Biomarcadores de enfermedades graves agudas en niños (BASIC)

Se trata de un estudio de cohorte prospectivo en el que se recogen datos clínicos y muestras biológicas. No se realizarán intervenciones a los pacientes.

Recolección de muestras Las muestras de sangre y orina se recolectarán en dos momentos. Si es posible, también se recolectarán frotis de heces y garganta.

Momento 1: Durante la estabilización por parte del equipo CATS (primer contacto con un equipo de cuidados intensivos) El equipo CATS recolectará muestras durante el muestreo de rutina, priorizadas en el siguiente orden: ADN (2 ml); ARN (2 ml); suero (2 ml); Plasma (2 ml) y Orina (10 ml).

Momento 2: Dentro de las 24-48 horas posteriores a la admisión en la UCIP El equipo de investigación de la UCIP participante recolectará muestras durante el muestreo de rutina, priorizadas en el siguiente orden: ADN (2 ml); ARN (2 ml); suero (2 ml); Plasma (2 ml) y Orina (10 ml). Además, se recolectarán muestras de heces y frotis de garganta en la UCIP.

En lactantes de menos de 10 kg de peso, restringiremos el volumen total de sangre recolectado en cada punto de tiempo a 0,8 ml/kg de peso corporal, de acuerdo con las Pautas de ensayos clínicos de MCRN, 25 de julio de 2008.

Además, se recolectarán muestras fecales al ingreso a la UCIP (día 1) y 24-48 horas después del ingreso a la UCIP. Si no se dispone de heces, se tomará una muestra anal para análisis microbiológico. SCFA se medirá en la primera muestra fecal disponible.

Transporte, procesamiento y almacenamiento de muestras Las muestras serán transportadas por el equipo CATS a las UCIP de ingreso en cajas frías (4 °C). El procesamiento y almacenamiento de la muestra se realizará en el hospital donde se admita al paciente. El procesamiento incluirá la anonimización de la muestra mediante la generación de un número de estudio único, que se utilizará para todas las referencias a las muestras a partir de entonces.

Recolección de datos clínicos Se elaborará un formulario estandarizado de reporte de casos y un manual de recolección de datos con definiciones y reglas. Los datos serán recogidos por el personal investigador de cada unidad. Los datos clínicos cubrirán las etapas clave del proceso del paciente: derivación y transporte a cuidados intensivos, curso de la UCIP y resultado. Realizaremos un fenotipado clínico detallado del paciente, incluido el motivo de la remisión/ingreso a la UCIP (infección, traumatismo, neurológico, cardíaco, respiratorio y otros), la gravedad de la enfermedad (puntuación PIM-2), la gravedad de la insuficiencia orgánica (PELOD) y el resultado. al alta de la UCIP (muerte, discapacidad severa). Reconociendo que el resultado a corto plazo en el alta de la UCIP puede no ser el resultado más significativo para los padres/cuidadores, o proporcionar una imagen precisa del resultado a largo plazo en los niños, también buscaremos el consentimiento de los padres/cuidadores para contactarnos 1 año después de la UCIP. admisión para completar cuestionarios cortos para evaluar el estado funcional y la calidad de vida del niño. Los cuestionarios se administrarán por teléfono, correo electrónico o medios basados ​​en la web, según la preferencia de los padres.

Siempre que sea posible, para evitar la duplicación de esfuerzos, los datos clínicos de la recuperación de CATS y la admisión en la UCIP se obtendrán mediante enlace electrónico de la auditoría clínica nacional de cuidados intensivos pediátricos (PICANet, Universidad de Leeds y Leicester). El enlace de datos se realizará utilizando el número de recuperación CATS, al final del período de estudio. La recopilación de estos datos seguirá un procedimiento estándar: cualquier transferencia de datos (solicitudes de datos y devolución del conjunto de datos completo) se realizará de forma segura (con cifrado completo).

Análisis de datos Inicialmente, cada tipo de información, es decir, genética, transcriptómica, proteómica, epigenética, clínica, se analizará por separado para identificar asociaciones y correlaciones en una primera etapa. Los patrones de comportamiento y asociación diferenciales se derivarán de varios análisis estadísticos y bioinformáticos, tanto univariantes como multivariantes, como se describe anteriormente. En una segunda etapa, la información se combinará entre tipos de datos en modelos predictivos. Se empleará un enfoque de biología de sistemas en el que se construirán redes de módulos genéticos, transcriptómicos, proteómicos y epigenéticos co-regulados en cohortes de casos y controles. Las conexiones de red que serán diferentes entre casos y controles se identificarán como "predictores" del resultado.

