Estudio in vivo para evaluar la recuperación y supervivencia de componentes de plaquetas de aféresis INTERCEPT autólogas radiomarcadas suspendidas en plasma 100 % almacenado hasta por 7 días

El estudio se realizará en dos etapas. La etapa 1 es un diseño cruzado aleatorizado de 2 períodos. Las plaquetas de prueba almacenadas durante 7 días se marcarán radiactivamente según los métodos BEST o Variant 1 (según el período y el esquema de aleatorización de las plaquetas de prueba) para 12 sujetos sanos. La recuperación y la supervivencia de las plaquetas de prueba preparadas con los métodos BEST y Variant 1 se compararán entre sí y con el control de plaquetas frescas. Con el acuerdo de la FDA (BQ200481, 8 de julio de 2020), no se requiere completar la Etapa 1.

La etapa 2 es un diseño de un solo brazo. Las plaquetas de prueba de 24 sujetos sanos, almacenadas durante 7 días, se prepararán para el marcaje radiactivo siguiendo la metodología de la Variante 1. La recuperación y la supervivencia de las plaquetas de prueba se compararán con el control de plaquetas frescas. Los sujetos de la Etapa 1 con datos evaluables del método de la Variante 1 contribuirán al requisito de los 24 sujetos para la Etapa 2.

Para ambas etapas, la población del estudio consistirá en sujetos sanos que cumplan con los criterios de elegibilidad de donantes de investigación de la FDA, AABB y específicos del sitio para la donación de plaquetas por aféresis. Las plaquetas de aféresis se recolectarán en plasma al 100 % en el sistema de recolección de sangre automatizado Trima Accel®.

Cada colección de aféresis del estudio se procesará utilizando el sistema de sangre INTERCEPT para plaquetas. Los componentes de plaquetas que contengan de 3,0 a 7,9 x10^11 plaquetas en 300 a 420 ml de plasma se procesarán con el conjunto INTERCEPT Dual Storage (DS). El proceso INTERCEPT comenzará el día de la recolección (Día 0) o el día siguiente a la donación (Día 1); la iluminación debe ocurrir dentro de las 24 horas posteriores al final de la recolección. Los componentes de las plaquetas de prueba se almacenarán hasta 7 días, desde el día de la recolección, en plasma al 100 %.

Durante cada etapa, se recolectarán muestras para la prueba de plaquetas in vitro antes del tratamiento con INTERCEPT (Día 0/1), después del tratamiento con INTERCEPT y al final del almacenamiento, Día 7 (ver Evaluación in vitro de plaquetas a continuación).

Al final del almacenamiento, se extraerá asépticamente una alícuota de las plaquetas de prueba del contenedor de almacenamiento de plaquetas INTERCEPT de cada sujeto para preparar muestras para el marcaje radiactivo utilizando la metodología BEST (Etapa 1) o Variante 1 (Etapas 1 y 2). La calidad in vitro de la muestra de plaquetas de prueba utilizada para el marcaje radiactivo se evaluará antes y después de las preparaciones de muestras de plaquetas previas al marcaje radiactivo. Los índices a medir en la Etapa 1 son volumen, pH22°C, CD62P, recuento de plaquetas, recuento de glóbulos rojos (RBC) y recuento de glóbulos blancos (WBC). Las evaluaciones de estos índices permitirán la determinación de la recuperación del procesamiento de plaquetas para cada método de preparación de muestras y la evaluación de la contaminación de glóbulos rojos y glóbulos blancos en las muestras antes del marcaje radiactivo. En la Etapa 2, la recuperación del procesamiento de plaquetas durante la preparación de la muestra se calculará a partir del volumen y el recuento de plaquetas y se medirá el pH a 22 °C en la muestra antes del marcaje radiactivo.

El día correspondiente al final del almacenamiento del componente de prueba, los sujetos sanos regresarán al sitio y se extraerán 43 ml de sangre completa (WB) en una jeringa que contiene 9 ml de solución anticoagulante citrato dextrosa, fórmula A (ACD A). La muestra se utilizará para preparar Plaquetas de Control siguiendo la metodología BEST. Las plaquetas de prueba y control se marcarán aleatoriamente con 51Cr (aproximadamente 10-30 μCi) como radiocromato de sodio (Na251CrO4) o 111In (aproximadamente 10-30 μCi) como oxina de indio, según la asignación aleatoria y el período, según corresponda. Los sujetos se aleatorizarán con igual probabilidad a las secuencias de radiomarcaje (111In/51Cr frente a 51Cr/111In) para Prueba/Control. Las etiquetas de isótopos se asignarán aleatoriamente con la misma probabilidad de que las plaquetas de control y de prueba se etiqueten con cada isótopo, y se utilizará la misma asignación aleatoria de etiquetas de isótopos para ambas colecciones de aféresis para el mismo sujeto en la Etapa 1. Después del radiomarcaje, las muestras autólogas de plaquetas de control y prueba se infundirán simultáneamente en el sujeto (aproximadamente 10 30 ml). Se requiere una prueba de embarazo negativa para mujeres en edad fértil antes de la infusión.

Se extraerán muestras de sangre inmediatamente antes de la infusión y para las mediciones de radiactividad 1 hora ± 15 min y 2 horas ± 15 min después de la infusión (Día 0), y se extraerán 6 muestras más en 1, 2, 3, 4 (o 5 o 6), 7 u 8 y 11±1 días después de la infusión (DPI), aproximadamente a la misma hora del día en que se administró la infusión de plaquetas radiomarcadas (±4 horas). Se registrará la hora exacta de cada extracción de muestra.

Para los sujetos inscritos en la Etapa 1, habrá un período de lavado mínimo de cuatro semanas entre los dos períodos de estudio (p. ej., cuatro semanas después de la última muestra de sangre a 11 ± 1 DPI, en el Período 1). Los sujetos serán monitoreados por seguridad (eventos adversos) desde el primer procedimiento de aféresis hasta 24 horas después de que se extraiga la última muestra de sangre DPI.