivíduos inscritos no Estágio 1, haverá um período mínimo de washout de quatro semanas entre os dois períodos de estudo (por exemplo, quatro semanas após a última amostra de sangue em 11±1 DPI, no Período 1). Os indivíduos serão monitorados quanto à segurança (eventos adversos) desde o primeiro procedimento de aférese até 24 horas após a coleta da última amostra de sangue DPI.