Tupakointiriippuvuuden ja terveiden aikuisten unen laadun välinen vuorovaikutus

Tieteellinen tausta Tupakanpoltto on merkittävä terveysongelma, joka johtaa huomattavaan sairastumiseen ja kuolleisuuteen syövän, keuhkosairauksien ja sydän- ja verisuonisairauksien vuoksi (Taghizadeh, Vonk & Boezen, 2016). Pääasiallinen psykoaktiivinen ja riippuvuutta aiheuttava aine tupakassa on nikotiini (Zaparoli & Galduroz, 2012). Nikotiiniriippuvuus on monimutkainen ilmiö, johon liittyy sekä fyysistä että psyykkistä riippuvuutta (Cohrs et al., 2014), joka ei aiheuta pelkästään lopettamisvaikeuksia, vaan myös voimakasta taipumusta palata tupakoinnin pariin pitkän lopettamisen jälkeen) Zaniewska, Przegalinski & Fillip, 2009).

Yleinen riippuvuuden teoreettinen malli (Koob & Volkow, 2016) katsoo, että siirtyminen satunnaisesta tupakoinnista riippuvuuteen sisältää neurobiologisten stressijärjestelmien säätelyn. Näin ollen jopa lyhyt tupakoinnin pidättäytyminen, joka johtaa nikotiinin pitoisuuden vähenemiseen kehossa, aiheuttaa sekä emotionaalisia vieroitusoireita (ahdistuneisuus, levottomuus, ärtyneisyys, anhedonia) että kognitiivisia vieroitusoireita (heikentynyt muisti ja huomio), jotka voivat puolestaan ​​aiheuttaa pakko-oireinen halu tupakoida uudelleen epämiellyttävien tunteiden lievittämiseksi (Koob & Volkow, 2016). Vaikka joidenkin tutkimusten mukaan unen laadun heikkeneminen liittyy myös tupakoinnin ja tupakoinnin lopettamisen seurauksiin (Cohrs et al., 2014; Colrain, Trinder & Swan, 2004), tätä ongelmaa ei ole täysin tutkittu, ja heikentyneen unen laadun vaikutusta. negatiivisiin tunnetilanteisiin ja tupakoinnin motivaatioon on epäselvä.

Tupakointi ja nukkuminen. Tupakoitsijat raportoivat useammin unihäiriöistä, kuten unettomuudesta (eli useista valituksista, jotka heijastavat tyytymättömyyttä kykyyn aloittaa ja ylläpitää unta, sekä kokonaisuniajan merkittävää lyhenemistä, jota seuraa päiväaikainen uneliaisuus) (Kaneita et al., 2005; Phillips & Danner, 1995), ja tupakka-riippuvuuden tason ja heikentyneen unen laadun välillä havaittiin korrelaatio (Palmer, Harrison & Hiorns, 1980; Patten et al., 2000). Tupakoinnin haitallinen vaikutus unen laatuun saattaa osittain johtua keuhkojen häiriöistä (Simon-Tuval et al., 2011). Raskailla tupakoitsijoilla onkin suuri riski sairastua krooniseen obstruktiiviseen keuhkosairauteen (COPD) (Tarasiuk et al., 2006), joka aiheuttaa unihäiriöitä ja heikentää elämänlaatua (Scharf et al., 2011; Won & Kryger, 2014). Lisäksi jopa nuorilla, näennäisesti terveillä, kohtalaisilla tupakoijilla keuhkojen toiminta heikkenee selvästi, ja terveillä aikuisilla havaittiin negatiivinen korrelaatio keuhkojen toiminnan ja unen laadun välillä (Phillips et al., 1989). Tämä tekijä ei kuitenkaan pystynyt yksin selittämään tupakoinnin ja unen laadun välistä suhdetta, sillä tutkimukset ovat osoittaneet lisääntynyttä heräämistä yön aikana tupakoinnin lopettamisen varhaisissa vaiheissa (Hatsukami, Hughes & Pickens, 1985; Hatsukami et al. ., 1988).