El modelado gráfico se utilizará para visualizar esas redes complejas. Se requerirá un análisis estadístico pesado para identificar las conexiones más influyentes que, una vez eliminadas, tendrían el mayor impacto en la topología de la red. Los modelos se refinarán, reevaluarán, validarán y replicarán en las diferentes cohortes de enfermedades hasta que se logre la mejor clasificación posible fuera de la muestra. La experiencia del grupo matemático y estadístico brindará la capacidad de vincular las múltiples capas de información biológica desde el ADN hasta el fenotipo en un enfoque de biología de sistemas en red.

Tamaño de la muestra No es posible realizar cálculos formales del tamaño de la muestra, pero reclutaremos un número mínimo de pacientes en cada grupo de interés. Nuestro objetivo es reclutar un número adecuado de pacientes con diferentes motivos de ingreso en cuidados intensivos en el estudio (50-80 pacientes por grupo de interés).

Duración del estudio El reclutamiento de pacientes se llevará a cabo durante un período de 24 meses, con un tiempo de anticipación de 6 meses para la capacitación del personal y un tiempo de anticipación de 6 meses para el seguimiento de los pacientes y la finalización de las bases de datos.

Reclutamiento de pacientes Los pacientes elegibles serán reclutados para el estudio durante el transporte por personal médico y de enfermería del equipo de transporte de cuidados intensivos de CATS.

Procedimiento de consentimiento Buscaremos el consentimiento informado por escrito diferido de los padres/tutores una vez que la condición de su hijo se estabilice, generalmente dentro de las 24 a 48 horas posteriores a la admisión en la UCIP. El proceso de consentimiento estará respaldado por folletos de información para el paciente. Hay varios precedentes de este enfoque en la investigación de urgencias, incluso en cuidados intensivos pediátricos. El último Reglamento de la UE sobre ensayos clínicos (2013) también proporciona apoyo para el consentimiento diferido en situaciones urgentes que amenazan la vida.

Las principales razones para solicitar el consentimiento diferido en este estudio son:

1. Clínico: El transporte de niños en cuidados intensivos de emergencia representa una situación urgente en la que el tratamiento que salva vidas no se puede retrasar y el transporte a una UCIP debe realizarse rápidamente. Además, los padres/tutores pueden no estar presentes en el momento de la estabilización para discutir el consentimiento.
2. Práctico: No es factible llevar a un miembro del personal adicional para el transporte únicamente para el consentimiento de la investigación debido al espacio limitado en la ambulancia. La naturaleza 24/7 del servicio CATS y el hecho de que se producen múltiples transportes al mismo tiempo también hace que sea poco práctico contar con personal de investigación dedicado.
3. Metodológico: las dificultades para obtener el consentimiento informado completo pueden dar lugar a la introducción de un sesgo de selección. Además, si las muestras del estudio no se toman en una etapa temprana de la enfermedad crítica, antes de que se inicien los tratamientos (como fluidos o inotrópicos), la obtención de biomarcadores sólidos de la enfermedad crítica puede fallar. Si bien las cuestiones metodológicas no pueden proporcionar un argumento para incluir datos cuando los sujetos de investigación niegan expresamente el consentimiento, sí constituye un caso éticamente válido para incluir muestras o datos recopilados antes de que se haya obtenido el consentimiento, y cuando no existe tal denegación explícita de consentimiento.
4. Ética: Debido a las dificultades para obtener el consentimiento informado en situaciones de emergencia, los pacientes más enfermos suelen ser sometidos a prácticas médicas anecdóticas. Puede ser poco ético negar a los niños enfermos los beneficios de nuevas investigaciones y estrategias terapéuticas basadas en la comprensión científica más sólida de la enfermedad crítica, que es lo que nuestro estudio pretende promover.

Si los padres/tutores no desean dar su consentimiento o no pueden dar su consentimiento, o si el personal no puede comunicarse con los padres/tutores, las muestras se desecharán y no se recopilarán datos clínicos.