Studio in vivo per valutare il recupero e la sopravvivenza di componenti piastrinici autologhi radiomarcati per aferesi INTERCEPT sospesi in plasma al 100% conservati fino a 7 giorni

Lo studio si svolgerà in due fasi. La fase 1 è un disegno incrociato randomizzato a 2 periodi. Le piastrine di prova conservate per 7 giorni saranno radiomarcate in base ai metodi BEST o Variante 1 (a seconda del periodo e dello schema di randomizzazione per le piastrine di prova) per 12 soggetti sani. Il recupero e la sopravvivenza per le piastrine di prova preparate con i metodi BEST e Variante 1 saranno confrontati tra loro e con il controllo delle piastrine fresche. Con l'accordo della FDA (BQ200481, 8 luglio 2020), non è richiesto il completamento della Fase 1.

La fase 2 è un design a braccio singolo. Le piastrine di prova di 24 soggetti sani, conservate per 7 giorni, saranno preparate per la radiomarcatura seguendo la metodologia Variante 1. Il recupero e la sopravvivenza per le piastrine di prova saranno confrontate con il controllo delle piastrine fresche. I soggetti della Fase 1 con dati valutabili del metodo Variante 1 contribuiranno al requisito dei 24 soggetti per la Fase 2.

Per entrambe le fasi, la popolazione dello studio sarà composta da soggetti sani che soddisfano i criteri di ammissibilità dei donatori di ricerca FDA, AABB e sito-specifici per la donazione di piastrine per aferesi. Le piastrine di aferesi saranno raccolte nel plasma al 100% sul sistema di prelievo automatico del sangue Trima Accel®.

Ogni raccolta di aferesi dello studio verrà elaborata utilizzando INTERCEPT Blood System for Platelets. I componenti piastrinici contenenti da 3,0 a 7,9 x10^11 piastrine in 300-420 mL di plasma verranno elaborati utilizzando il set INTERCEPT Dual Storage (DS). Il processo INTERCEPT inizierà il giorno della raccolta (giorno 0) o il giorno successivo alla donazione (giorno 1); l'illuminazione deve avvenire entro 24 ore dal termine della raccolta. I componenti delle piastrine del test verranno conservati per un massimo di 7 giorni, dal giorno della raccolta, in plasma al 100%.

Durante ogni fase, i campioni per il test delle piastrine in vitro saranno raccolti prima del trattamento con INTERCEPT (giorno 0/1), dopo il trattamento con INTERCEPT e alla fine della conservazione, giorno 7 (vedere Valutazione in vitro delle piastrine di seguito).

Al termine della conservazione, un'aliquota di piastrine del test verrà rimossa in modo asettico dal contenitore di conservazione delle piastrine INTERCEPT di ciascun soggetto per la preparazione dei campioni per la radiomarcatura utilizzando la metodologia BEST (Fase 1) o Variante 1 (Fasi 1 e 2). La qualità in vitro del campione di piastrine di prova utilizzato per la radiomarcatura sarà valutata prima e dopo la preparazione del campione di piastrine pre-radiomarcatura. Gli indici da misurare nella Fase 1 sono volume, pH22°C, CD62P, conta piastrinica, conta dei globuli rossi (RBC) e conta dei globuli bianchi (WBC). Le valutazioni di questi indici consentiranno la determinazione del recupero dell'elaborazione delle piastrine per ciascun metodo di preparazione del campione e la valutazione della contaminazione di RBC e WBC nei campioni prima della radiomarcatura. Nella Fase 2, il recupero dell'elaborazione delle piastrine durante la preparazione del campione sarà calcolato dal volume e dalla conta piastrinica e il pH22°C sarà misurato nel campione prima della radiomarcatura.

Il giorno corrispondente alla fine della conservazione del componente del test, i soggetti sani torneranno al sito e 43 mL di sangue intero (WB) saranno aspirati in una siringa contenente 9 mL di soluzione di destrosio citrato anticoagulante, Formula A (ACD UN). Il campione sarà utilizzato per preparare le piastrine di controllo seguendo la metodologia BEST. Le piastrine di test e di controllo saranno radiomarcate in modo casuale con 51Cr (circa 10-30 μCi) come sodio radiocromato (Na251CrO4) o 111In (circa 10-30 μCi) come indio ossina, a seconda dell'assegnazione e del periodo di randomizzazione applicabili. I soggetti saranno randomizzati con uguale probabilità alle sequenze radiomarcanti (111In/51Cr vs. 51Cr/111In) per Test/Controllo. Le etichette degli isotopi verranno assegnate in modo casuale con la stessa probabilità che le piastrine di controllo e test vengano etichettate con ciascun isotopo e la stessa assegnazione di randomizzazione delle etichette degli isotopi verrà utilizzata per entrambe le raccolte di aferesi per lo stesso soggetto nella Fase 1. Dopo la radiomarcatura, i campioni autologhi di piastrine di controllo e test verranno infusi simultaneamente nel soggetto (circa 10 30 mL). Prima dell'infusione è necessario un test di gravidanza negativo per le donne in età fertile.

I campioni di sangue verranno prelevati immediatamente prima dell'infusione e per le misurazioni della radioattività a 1 ora ± 15 min e 2 ore ± 15 min post-infusione (Giorno 0), e altri 6 campioni verranno prelevati a 1, 2, 3, 4 (o 5 o 6), 7 o 8 e 11±1 giorni dopo l'infusione (DPI), all'incirca alla stessa ora del giorno in cui è stata somministrata l'infusione di piastrine radiomarcate (±4 ore). Verrà registrata l'ora esatta di ogni estrazione del campione.

Per i soggetti arruolati nella Fase 1, ci sarà un periodo minimo di sospensione di quattro settimane tra i due periodi di studio (ad esempio, quattro settimane dopo l'ultimo prelievo di sangue a 11±1 DPI, nel Periodo 1). I soggetti saranno monitorati per la sicurezza (eventi avversi) dalla prima procedura di aferesi fino a 24 ore dopo il prelievo dell'ultimo campione di sangue DPI.