Subjektiivisten unimittausten luotettavuus ei ole yksiselitteinen ja tarvitsee tukea objektiivisista mittauksista (Pillar, Malhotra & Lavie, 2000). Tähän mennessä vain kourallinen tutkimuksia on verrannut aktiivisten ja lopettavien tupakoitsijoiden uniarkkitehtuuria tupakoimattomien uni-arkkitehtuuriin käyttämällä polysomnografisia (PSG) testejä (jotka koostuvat aivoaalto-, lihasjännitys-, silmäliikkeistä ja muista mittauksista). Nämä tutkimukset vahvistivat tupakoinnin ja tupakoinnin lopettamisen haitalliset vaikutukset unen laatuun. Zhang ja kollegat (2006) havaitsivat, että tupakoimattomiin verrattuna tupakoitsijoiden unelle oli ominaista lyhyempi kesto, pidempi saavuttamisaika (nopeat silmien liikkeet) REM-uni, pidempi aika kevyessä unessa (vaihe 1), vähemmän syvässä unessa vietettyä aikaa. uni (vaiheet 3 ja 4, hidasaaltouni-SWS) ja alhaisempi unen tehokkuus (prosenttiosuus todellisesta uniajasta sängyssä vietettyyn aikaan). Samoin tupakoitsijoiden unen kesto oli lyhyempi kuin tupakoimattomien (Jaehne et al., 2012). Samoin tupakoinnin lopettaville henkilöille tehdyt PSG-testit osoittivat, että yöllä heräämiset lisääntyivät (Prosise et al., 1994), REM-latenssi lyheni, SWS-unen kesto lyheni ja kevyen unen vaiheet pidentyivät (vaiheet 1). ja 2) (Moreno-Coutiño, Calderón-Ezquerro & Drucker-Colín, 2007; Wetter et al., 2000), kaikki viitteitä unen laadun heikkenemisestä. Näillä PSG-tutkimuksilla oli kuitenkin myös rajoituksia, koska ne suoritettiin tavallisesti pienelle määrälle potilaita yhtenä yönä, unilaboratorioiden keinotekoisissa olosuhteissa.

Unen laatu, stressi ja tupakointiriippuvuus. On yleisesti hyväksyttyä, että unella on elintärkeä rooli terveyden sekä käyttäytymisen ja emotionaalisen vakauden kannalta (Scharf et al., 2010; Tarasiuk et al., 2005). Ne, jotka kärsivät huonosta unenlaadusta, kokevat enemmän psyykkistä stressiä, masennusta ja erilaisia ​​ahdistuneisuusoireita kuin koko väestö (Fernández-Mendoza et al., 2009; Ohayon, 2005). Tupakoijien ja tupakoinnin lopettaneiden taipumus huonoon unenlaatuun sekä oikeanlaisen unen sekä käyttäytymis- ja emotionaalisen vakauden välinen korrelaatio herättävät hypoteesin, että tupakoitsijoiden ja tupakoinnin lopettaneiden unen laadun heikkeneminen vaikuttaa heidän psyykkiseen toimintaansa ja tupakoinnin käyttäytymiseensa. Muutamat tätä asiaa tutkineet tutkimukset osoittivat, että tupakoimatta jättäminen 48 tunnin ajan lisäsi myöhempää tupakointinopeutta (Hamidovic& de Wit, 2009) ja että unihäiriöt vieroituksen aikana vaikuttavat kielteisesti tupakoinnin lopettamisen onnistumiseen (Jaehne et al. ., 2009; Persico, 1992). Nämä havainnot näyttävät integroituvan hyvin edellä mainittuun teoreettiseen malliin, jonka mukaan nikotiinille altistuminen johtaa vastenmielisten psykologisten oireiden kehittymiseen, kun kehon nikotiinipitoisuus laskee, mikä johtaa pakonomaan tupakointihimoon näiden epämiellyttävien tunteiden lievittämiseksi (Cohen & George , 2013).

