Pretrattamento di lesioni cutanee pigmentate altamente sospette con interleuchina-2 (IL-2)

Questo studio è progettato principalmente per determinare se l'immunità specifica del tumore può essere generata in pazienti con lesioni pigmentate altamente sospette in risposta all'IL-2 intralesionale e se tale immunità può conferire resistenza alle metastasi del melanoma. I pazienti saranno identificati da dermatologi qualificati e le interviste si terranno presso la clinica chirurgica (4 ° piano Dickson Center) QEII HSC, NSHA.

Il tempo di attesa standard dalla consultazione alla biopsia chirurgica è fino a 4 settimane. Gli investigatori assicureranno che i pazienti vengano visitati immediatamente dopo la notifica da parte del dermatologo partecipante e che tutte le componenti di ricerca dello studio siano completate entro il tempo di attesa normalmente previsto. Attraverso l'utilizzo di questo tempo di attesa standard, l'IL-2 intralesionale può potenzialmente influenzare una risposta immunitaria, che altrimenti non potrebbe essere raggiunta dopo il completamento della biopsia. Dato che lo studio è condotto entro il normale tempo di attesa, non si discosta dal normale standard di cura. Seguendo il protocollo dello studio, i pazienti riceveranno iniezioni intralesionali il giorno 1 (visita della settimana 1) e il giorno 8 (visita della settimana 2) e le biopsie escissionali verranno eseguite il giorno 15 (visita della settimana 3), ben entro il tempo di attesa accettato dalla consultazione alla biopsia. Le iniezioni intralesionali e la raccolta di campioni biologici oltre la biopsia deviano ma non ritardano il normale standard di cura. Sono necessarie due visite aggiuntive oltre alla consultazione iniziale.

Questo studio è uno studio randomizzato, controllato, in doppio cieco. I pazienti con lesioni pigmentate altamente sospette saranno assegnati in modo casuale da un algoritmo a uno dei due gruppi: 1) i pazienti del gruppo di trattamento saranno trattati intralesionalmente con IL-2 (Proleukin (Aldesleukin), Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.) alla dose di 500.000 Unità (UI) in 0,1 ml di soluzione fisiologica sterilizzata (0,9%, m/v) per 2 cicli di trattamento a distanza di 1 settimana (Giorno 1 e Giorno 7); 2) i pazienti del gruppo di controllo saranno trattati intralesionalmente con soluzione fisiologica sterilizzata (0,9%, m/v) dello stesso volume (0,1 ml). La randomizzazione sarà generata da un algoritmo Random Block per ciascun paziente e la preparazione delle istruzioni per ciascun paziente verrà inviata alla farmacia. IL-2 (Proleukin) sarà ottenuto da Novartis dalla farmacia, pagata dal conto dei servizi di ricerca del Dr. Carman Giacomantonio. La farmacia riceverà istruzioni per preparare il trattamento con IL-2 o il controllo iniettabile (soluzione fisiologica). La farmacia assegnerà un ID codificato che verrà fornito insieme alla siringa con il nome del paziente etichettato come "Interleukin-2/Placebo" (quindi studio cieco per medico e paziente). In quanto studio pilota, il principio del progetto è testare la fattibilità di procedere a uno studio più ampio e più costoso seguendo la metodologia e il protocollo proposti. Pertanto, ci saranno un minimo di 20 (10 trattamenti, 10 placebo) partecipanti (fino a un massimo di 60). Si stima che la significatività statistica sarà raggiunta con 20 pazienti, tuttavia se non viene raggiunta dopo 20 pazienti, verranno arruolati altri 10 pazienti (5 di trattamento, 5 di controllo). Se la significatività non viene ancora raggiunta dopo 30 pazienti, verranno arruolati altri 10 pazienti e così via fino a un massimo di 60 pazienti. Se dopo 60 pazienti la significatività non viene raggiunta, un ulteriore reclutamento nell'ambito del protocollo attuale non sarebbe logico e pertanto la metodologia dovrebbe essere rivista o lo studio interrotto.

