Diätstrategien zur Behandlung von Fibromyalgie bei übergewichtigen und adipösen Patienten (FIBRODIET)

Fibromyalgie (FM) ist ein heterogenes und behinderndes Syndrom, das durch Schmerzen an mehreren Stellen, Schlafstörungen, kognitive Dysfunktion („Fibro-Fog“) und Müdigkeit gekennzeichnet ist. Die Prävalenz von FM beträgt etwa 1–5 % in der erwachsenen Bevölkerung, mit einem globalen Verhältnis von Frauen zu Männern von etwa 3:1.

Die Ätiopathogenese der Erkrankung bleibt unklar; jedoch deutet die zunehmende Evidenz darauf hin, dass FM eine zentrale Störung ist, die Schmerzen durch eine veränderte Verarbeitung von nicht-schmerzhaften oder leicht schmerzhaften Reizen erzeugt. Schmerz bei FM wird als nociplastisch klassifiziert, definiert als „Schmerz, der aus einer veränderten Nozizeption resultiert, ohne dass ein klarer Nachweis für eine tatsächliche oder drohende Gewebeschädigung vorliegt, die eine Aktivierung peripherer Nozizeptoren verursacht.“ Kürzlich wurde ein theoretisches Modell der FM-Pathogenese vorgeschlagen, basierend auf umfangreicher Literatur, die eine Rolle von Gamma-Aminobuttersäure (GABA) – dem wichtigsten inhibitorischen Neurotransmitter des Zentralnervensystems – in der Pathophysiologie chronischer Schmerzzustände wie FM nahelegt. Insbesondere postuliert das vorgeschlagene Modell, dass eine reduzierte GABAerge Neurotransmission auf thalamokortikaler Ebene – möglicherweise im Zusammenhang mit einem neuroendokrinen Ungleichgewicht, das zu einer veränderten Aktivität von Neurosteroiden mit positiver allosterischer Modulation von GABA-A-Rezeptoren oder NMDA-Rezeptoren führt – zur Entwicklung von Fibromyalgie-Schmerzen beitragen könnte. Diese Hypothese bedarf einer Validierung durch präklinische und interventionelle Studien.

FM wird typischerweise mit einem multimodalen Ansatz behandelt, der sowohl nicht-pharmakologische als auch pharmakologische Strategien umfasst. Die häufigsten nicht-pharmakologischen Interventionen sind Physiotherapie, Entspannungstechniken, Psychotherapie, Akupunktur und Ernährungstherapie.

Die Ernährung ist tatsächlich der primäre Faktor, der die Mikrobiota-Darm-Hirn-Achse beeinflussen kann, und Dysbiose wurde mit mehreren zentral vermittelten Störungen in Verbindung gebracht, einschließlich veränderter Nozizeption und FM. Tatsächlich können mikrobielle Metaboliten – insbesondere kurzkettige Fettsäuren (SCFAs) – die zentrale Neurotransmission modulieren, indem sie beispielsweise das GABA/Glutamat-Verhältnis verändern. Darüber hinaus erreicht die Prävalenz von Übergewicht/Adipositas 70 % bei Patienten mit FM, ein Wert, der deutlich höher ist als in der Allgemeinbevölkerung. Die hohe Prävalenz von Übergewicht/Adipositas, Dysbiose und gastrointestinalen Veränderungen bei FM legt nahe, dass Ernährungstherapie und die Mikrobiota-Darm-Hirn-Achse eine wichtige Rolle in der Pathogenese von FM spielen könnten.

Obwohl Daten zur Beziehung zwischen verschiedenen Ernährungsansätzen und FM begrenzt sind, wurde die mediterrane Ernährung in einer Beobachtungsstudie mit 186 Personen mit FM mit geringerer Schmerzintensität in Verbindung gebracht. Eine Pilotstudie mit 18 Patienten berichtete ebenfalls über die Wirksamkeit der ketogenen Ernährung nicht nur bei der Förderung von Gewichtsverlust, sondern auch bei der Verbesserung der Symptom-Schwere bei adipösen Frauen mit FM. Ebenso deutet die Evidenz darauf hin, dass die ketogene Ernährung die GABA-Spiegel erhöhen und allgemeiner das GABA/Glutamat-Verhältnis steigern kann.