Useat havainnot viittaavat siihen, että nämä vastenmieliset psykologiset oireet johtuvat stressivasteita säätelevien neurobiologisten järjestelmien toiminnan lisääntymisestä (Cohen & George, 2013). Stressivasteita säätelevät kaksi keskeistä neuroendokrinologista järjestelmää: sympaattinen hermosto ja HPA (hypotalamus-aivolisäke-lisämunuaiskuoren) akseli. Sympaattinen järjestelmä on vastuussa kiihottumisen tason lisäämisestä vaaratilanteissa ja akuutissa stressissä. Siihen liittyy pääasiassa lisämunuaisen adrenaliinin eritystä. Tutkimukset osoittavat, että a-amylaasientsyymin taso syljessä on epäsuora mutta luotettava sympaattisen aktiivisuuden mitta (Rohleder et ai., 1994). On osoitettu, että α-amylaasitasot ennen tupakoinnin lopettamista ja sen jälkeen ennustivat onnistumisen mittaa tupakoinnin pidättäytymisessä ajan myötä (Duskova et al., 2010). HPA-järjestelmä säätelee jatkuvista stressitekijöistä selviytymiseen liittyviä fysiologisia reaktioita. Erityisesti se indusoi kortikotropiinia vapauttavan hormonin (CRH) erittymistä hypotalamuksessa sijaitsevasta paraventrikulaarisesta ytimestä aivolisäkkeen etuosaan, joka vastauksena erittää adrenokortikotrooppista hormonia (ACTH), joka stimuloi kortisolin vapautumista (lisämunuaisen rauhanen) Ma et ai., 2011). Kortisolitasot kehossa nousevat yleensä voimakkaasti stressitekijöiden seurauksena, mutta kroonisissa stressitilanteissa HPA-järjestelmän säätely voi häiriintyä, mikä ilmenee kortisolin erittymisen vähenemisenä sekä perustilanteessa että vasteena stressiin. (Miller, Chen & Zhou, 2007). Tämä alasääntely voi heijastaa stressin selviytymisvaikeuksia (Miller, Chen & Zhou, 2007): alhainen kortisolitaso liittyy lisääntyneeseen masennukseen (Moraes et al., 2016), aggressiivisuuteen (Granger, 1998) ja impulsiivisuus (Blomqvist et al., 2007). Huomaa, että vaikka akuutti altistuminen nikotiinille lisää kortisolitasoja tilapäisesti (Newhouse et al., 1990; Winternitz & Quillen, 1977), kroonisten tupakoitsijoiden kortisolin eritys stressin seurauksena vähenee verrattuna tupakoimattomiin (Kirschbaum, Strasburger & Langkrär). , 1993; Rohleder & Kirschbaum, 2006). Lisäksi tutkimukset osoittavat kortisolitasojen laskua tupakoinnin lopettamisen aikana (Steptoe & Ussher, 2006; Targovnik, 1989), mikä korreloi somaattisten ja emotionaalisten vieroitusoireiden voimakkuuden ja tupakointihalun tason kanssa (Cohen, al' Absi & Collins, 2004; Targovnik, 1989); se korreloi myös tupakoinnin lopettamisen onnistumisen tasoon ajan myötä (al'Absi et al., 2004; Frederick et al., 1998). Tämä voi johtua HPA-järjestelmän alisäätelyn kehittymisestä, samoin kuin kroonisesta stressistä kärsivien tilanne (Richardson et al., 2008), mikä puolestaan ​​johtaa stressimekanismien herkistymiseen aivoissa. , kuten CRH:n aktiivisuuden lisääminen limbisessä järjestelmässä (Vendruscolo et al., 2012). Kirjallisuus tukee osittain sitä mahdollisuutta, että neurobiologisten stressimekanismien toiminnan lisääntyminen (johtuen kroonisesta nikotiinille altistumisesta) vaikuttaa unen laadun heikkenemiseen. Esimerkiksi lisääntynyt sympaattinen aktiivisuus päivän aikana, mikä heijastuu korkeina α-amylaasitasoina, korreloi voimakkaasti unettomuuden kanssa (Nater et al., 2007). Erilaiset tutkimukset, joissa on tarkasteltu kortisolin erittymisen eri mittareiden välistä suhdetta päivän ja yön aikana, ja erilaisten uniindeksien välillä, tuottivat kuitenkin ristiriitaisia ​​tuloksia (Elder et al., 2014). Viimeaikaiset tutkimukset osoittavat, että kortisolia tuotetaan nopeammin REM-unen aikana; siksi pitkittynyt uni, johon sisältyy pidempi REM-uni, tuottaa korkeampia kortisolitasoja (Van Lenten & Doane, 2016). Huomaa, että vaikka stressin lisääntyminen voi häiritä unta, huono unen laatu voi itsessään aiheuttaa stressiä (Fernández-Mendoza et al., 2009; Ohayon, 2005).