Il giorno 1 (primo trattamento) e 15 (biopsia escissionale), a tutti i pazienti verranno prelevati campioni di sangue (4 fiale) e di urina (25-50 ml). Le reazioni locali alle iniezioni saranno monitorate per segni non specifici come sanguinamento, aritema, infezione o irritazione. Gli investigatori non prevedono cambiamenti specifici nella lesione pigmentata correlata all'iniezione in questo breve periodo di tempo, tuttavia verranno annotati tutti i cambiamenti.

Il giorno 15, dopo la seconda iniezione intralesionale, verrà eseguita una biopsia escissionale seguendo le tecniche chirurgiche standard, come segue: verrà eseguita un'ellisse di pelle che comprende la lesione pigmentata che si estende nel grasso sottocutaneo per ottenere un margine di escissione grossolanamente chiaro ma stretto. Questo piccolo difetto verrà chiuso principalmente con suture interrotte. Il campione sottoposto a biopsia verrà successivamente valutato utilizzando tecniche istologiche standard per confermare le diagnosi, valutare lo stato dei margini (chiaro o coinvolto) e la profondità dell'invasione della lesione. La profondità dell'invasione della lesione determinerà l'estensione delle successive escissioni chirurgiche e la selezione dei margini secondo le linee guida standard del National Comprehensive Cancer Network (NCCN). Le iniezioni intralesionali pre-biopsia di 0,1 ml nella lesione non altereranno le dimensioni o l'architettura della lesione né influiranno sull'estensione richiesta dalla successiva biopsia. Le lesioni che si ritiene siano troppo grandi per la chiusura senza manipolazione del tessuto o creazione di lembi, saranno biopsiate utilizzando una tecnica di campionamento mediante punch biopsy per cui verranno prelevati dischi di tessuto di 4 mm di diametro da aree rappresentative della lesione per confermare la diagnosi e la profondità di invasione. La profondità dell'invasione detterà l'estensione e la complessità del successivo intervento chirurgico necessario per rimuovere la lesione e ottenere margini chiari secondo le linee guida NCCN. Il campione sottoposto a biopsia verrà processato come segue: utilizzando un ago da 22G verrà eseguita una biopsia di aspirazione con ago sottile (l'ago verrà fatto passare due volte attraverso il centro della lesione) per l'analisi dell'RNA. Il resto del tessuto verrà inviato alla patologia per la valutazione istologica standard. Il patologo riporterà anche l'estensione dei linfociti infiltranti il ​​tumore (TIL) osservati associati al trattamento rispetto alle iniezioni di controllo. Il sangue e le urine saranno valutati utilizzando metodi metabalomici e proteomici per valutare la risposta immunitaria sistemica al trattamento.

Tutti i campioni di sangue, urina e biopsia della lesione saranno etichettati con un numero codificato (non conterranno alcuna informazione di identificazione del paziente) e saranno immediatamente trasportati al laboratorio del Dr. Carman Giacomantonio presso la Dalhousie University per la conservazione. L'aspirazione con ago sottile dei campioni asportati sarà valutata per il profilo genetico ed epigenetico del tumore. Il sangue e le urine saranno valutati rispettivamente per i profili proteomici e metabolomici.

Tutti i partecipanti allo studio riceveranno valutazioni ogni 4 mesi per 2 anni e valutazioni semestrali per anni da 3 a 5 dopo l'intervento iniziale per valutare la progressione della malattia o lo sviluppo di un nuovo melanoma, per confrontare sia il trattamento che i gruppi di controllo. Non esiste un test standardizzato o un biomarcatore misurabile per valutare l'immunità stabilita o duratura. Questo aspetto dello studio è identico alla valutazione del paziente condotta secondo lo standard di cura per i pazienti con melanoma. Anche in questo caso, qualsiasi pubblicazione dei risultati dello studio sarà completata priva di qualsiasi informazione che possa essere utilizzata per identificare i pazienti inclusi nello studio.