In diesem Zusammenhang könnte es neben der Ernährungstherapie angemessen sein, eine Supplementation mit Bakterienstämmen in Betracht zu ziehen, die Neurotransmitter – wie GABA – produzieren können, die bei Patienten mit FM möglicherweise defizitär sind und vorteilhafte Effekte auf das zentrale Nervensystem ausüben könnten.

Das primäre Ziel dieser Studie ist es, die Auswirkung eines spezifischen Ernährungsansatzes – ketogene Ernährung, mediterrane Ernährung oder mediterrane Ernährung ergänzt mit GABA-produzierenden Probiotika wie Bifidobacterium adolescentis PRL2019 – auf die Schwere der FM zu bewerten, mit besonderem Fokus auf Schmerz, Schlafqualität, Angst und Depression, gemessen mittels validierter Fragebögen bei weiblichen Probanden mit diagnostizierter Fibromyalgie und leichtem Übergewicht/Adipositas.

Die sekundären Ziele sind, die Auswirkung der Ernährungsintervention auf anthropometrische Maße, metabolische Parameter und Körperzusammensetzung der Teilnehmer zu bewerten; die Wirkung der Ernährungsintervention auf die Zusammensetzung der Darmmikrobiota durch Metabolomanalyse zu evaluieren; und die Spiegel von Neurosteroiden mit positiver allosterischer Aktivität an GABA-A- oder NMDA-Rezeptoren in Speichel und/oder Plasma zu messen. Zusätzlich zielt eine explorative Pilot-Substudie darauf ab, zerebrale GABA- und Glutamat-Spiegel mittels Magnetresonanzspektroskopie bei einer kleinen Untergruppe von Patienten zu messen.

Die Teilnehmer dieser Studie werden aus den Ambulanzen der Rheumatologie-Einheit am IRCCS Policlinico San Martino Krankenhaus in Genua rekrutiert. Angesichts der hohen Prävalenz von FM bei Frauen wird die Studienstichprobe erwachsene weibliche Patienten mit diagnostizierter Fibromyalgie und leichtem Übergewicht/Adipositas umfassen.

Jeder in die Studie eingeschlossene Patient wird selbstständig, in der Rheumatologie-Einheit, eine Reihe validierter Fragebögen ausfüllen, die darauf ausgelegt sind, die Schwere der FM genau zu erfassen, mit besonderem Fokus auf folgende Symptome: Schmerz, Schlafqualität, Depression, Angst und Darmfunktion. Die Patienten werden gebeten, die Fragebögen bei Einschluss/Baseline, alle vier Wochen während der Nachsorgetermine gemäß Studienprotokoll und am Ende der Intervention (12 Wochen) auszufüllen.

Die Fragebögen umfassen den Widespread Pain Index (WPI) und die Symptom Severity Scale (SSS), beide verwendet in der Diagnose von FM, sowie den Fibromyalgia Impact Questionnaire (FIQR). Der FIQR bewertet die Lebensqualität der Patienten, einschließlich körperlicher Funktion, Gesamtauswirkung der Erkrankung und Symptome. Er ist der am weitesten verbreitete Fragebogen in Forschung und klinischer Praxis zur Einschätzung der Erkrankungsschwere, und eine minimal klinisch relevante Differenz wurde als 14 %ige Reduktion des Scores definiert.

Zur weiteren Untersuchung des Schmerzes wird eine 11-Punkte Numerische Rating-Skala verwendet, um die durchschnittliche globale Schmerzintensität in den letzten 24 Stunden zu bewerten. Der PainDETECT Questionnaire (PD-Q) wird die Art und Eigenschaften des Schmerzes evaluieren, insbesondere neuropathische/nociplastische Komponenten, vor allem bei Patienten mit chronischen Schmerzen.