Yhteenvetona useat tutkimukset viittaavat siihen, että tupakointi ja varsinkin tupakoinnin lopettaminen häiritsevät unta ja että unen laadun heikkeneminen voi edistää motivaatiota tupakoida ja heikentää mahdollisuuksia lopettaa. Näitä tutkimuksia on kuitenkin suhteellisen vähän, ja monet niistä perustuvat subjektiivisiin raportteihin, joiden luotettavuus ei ole yksiselitteinen. Vähemmistö tutkimuksista, joissa käytettiin objektiivisia mittauksia, testasi yleensä pienen määrän osallistujia unilaboratorion keinotekoisissa olosuhteissa. Erityisesti unen laatua voidaan mitata objektiivisesti ja luotettavasti pitkiä aikoja osallistujien luonnollisessa ympäristössä käyttämällä ranteessa pidettävää liikettä analysoivaa aktigrafilaitetta (Ancoli-Israel et al., 2015; Sadeh et al. , 1989). Aktigrafiaa ei kuitenkaan ole toistaiseksi käytetty tupakoitsijoiden unen laadun arvioinnissa. Lisäksi tähän mennessä ei ole tehty systemaattista tutkimusta unen, keuhkojen toiminnan, stressijärjestelmien toiminnan ja tupakoinnin välisistä monimutkaisista suhteista, koska ne liittyvät tupakointiriippuvuuden kehittymiseen ja jatkumiseen.

Oletamme, että krooninen tupakanpoltto heikentää unen laatua, mikä puolestaan ​​tehostaa stressimekanismien toimintaa ja aiheuttaa siten negatiivisia tunnetiloja. Prosessit, jotka vahingoittavat unen laatua sekä prosessit, jotka lisäävät herkkyyttä stressiin ja negatiivisiin tunneoireisiin, ravitsevat toisiaan ja lisäävät viime kädessä tupakoinnin tarvetta keinona lievittää stressiä. Alustavat löydökseemme tukevat tätä hypoteesia osoittamalla, että aktiiviset tupakoitsijat kärsivät heikentyneestä unen laadusta (arvioituna aktigrafialla ja kyselylomakkeilla) verrattuna tupakoimattomiin. Tämä vaikutus korreloi stressin aktivoitumisen markkereihin, nimittäin kortisolin ja α-amylaasin tasoihin. osallistujien sylki.

Tutkimuksen tavoitteet ja odotettu merkitys

Tutkimuksemme selvittää unihäiriöiden roolia tupakoinnin riippuvuudessa. Alustavien havaintojen ja saatavilla olevan kirjallisuuden perusteella tämän ehdotuksen päähypoteesi on, että tupakointi ja suuremmassa määrin tupakoinnin lopettamisen varhaiset vaiheet liittyvät unen laadun heikkenemiseen. Unen laadun heikkeneminen puolestaan ​​ennustaa negatiivisten oireiden vakavuuden ja tupakoinnin lopettamisen vaikeuden. Onnistunut tupakoinnin lopettaminen johtaa unen normalisoitumiseen. Kokeilut tämän hypoteesin tutkimiseksi koskevat seuraavia erityisiä tavoitteita:

1. Tutkia fysiologisia ja psykologisia tekijöitä, jotka ennustavat tupakoitsijoiden unen laadun heikkenemistä. Tavoitteena on selvittää tupakoinnin haitallisia vaikutuksia unen laatuun ja selvittää, ennustavatko unen laadun heikkenemistä seuraavat tekijät: keuhkojen huono toiminta (FEV1, FEF), nikotiiniriippuvuuden aste, tunneoireet (ahdistus ja masennus), ja stressijärjestelmien (HPA-akselin ja sympaattisen hermoston) muuttunut säätely. Odotamme, että tupakoimattomien unen laatu on huonompi kuin tupakoimattomille. Unen laadun häiriintymisen taso liittyy nikotiiniriippuvuuden voimakkuuteen, keuhkojen huonoon toimintaan, negatiivisen emotionaalisuuden tasoon, sympaattiseen aktivaatioon ja HPA-akselin deregulaatioon.
2. Tutkia tupakoinnin lopettamisen vaikutusta unen laatuun ja siihen liittyviin oireisiin. Tutkimme, kokevatko tupakoinnin lopettamista yrittävät tupakoinnin huononevan unen laadun ja voiko tämä huono unen laatu ennustaa heidän stressivasteensa suuruuden (kortisolin ja α-amylaasin taso) ja emotionaalisten ja kognitiivisten oireiden vakavuutta mitattuna. psykometriset testit.
3. Tutkia unen laadun merkitystä tupakoinnin motivaatiossa ja tupakoinnin palaamisessa. Kokeilla selvitetään, voiko uni ennustaa tupakoinnin halun (nykyisillä tupakoitsijoilla) ja pidättäytyneiden tupakoitsijoiden uusiutumisen todennäköisyyden.
4. Selvittää, parantaako pitkäaikainen nikotiinin pidättäminen unen laatua. Tarkoituksena on tutkia, normalisoiko tupakoinnin lopettaminen lopulta unen ja siihen liittyvien tekijöiden, kuten keuhkojen toiminnan, stressivasteen (kortisolin ja α-amylaasin taso) sekä emotionaalisen ja kognitiivisen toiminnan, normalisoitumista. Tupakoinnin lopettaminen varmistetaan mittaamalla kotiniini osallistujan syljestä.

