FRAGMENTACIÓN DE TROPOnina en estudio de lesión miocárdica (Tropo-Fragm)

Las pruebas modernas de troponina T cardíaca (cTnT) son muy sensibles para diagnosticar IAM y daño miocárdico. La fibrilación auricular y muchas afecciones no cardíacas e incluso el ejercicio extenuante se asocian con niveles elevados de cTnT que son problemáticos para los médicos y pueden conducir al uso redundante de la angiografía coronaria de diagnóstico o al "sobrediagnóstico" de SCA en el estudio de la sala de emergencias.

El complejo de troponina cardíaca (cTn) es parte de los filamentos delgados del miocardio. Una pequeña parte (aproximadamente el 5% del contenido total) de las troponinas son citosólicas. Estos fragmentos citosólicos más pequeños pueden atravesar más fácilmente las membranas celulares que presentan fugas por algún motivo, pero que no se dañan de forma irreversible. Sólo las formas citoplásmicas de troponina están contenidas en las vesículas subcelulares que se lisan tras la liberación temprana de cTn en la circulación. La formación de ampollas puede explicar cómo la troponina puede aparecer en la sangre en ausencia de necrosis celular. Todavía se conocen de forma incompleta muchos aspectos de su degradación intramiocárdica, su liberación tisular y su degradación dentro y eliminación de la circulación humana.

En las primeras horas del IAM, la troponina se encuentra en su complejo de tamaño completo, pero la cTnT complejada se degrada siguiendo un patrón dependiente del tiempo después de las primeras horas. Los fragmentos de troponina de pequeño peso molecular que se originan en el citoplasma pueden atravesar membranas celulares con fugas que no están completamente dañadas en diversas condiciones sin necrosis irreversible de las células del miocardio.

La prueba comercial cTnT detecta todos estos fragmentos y, por lo tanto, puede conducir a un diagnóstico falso de IAM. En la actualidad, hay información limitada basada en estudios pequeños que utilizan cromatografía de filtración en gel complicada y transferencia de Western que muestran fragmentación de cTnT en fases posteriores de AMI y en insuficiencia renal. Sin embargo, estos métodos analíticos que consumen mucho tiempo no son adecuados para fines clínicos en la sala de emergencias.

MÉTODOS ANALÍTICOS En este estudio, probamos un nuevo ensayo inmunofluorométrico sensible de resolución temporal, desarrollado en la unidad de biotecnología del Departamento de Bioquímica de la Universidad de Turku, que nos permite medir la cTnT de muestras de sangre en su forma intacta o solo ligeramente fragmentada. . Por lo tanto, podemos excluir del análisis las formas cortas altamente fragmentadas de cTnT. Esta selectividad se puede lograr con anticuerpos trazadores y de captura específicos que se unen a epítopos cuidadosamente seleccionados ubicados más cerca de los extremos opuestos de la molécula de cTnT. En el ensayo, uno de los anticuerpos se adhiere a una superficie y actúa como un anticuerpo que captura el antígeno. El par captura-antígeno puede detectarse con un anticuerpo trazador, formando así un complejo captura-antígeno-trazador. En nuestro caso, este anticuerpo trazador se ha marcado con quelatos de europio que proporcionan una detección sensible mediante fluorometría de resolución temporal.

El objetivo del estudio Tropo-Fragment es utilizar el formato de ensayo preliminar descrito en los estudios clínicos para evaluar:

• Fragmentación de TnT y su curso temporal en STEMI y NSTEMI
• Fragmentación de TnT en insuficiencia renal, sepsis, ejercicio extenuante, accidente cerebrovascular, fibrilación auricular, takotsubo, miocarditis y sujetos sanos