Angst und Depression werden mittels der Hospital Anxiety and Depression Scale (HADS) bewertet, die 7 Items für Angst und 7 für Depression umfasst und zwei unabhängige Scores liefert: HADS-A und HADS-D. Die Schlafqualität wird mit dem Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI) bewertet, der Schlaflatenz, -dauer, -effizienz und -störungen erfasst.

Zur Identifikation funktioneller gastrointestinaler Störungen, insbesondere Reizdarmsyndrom (IBS), werden die Rom-IV-Kriterien und die Bristol Stool Form Scale, die Stuhlform und -konsistenz klassifiziert, angewendet.

Beim T0-Termin werden alle für die Studienbewertung notwendigen klinischen Daten erhoben, einschließlich soziodemografischer Informationen, Einhaltung der mediterranen Ernährung (bewertet via validiertem PREDIMED-Fragebogen), Grundumsatz berechnet mit der Mifflin-Formel, Ernährungs-, klinische, familiäre und medizinische Anamnese, Rauchgewohnheiten, Blutdruckmessung und die aktuellsten Laborergebnisse.

Die Teilnehmer werden dann Blutproben für routinemäßige Laboruntersuchungen gemäß klinischer Praxis abgeben, wobei ein Teil der Probe für die Metabolomanalyse reserviert wird. Metaboliten werden aus Blutproben mittels Methanol und MTBE für ungerichtete Metabolom-Profilierung extrahiert, und das MSK-QC-KIT wird vor der Injektion in das UHPLC-System hinzugefügt. Chromatographische Trennung wird unter C18- und HILIC-Bedingungen durchgeführt. Massenspektrometrie-Daten werden mit einem hybriden Quadrupol-Orbitrap Q Exactive Plus im Full-Scan-Modus, sowohl in positiver als auch negativer Ionisation, erfasst. Daten werden zur Dekonvolution, Peak-Picking, Ausrichtung und Verbindungsidentifikation verarbeitet. Eine prozedurale Blindprobe wird zur Hintergrundsubtraktion und Rauschunterdrückung während der Vorverarbeitung verwendet. Verbindungsannotation wird mit MS-FINDER Ver. 3.26 durchgeführt, gefolgt von bioinformatischen Analysen für Metabolit- und Pathway-Anreicherung.

Routinelaboruntersuchungen werden in den Laboren des Policlinico San Martino durchgeführt, während die ungerichtete Metabolomanalyse der Darmmikrobiota in den DINOGMI-Universitätslaboren (IRCCS Giannina Gaslini) erfolgt.

Schließlich werden die Teilnehmer auch gebeten, Speichelproben bereitzustellen, in denen Spiegel neuroaktiver Steroide wie Cortisol, Progesteron und DHEA mittels ELISA-Analyse gemessen werden. Diese Analyse wird in den DIFAR-Universitätslaboren (UNIGE) durchgeführt.

Innerhalb der folgenden sieben Tage findet ein Termin in derselben von der Rheumatologie-Einheit bestimmten Ambulanz statt, bei dem die bei T0 erhaltenen Ergebnisse mit dem Teilnehmer besprochen werden. Wenn keine Probleme im Zusammenhang mit potenziellen Screening-Fehlern identifiziert werden, werden die Teilnehmer mit der Randomisierung fortfahren und ihren Ernährungsplan vom dedizierten Personal derselben Klinik, in Zusammenarbeit mit der Einheit für Diätetik und klinische Ernährung desselben Krankenhauses, erhalten.