Odotettu merkitys. Kokeet osoittavat, kuinka krooninen tupakointi voi heikentää unen laatua ja häiritä tupakoinnin lopettamisyrityksiä. Tämä tutkimus valaisee toisiinsa liittyviä fysiologisia ja psykologisia mekanismeja, jotka välittävät tupakointiriippuvuuden ja unen välistä vuorovaikutusta, mukaan lukien psyykkinen ahdistus, toimintahäiriöiset stressimekanismit ja heikentynyt keuhkojen toiminta.

Ehdotetussa tutkimuksessa hyödynnetään erilaisia ​​tehokkaita menetelmiä ja poikkitieteellistä yhteistyötä uni-, riippuvuus- ja hengityslääketieteen asiantuntijoiden kanssa selvittääkseen unen ja tupakoinnin vuorovaikutusta. Tämän tutkimuksen tulokset antavat uudenlaisen käsityksen unen roolista nikotiiniriippuvuudessa. Ehdotetun tutkimuksen tulosten odotetaan edistävän unen laatua parantavien tekniikoiden käyttöä tupakoinnin lopettamistoimenpiteissä. Metodologia Osallistujat. Tutkimukseen osallistuu 150 tervettä vapaaehtoista, 18-30-vuotiaita miehiä ja naisia, joilla ei ole aiempaa mielenterveysongelmia tai huumeiden väärinkäyttöä. Osallistujamäärä määritettiin tehoanalyysillä alustavien tuloksiemme perusteella, lisättynä 20 % mahdollisten tutkimuksen aikana tapahtuvien keskeytysten kompensoimiseksi. Viisikymmentä osallistujaa on tupakoimattomia ja loput säännöllisesti tupakoivia. Puolet tupakoitsijoista on ilmoittanut olevansa kiinnostunut lopettamaan ja puolet ei ole kiinnostunut (ei lopettaa). Osallistujat saavat 400 NIS (noin 100 US dollarin) korvausmaksun. Kaikki tässä tutkimuksessa käytetyt menettelyt ovat Yezreel Valley Collegen (YVC) Institutional Review Boardin hyväksymiä.

Tutkimusmenettely. Osallistujat rekrytoidaan korkeakoulun opiskelijakunnasta ja ilmoituksen kautta ympäröivistä yhteisöistä. Kaikki opintojaksot alkavat klo 7.00-9.00 (enintään 30 minuuttia heräämisen jälkeen) joko YVC:n psykobiologian laboratoriossa tai osallistujan kotona.

Tutkimus sisältää 3 ryhmää (N=50): tupakoitsijat, jotka yrittävät lopettaa (smoking scessation group, SCG), tupakoimattomien ryhmä (NSG) ja ryhmä tupakoitsijoita, jotka eivät yritä lopettaa (SNCG). Jälkimmäistä ryhmää tarvitaan sen varmistamiseksi, että muutokset tiettyihin toimenpiteisiin tupakoinnin lopettamisen jälkeen eivät johdu aikaan liittyvistä tapahtumista, jotka eivät liity tupakanpolton lopettamiseen. Tutkimuksen suunnittelu sisältää 4 vaihetta: A) Perustaso. B) Ensimmäinen viikko nikotiinin lopettamisesta. C + D) Seurantatestit kolme kuukautta ja kuusi kuukautta tupakoinnin lopettamisen aloittamisen jälkeen. Huomaa, että vaikka kaksi kontrolliryhmää (eli tupakoimattomien ryhmä (NSG) ja tupakoitsijoiden ryhmä, jotka eivät yritä lopettaa (SNCG)) eivät lopeta tupakointia, ne arvioidaan samoilla testeillä ja samoilla aikapisteillä kuin tupakoinnin lopettamisen ryhmä.

