Azitromicin kezelés az APC gén stop kodon mutációinak visszaolvasására családi adenomás polipózisban (FAP)

A vastagbélrák (CRC) a rákkal összefüggő halálozás vezető oka a nyugati világban, életre szóló kockázata 6%. Az etiológia összetett, míg a genetikai háttér jelentősen befolyásolja a kockázatot. Az összes genetikai rendellenesség körülbelül egyharmada, valamint a családi adenomatosus polipózis (FAP) legtöbb esete, valamint az összes szórványos CRC eset nagy része korai nonszensz mutációk (stopkodon létrehozása) eredményeként fordul elő az egyén adenomatosus polyposis coli-jában (APC) ) gén. A nonszensz mutációk a DNS egypontos elváltozásai, amelyek idő előtt leállítják a fehérje transzlációs folyamatát, és rövidített, nem működő fehérjét termelnek. Sok esetben, ha a sejtet „meg lehet győzni”, hogy figyelmen kívül hagyja az idő előtti stop kodon jelét, a kapott fehérje képes lehet enyhíteni vagy megállítani a betegséget.

A közelmúltban azt találták, hogy az antibiotikumok aminoglikozid családjának tagjai nonszensz mutációk riboszómális átolvasását idézik elő, ami teljes hosszúságú, funkcionális fehérje expressziójához vezet. A kutatók a közelmúltban kimutatták, hogy az aminoglikozid és makrolid antibiotikum család tagjai az APC gén nonszensz mutációinak átolvasását idézhetik elő, és csökkentik az onkogén fenotípusokat CRC sejtekben és különböző egérmodellekben.

A projekt célja annak meghatározása, hogy a makrolid antibiotikum-Azithromycin képes-e az APC gén nonszensz mutációinak átolvasását indukálni, és teljes hosszúságú, funkcionális APC fehérje expresszióját indukálja FAP-ban szenvedő betegekben, valamint annak tesztelését. Az adenoma számára és méretére, valamint a desmoid tumorokra gyakorolt ​​hatás ezeknél a betegeknél. A jövőbeni cél az, hogy maximalizálják a stopkodon-szuppresszorok hatását az APC-re, miközben minimalizálják a mellékhatásokat.

Ebben a vizsgálatban a kutatók olyan FAP-betegeket választanak ki, akik APC nonszensz mutációkat hordoznak, 4-6 hónapig Azithromycin PO-val kezelik őket, és megvizsgálják a vastag- és nyombél adenomákat, valamint a hasi desmoid tumorokat, amelyeket a kezelés előtt és után dokumentálnak. Ezzel párhuzamosan a kutatók polip-, adenoma- és desmoid szövetmintákat, valamint ezektől a betegektől vett vérmintákat tesztelik az APC fehérje és a kapcsolódó onkogén markerek expressziós szintjében bekövetkező változásokra.

Az APC génen belüli nonszensz mutációk elnyomása előnyös lehet FAP-ban, legyengített FAP-ban vagy többszörös adenomában szenvedő betegek, valamint előrehaladott vagy diffúz CRC-ben szenvedő betegek számára. Ezen túlmenően, tekintettel a humán génekben előforduló, többnyire nem gyógyítható betegségekhez vezető nonszensz mutációk azonosításában elért gyors előrehaladásra, olyan klinikailag jóváhagyott vegyületek azonosítása, amelyek elnyomják a nonszensz mutációkat, és amelyek jelentős mellékhatások nélkül hosszú távon beadhatók. új helyszínek nyílnak a fontos kódoló szekvenciák korai stopkodonjaiból eredő genetikai humán betegségek kezelésében.

Azonnali cél: az Azithromycin képességének megállapítása az APC nonszensz mutációk átolvasására FAP betegekben. Az Azithromycin átolvasási hatását klinikailag tesztelik a vastagbél- és nyombéladenómák számának és méretének megszámlálásával és mérésével a kezelés előtt és után, valamint az ismert desmoid tumorok méretének mérésével. Az adenomák és desmoid tumorok mintáit Western blot-tal, immunfluoreszcenciával és immunhisztokémiával teszteljük az APC expresszió helyreállítása és az onkogén markerek változása érdekében. Ezeket a kísérleteket 6 hónapon belül kell elvégezni.

Hosszú távú cél:

1. Határozza meg az Azithromycin legalacsonyabb dózisát, amely gátolja a vastagbél neoplázia és a CRC növekedését olyan betegeknél, akik nonszensz mutációk miatt csonka APC fehérjét expresszálnak.
2. Vizsgálja meg, hogy egy további makrolid antibiotikum panel képes-e APC nonszensz mutáció-szuppressziót indukálni in vitro módszerekkel. A kutatók a jelenleg klinikai használatban lévő és hosszú ideig alkalmazott makrolid antibiotikumokra összpontosítanak. Ezek a célok körülbelül 4 hónapot vesznek igénybe, és párhuzamosan kerülnek végrehajtásra.