Während des T1-Termins werden die Teilnehmer zufällig einer von drei Ernährungsgruppen zugeteilt: hypokalorische ketogene Ernährung, mediterrane Ernährung oder mediterrane Ernährung ergänzt mit Probiotika. Sie erhalten dann den entsprechenden Ernährungsplan, begleitet von detaillierten Anweisungen sowohl schriftlich als auch durch eine individuelle Beratung. Von den vorgeschlagenen Ernährungsplänen werden keine Nebenwirkungen erwartet, außer bei der ketogenen Ernährung, wo seltene Nebenwirkungen vorübergehend sind und Übelkeit, Erbrechen, vorübergehende Lethargie, Anorexie, Hypoglykämie, Dehydratation, Azidose, Verstopfung, abdominale Blähungen, Kopfschmerzen und Müdigkeit umfassen können.

Anthropometrische Messungen werden durchgeführt, einschließlich Gewicht, Größe, Berechnung des Body Mass Index (BMI), Taillenumfang und Taille-Hüfte-Verhältnis. Körperzusammensetzungsanalyse kann mittels bioelektrischer Impedanzanalyse (BIA) erfolgen. Anthropometrische Messungen und biologische Proben werden erneut bei den Nachsorgeterminen alle vier Wochen und am Ende der 12-wöchigen Studienperiode gesammelt.

Für die Pilot-Substudie werden GABA- und Glutamat-Spiegel in spezifischen Hirnregionen mittels Magnetresonanzspektroskopie (MRS) gemessen. Zu diesem Zweck wird eine Untergruppe von 18 Patienten – 6 pro Ernährungsarm – für diese Analyse ausgewählt und eine spezifische Einwilligungserklärung unterschreiben. Die Prozedur wird zweimal durchgeführt: erstens bei T1, abhängig von der Verfügbarkeit des Scanners, vor Beginn der Ernährung, und ein zweites Mal nach 4 Wochen.

Die Spektroskopie-Ergebnisse, mit Fokus auf GABA- und Glutamat-Spiegel bei den Patienten, werden mit Spektren von sechs Kontrollprobanden verglichen. Kontrollprobanden werden mittels anamnestischer und aktueller medizinischer Anamnese gescreent, um das potenzielle Vorliegen organ-spezifischer Pathologien zum Zeitpunkt der Bewertung durch den Neuroradiologen auszuschließen. Gemäß routinemäßiger klinischer Praxis wird ein Voruntersuchungs-Fragebogen zur Bewertung möglicher Kontraindikationen ausgefüllt und sowohl vom überwachenden Neuroradiologen als auch vom Teilnehmer unterschrieben. Es wird kein Kontrastmittel verabreicht.

Die Rekrutierung von Kontrollprobanden ist notwendig, weil die Messung des GABA-Glutamat-Peaks in ZNS-Regionen herausfordernd und komplex ist. Die Etablierung von Baseline-GABA- und Glutamat-Spiegeln bei gesunden Kontrollen ist essentiell für den Vergleich mit FM-Patienten, die möglicherweise veränderte Spiegel aufweisen. Wenn während der MRS-Untersuchung bei Kontrollen oder FM-Patienten pathologische Befunde vermutet werden, wird der Neuroradiologe die Probanden informieren und eine vollständige morphologische MR-Studie, mit Kontrastmittel falls nötig, empfehlen.

Magnetresonanztomographie (MRI) verwendet Radiofrequenzwellen anstelle von ionisierender Strahlung, im Gegensatz zur Computertomographie, und mit geeigneten Sequenzen sind derzeit keine spezifischen Risiken für Teilnehmer bekannt. Datenverarbeitung wird offline mit der Gannet-Software Version 3 durchgeführt, entwickelt für die Analyse von Einzelvoxel-1H-MRS-Daten zur Messung von GABA und Glutamat. Metabolit-Konzentrationen werden in institutionellen Einheiten, relativ zu Wasser, mit einem Korrekturfaktor aus dem Anteil der Zerebrospinalflüssigkeit im Voxel ausgedrückt. Die Software ermöglicht die Ko-Registrierung des Strukturbildes mit dem Voxel und Segmentierung in die drei Hauptgewebetypen zur Berechnung dieses Korrekturfaktors. Änderungen in Metabolit-Konzentrationen zwischen T0 und T4 werden relativ zu Baseline berechnet, und T4-Werte werden mit den Mittelwerten der Kontrollen verglichen.