Perusvaihe: Ensimmäisessä istunnossa kaikkia osallistujia pyydetään allekirjoittamaan suostumuslomake ja antamaan taustatietoja. Kun tupakointi on arvioitu tarkistamalla hengityksensä hiilimonoksidin (CO) pitoisuus, häntä pyydetään antamaan sylkinäyte (kortisolin ja α-amylaasin pitoisuuksien testaamiseksi) sylkemällä koeputkeen (vähintään 1,5 ml). ). Osallistujien tupakoinnin vahvistamiseksi edelleen sylkinäytteitä käytetään myös kotiniinin, nikotiinin ensisijaisen metaboliitin, tasojen havaitsemiseen. Osallistujia pyydetään täyttämään laaja kirjo kyselyitä, joissa arvioidaan heidän ahdistuneisuuttaan, masennustaan, unen laatuaan ja tupakointiriippuvuuttaan (kyselylomakkeet kuvataan yksityiskohtaisesti alla) sekä tietokonepohjaisen kognitiivisen arvioinnin pariston (CAB) täyttämiseen. neurokognitiivinen testi, joka on suunniteltu arvioimaan monenlaisia ​​toimeenpanotoimintoihin liittyviä kognitiivisia taitoja. Lisäksi heidän keuhkojen toimintakykynsä arvioidaan spirometrialla. Lopuksi osallistujien unta seurataan jatkuvasti viikon ajan miniatyyrillä ranteessa käytettävällä aktigrafilla, ja PSG tallentaa sen tämän viikon kahden viimeisen yön aikana.

Tupakoinnin lopettamisen vaihe: Perusviikon lopussa tupakoinnin lopettamisen tutkimusryhmän osallistujat alkavat pidättäytyä tupakoinnista, kun taas kahden kontrolliryhmän (eli tupakoimattomien ryhmä (NSG) ja tupakoimattomien ryhmä, jotka eivät yritä lopettaa) osallistujat alkavat pidättäytyä tupakoinnista. (SNCG) jatkavat normaalia rutiiniaan. Tupakoinnin lopettamisen ensimmäisen päivän aamuna kaikki osallistujat antavat sylkinäytteet ja täyttävät samat kyselylomakkeet kuin perusvaiheessa. Tämän jälkeen kaikkia osallistujia pyydetään käyttämään aktigrafialaitetta myös toisen viikon ajan ja palaamaan laboratorioon lisäistuntoihin 48 tunnin, 72 tunnin, 5 päivän ja viikon kuluttua (yhteensä neljä kertaa). Jokaisella näistä istunnoista osallistujien tupakointitila arvioidaan uloshengitystestin avulla, ja osallistujia pyydetään jälleen toimittamaan sylkinäyte ja täyttämään samat kyselylomakkeet. Tämän viikon kahtena viimeisenä yönä PSG tallentaa myös osallistujien unet. Raittiuspäivän 7 aamuna kaikki osallistujat suorittavat (uudelleen) CAB-neurokognitiivisen testin. Seurantavaihe: Suoritetaan kaikille osallistujille kolme kuukautta ja kuusi kuukautta tupakoinnin lopettamisprosessin jälkeen. Jokaisena näistä ajankohdista kaikki osallistujat kutsutaan ylimääräiseen tiedonkeruuistuntoon, jossa selvitetään, kuka tupakoinnin pidättäytymiseen osallistuneista palasi tupakointiin. Lisäksi kaikkia osallistujia pyydetään jälleen täyttämään kyselylomake ja CAB-neurokognitiivinen testi. Osallistujien keuhkojen toiminta mitataan jälleen spirometrialla ja heitä pyydetään käyttämään aktigrafilaitetta viikon ajan. Lisäksi PSG tallentaa heidän unensa kahtena peräkkäisenä yönä. Tutkimuksen aikana kerätyt sylkinäytteet tuhotaan ELISA-analyysin jälkeen. Kaikille osallistujille varmistetaan luottamuksellisuus ja nimettömyys, ja kaikki tutkimukseen osallistuvat henkilöt säilyttävät tutkimuksen luottamuksellisuuden. Kaikki kerätty materiaali säilytetään lukittuna sille varattuun kaappiin.