Der verwendete MRI-Scanner wird ein 3T Prisma Siemens sein, verfügbar in der Neuroradiologie-Einheit und routinemäßig für klinische und Forschungszwecke genutzt. Die MEGA-PRESS-Sequenz, enthalten in den Akquisitionsprotokollen, wird für diese Art der Messung verwendet. Zwei Voxel – 30 × 30 × 30 mm³ – werden positioniert: eines im linken Thalamus und eines im linken parietalen somatosensorischen Kortex. Diese Regionen wurden als repräsentativ für sensorischen Kortex und thalamische Relais-Strukturen gewählt, die sensorische Pfade, einschließlich Schmerzverarbeitung, widerspiegeln. Zusätzlich werden zwei strukturelle Bildgebungssequenzen, T1-MPRAGE 3D und FLAIR-3D, für die Datenanalyse erfasst.

Einschlusskriterien

• Erwachsene weibliche Patienten mit diagnostizierter Fibromyalgie, Alter ≤ 65 Jahre, mit Übergewicht oder Adipositas Grad I (24,9 < BMI ≤ 34,9 kg/m²).
• Patienten, die in der Lage sind, selbstständig eine schriftliche Einwilligungserklärung für die Studienteilnahme zu geben.
• Patienten, die motiviert sind, an der Studie teilzunehmen und die Ernährungspläne autonom umsetzen können.

Ausschlusskriterien

• Fehlende unterschriebene Einwilligungserklärung.
• Alter < 18 oder > 65 Jahre.
• Männliches Geschlecht.
• Patienten mit Nahrungsmittelallergien oder Zöliakie, Typ-1-Diabetes mellitus oder autoimmunen Formen von Diabetes oder schwerer Pankreas-Beta-Zell-Dysfunktion; Patienten behandelt mit SGLT2-Inhibitoren; solche mit kürzlichen kardiovaskulären oder zerebrovaskulären Ereignissen, Leberversagen, moderatem oder schwerem Nierenversagen, respiratorischer Insuffizienz, Gichtanfällen, Nierensteinen, Elektrolytstörungen, NYHA-Klasse III-IV Herzinsuffizienz, instabiler Angina, Herzrhythmusstörungen oder Myokardinfarkt innerhalb der letzten 12 Monate; schwere Depression oder andere psychiatrische Störungen; Drogen-, Narkotika- oder Alkoholmissbrauch; gebrechliche Patienten; Schwangerschaft oder Stillzeit; Patienten mit geplanter Operation oder invasiven Prozeduren; seltene metabolische Störungen wie Porphyrie, Carnitinmangel, Carnitin-Palmitoyl-Transferase-Mangel, Carnitin-Acylcarnitin-Translocase-Mangel, Pyruvat-Carboxylase-Mangel oder mitochondriale Beta-Oxidationsstörungen; Patienten unter Diuretika-Therapie.
• Verwendung von Präbiotika und/oder Probiotika, die nicht von der Studie spezifiziert sind, oder anderen Nahrungsergänzungsmitteln innerhalb eines Monats vor Einschluss.
• Antibiotika-Behandlung innerhalb von 3 Monaten vor Rekrutierung.
• Aktive Infektionen zum Zeitpunkt der Rekrutierung oder chronische gastrointestinale Störungen (z.B. Morbus Crohn).
• Signifikante Essprobleme (z.B. Dysphagie).

Zusätzliche Ausschlusskriterien für MRI

• Implantierte metallische Geräte (z.B. Schrittmacher).
• Kopf-, Hals- oder Körpergröße inkompatibel mit MRI-Scanner.
• Vorhandensein von Piercings oder schwerer Klaustrophobie.

Studienstichprobe

• 90 weibliche Patienten: 30 zugeteilt zur ketogenen Ernährung (VLCKD), 30 zur mediterranen Ernährung (MD) und 30 zur mediterranen Ernährung ergänzt mit Probiotika (MDP). Eine 10%ige Dropout-Rate wird basierend auf der Literatur zu Fibromyalgie-Behandlung und Ernährungsinterventionen erwartet.

Pilot-Substudie

• 18 weibliche Patienten, 6 pro Ernährungsgruppe, werden für die MRS-Analyse eingeschlossen.

Studiendauer und Bewertungen

• Jeder Patient durchläuft eine 12-wöchige Ernährungsintervention.
• Baseline-Bewertung bei T0, Randomisierung und Ernährungsplan-Aushändigung bei T1.
• Nachsorgetermine bei 4, 8 und 12 Wochen (T4, T8, T12).
• Optionale Telefonkontakte bei 2 oder 6 Wochen (T2 oder T6) falls nötig.

Mediterrane Ernährung Eine mediterrane hypokalorische Ernährung von 1.400 kcal/Tag wird bereitgestellt. Makronährstoff-Verteilung folgt den Italienischen Referenzwerten für Nährstoff- und Energiezufuhr (LARN, 5. Auflage): 0,8–1,2 g/kg Körpergewicht für Protein, 45–60 % der Kalorien aus Kohlenhydraten und 20–35 % aus Lipiden. Tägliche Kalorienverteilung wird sein: 15 % beim Frühstück, 35–40 % beim Mittagessen, 30–35 % beim Abendessen und die verbleibenden 10 % aufgeteilt in zwei Snacks. Jeder Teilnehmer folgt der mediterranen Ernährung für die gesamte 12-wöchige Intervention, mit Anpassungen nach Bedarf, um Compliance sicherzustellen.

Sehr niedrigkalorische ketogene Ernährung (VLCKD):

Die VLCKD ist ein kohlenhydratarmes, kalorienreduziertes Ernährungsregime mit adäquater Proteinzufuhr. Ihr Mechanismus basiert auf Ketonproduktion, genutzt als alternative Energiequelle zu Glukose. Ketose tritt auf, wenn Kohlenhydrataufnahme extrem niedrig ist, was den Körper zwingt, Fett für Energie zu mobilisieren. VLCKD hat sich als effektiv für schnellen Gewichtsverlust bei adipösen Personen erwiesen, die bei anderen Ernährungsinterventionen versagt haben, und ist als therapeutische Option in Leitlinien zum Adipositas-Management enthalten. Jüngste Evidenz deutet auf zusätzliche Vorteile für Stimmung, kognitive Funktion, Nozizeption und Schlafqualität hin.

In dieser Studie erhalten Teilnehmer Lebensmittel-Kits, vorbereitet von SDM (Pronokal Group), die alle Mahlzeiten und Vitamin-Supplemente liefern, die für Nährstoffbilanz und VLCKD-Compliance erforderlich sind. Die Intervention besteht aus drei Phasen:

• Phase I – „Attacke“ während 4 Wochen: 800 kcal/Tag, 1,2 g/kg Idealgewicht an Protein, 10–15 g Lipide, 45–70 g Kohlenhydrate; tägliche Supplementation umfasst 2 bs/Tag UNICOMPLEX Multivitamine, 3–4 PronoKal Mahlzeiten, 2 Esslöffel Öl und stärkearmes Gemüse (z.B. Mangold, Brokkoli, Blumenkohl, Chicorée, Broccoli rabe, Zucchini, Feldsalat).
• Phase II – Übergang während 4 Wochen: Graduelle Wiedereinführung von Kohlenhydraten, erhöhte Kalorienzufuhr und reduzierte Nutzung von PronoKal-Produkten; 1 bs/Tag UNICOMPLEX wird beibehalten. Schrittweise Einführung:
  1. Woche 1 – Obst und Getreide beim Frühstück (+150 kcal)
  2. Woche 2 – Milchprodukte und Getreide beim Mittagessen (+150 kcal)
  3. Woche 3 – Hülsenfrüchte (+150 kcal)
  4. Woche 4 – Erhöhung der Kalorien aus zuvor eingeführten Lebensmitteln (+150 kcal)
• Phase III – Erhaltung während 4 Wochen: Hypokalorische mediterrane Ernährung im Stil von 1.400 kcal/Tag, Abschluss der 12-wöchigen Intervention.

Eine dritte Gruppe von 30 Teilnehmern folgt einer personalisierten mediterranen Ernährung, wie oben beschrieben, angereichert mit GABA-produzierenden Probiotika, z.B. Bifidobacterium adolescentis PRL2019 (20 CFU/Tag für 12 Wochen).

Stichprobengröße Für die Hauptstudie wurde die Stichprobengröße basierend auf dem FIQ-Test geschätzt. Erwartete Unterschiede zwischen Baseline und Behandlung waren 12 Punkte für die am besten abschneidende Intervention und 8 und 6 Punkte für die anderen beiden, mit einer angenommenen Standardabweichung innerhalb der Gruppe von 7, Signifikanz α = 0,05 und Power 1-β = 0,8. Dies ergab ein Gesamt-n = 81. Um 10 % Dropout zu berücksichtigen, werden 30 Patienten pro Arm, Gesamt-n = 90, rekrutiert.

Aufgrund begrenzter Scanner-Verfügbarkeit wird die MRI-Analyse eine Pilotstudie sein, üblich für Machbarkeitsbewertung ohne formale Power-Berechnungen. Drei Gruppen, eine pro Interventionsarm, von n = 6 Patienten jeweils, werden MR-Messungen bei T1 und T4 in der Neuroradiologie-Einheit, Policlinico San Martino, durchführen. Daten werden mit Einzelmess-MR-Scans von passenden Kontrollprobanden verglichen.

Die statistische Analyse wird mit IBM SPSS Statistics Version 25 und R Version 4.3.3 durchgeführt, abhängig von den statistischen Anforderungen. Die Annahme der Normalverteilung für jede Variable wird mit dem Shapiro-Wilk-Test bewertet. Kontinuierliche Variablen werden als Median und Interquartilsabstand oder Mittelwert ± Standardabweichung berichtet, abhängig davon, ob sie einer Normalverteilung folgen. Ordinale und nominale Variablen werden in Kontingenztabellen zusammengefasst, die Häufigkeiten und Prozentsätze innerhalb der Studienpopulation zeigen.

Vergleiche von kontinuierlichen und ordinalen Variablen zwischen Patientengruppen werden mit parametrischen oder nicht-parametrischen Tests der Mittelwertdifferenzen, abhängig von der Gruppengröße, oder Varianzanalyse (ANOVA) durchgeführt. Nominale Variablen werden in Kontingenztabellen mit Pearson's Chi-Quadrat (χ²)-Test oder Fisher's exaktem Test analysiert. Speziell für Fragebogen-Outcomes wird die Behandlungseffektivität bewertet, indem Prä-Post-Score-Differenzen zwischen Gruppen und ihre Standardabweichungen zur Berechnung der Effektgröße evaluiert werden. Statistische Signifikanz wird mit ANOVA-Modellen (parametrisch oder nicht-parametrisch, wie angemessen) bewertet.

Metaboliten, die signifikante Unterschiede zwischen Gruppen zeigen, werden mittels Einweg-ANOVA identifiziert, gefolgt von Tukey's HSD Post-hoc-Test basierend auf dem p-Wert-Schwellenwert. Änderungen in Metabolit-Spiegeln werden mit dem EnhancedVolcano-Paket Version 1.12.0 visualisiert. Unterschiede in Zytokin- und Chemokin-Spiegeln werden mit ANOVA und Student's t-Test bewertet. Ein p-Wert ≤ 0,05 wird als Hinweis auf einen statistisch signifikanten Unterschied zwischen Gruppen betrachtet.