Wstępne leczenie wysoce podejrzanych pigmentowanych zmian skórnych za pomocą interleukiny-2 (IL-2)

Badanie to ma na celu przede wszystkim ustalenie, czy u pacjentów z wysoce podejrzanymi zmianami pigmentacyjnymi można wytworzyć odporność specyficzną dla nowotworu w odpowiedzi na wewnątrzzmianową IL-2 i czy ta odporność może nadawać oporność na przerzuty czerniaka. Pacjenci zostaną zidentyfikowani przez wykwalifikowanych dermatologów, a wywiady odbędą się w klinice chirurgicznej (4. piętro Dickson Center) QEII HSC, NSHA.

Standardowy czas oczekiwania od konsultacji do biopsji chirurgicznej wynosi do 4 tygodni. Badacze dopilnują, aby pacjenci zostali przyjęci natychmiast po powiadomieniu od uczestniczącego dermatologa, a wszystkie elementy badawcze badania zostały zakończone w normalnie przewidywanym czasie oczekiwania. Dzięki wykorzystaniu tego standardowego czasu oczekiwania, IL-2 podawana w obrębie zmian chorobowych może potencjalnie wpływać na odpowiedź immunologiczną, której inaczej nie można by osiągnąć po zakończeniu biopsji. Biorąc pod uwagę, że badanie jest przeprowadzane w normalnym czasie oczekiwania, nie odbiega od normalnego standardu opieki. Zgodnie z protokołem badania pacjenci otrzymają zastrzyki do zmian chorobowych w dniu 1 (wizyta w tygodniu 1) i dniu 8 (wizyta w tygodniu 2), a biopsje wycinające zostaną wykonane w dniu 15 (wizyta w tygodniu 3), dobrze w akceptowanym czasie oczekiwania od konsultacji do biopsji. Iniekcje do zmian chorobowych i pobieranie próbek biologicznych poza biopsją odbiegają od normalnego standardu opieki, ale nie opóźniają go. Oprócz wstępnej konsultacji wymagane są dwie dodatkowe wizyty.

To badanie jest randomizowanym, kontrolowanym badaniem z podwójnie ślepą próbą. Pacjenci z wysoce podejrzanymi zmianami barwnikowymi zostaną losowo przydzieleni przez algorytm do jednej z dwóch grup: 1) pacjenci z grupy terapeutycznej będą leczeni doogniskowo IL-2 (Proleukin (Aldesleukin), Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.) w dawce 500 000 międzynarodowych Jednostki (j.m.) w 0,1 ml sterylizowanej soli fizjologicznej (0,9%, m/v) na 2 cykle leczenia w odstępie 1 tygodnia (Dzień 1 i Dzień 7); 2) pacjenci z grupy kontrolnej będą leczeni doogniskowo sterylizowaną solą fizjologiczną (0,9%, m/v) o tej samej objętości (0,1 ml). Randomizacja zostanie wygenerowana przez algorytm Random Block dla każdego pacjenta, a przygotowanie instrukcji dla każdego pacjenta zostanie wysłane do apteki. IL-2 (Proleukin) będzie pozyskiwany od Novartis przez aptekę, opłacany z konta usług badawczych dr Carmana Giacomantonio. Apteka otrzyma instrukcje przygotowania leczenia IL-2 lub kontroli do wstrzykiwań (sól fizjologiczna). Apteka przypisze skodyfikowany identyfikator, który zostanie dostarczony wraz ze strzykawką z nazwiskiem pacjenta oznaczoną jako „Interleukina-2/Placebo” (w ten sposób zaślepiając badanie klinicysty i pacjenta). Jako badanie pilotażowe, zasadą projektu jest przetestowanie wykonalności przejścia do większego i droższego badania zgodnie z zaproponowaną metodologią i protokołem. W związku z tym będzie minimum 20 uczestników (10 terapii, 10 placebo) (maksymalnie 60). Szacuje się, że istotność statystyczna zostanie osiągnięta u 20 pacjentów, jednak jeśli nie zostanie ona osiągnięta po 20 pacjentach, włączonych zostanie dodatkowych 10 (5 leczonych, 5 kontrolnych). Jeśli istotność nadal nie zostanie osiągnięta po 30 pacjentach, włączonych zostanie dodatkowych 10 pacjentów i tak dalej, aż do maksymalnie 60 pacjentów. Jeżeli po 60 pacjentach istotność nie zostanie osiągnięta, dalsza rekrutacja zgodnie z obecnym protokołem nie byłaby logiczna i dlatego konieczna byłaby zmiana metodologii lub przerwanie badania.

W 1. dniu (pierwsze leczenie) i 15. dniu (biopsja wycinająca) wszystkim pacjentom zostaną pobrane próbki krwi (4 fiolki) i moczu (25-50 ml). Miejscowe reakcje na wstrzyknięcia będą monitorowane pod kątem niespecyficznych objawów, takich jak krwawienie, rumień, zakażenie lub podrażnienie. Badacze nie przewidują konkretnych zmian w zmianie barwnikowej związanych z wstrzyknięciem w tym krótkim czasie, jednak wszystkie zmiany zostaną odnotowane.

W dniu 15, po drugim wstrzyknięciu do zmiany chorobowej, zostanie wykonana biopsja wycinająca zgodnie ze standardowymi technikami chirurgicznymi: elipsa skóry obejmująca zmianę barwnikową sięgającą do podskórnej tkanki tłuszczowej zostanie wykonana w celu uzyskania wyraźnie wyraźnego, ale wąskiego marginesu wycięcia. Ta niewielka wada zostanie zamknięta przede wszystkim za pomocą szwów przerywanych. Próbka pobrana z biopsji zostanie następnie oceniona przy użyciu standardowych technik histologicznych w celu potwierdzenia rozpoznania, oceny stanu marginesu (czysty lub zajęty) oraz głębokości inwazji zmiany. Głębokość inwazji zmiany będzie decydowała o zakresie kolejnych wycięć chirurgicznych i wyborze marginesu zgodnie ze standardowymi wytycznymi National Comprehensive Cancer Network (NCCN). Przedbiopsyjne wstrzyknięcia do zmiany chorobowej w ilości 0,1 ml nie zmienią wymiarów ani architektury zmiany ani nie wpłyną na zakres wymaganej późniejszej biopsji. Zmiany, które wydają się być zbyt duże, aby można je było zamknąć bez manipulacji tkankami lub tworzenia płatów, zostaną poddane biopsji przy użyciu techniki biopsji punktowej, w ramach której pobrane zostaną krążki tkanki o średnicy 4 mm z reprezentatywnych obszarów zmiany w celu potwierdzenia diagnozy i głębokości inwazja. Głębokość inwazji będzie dyktować zakres i złożoność późniejszej operacji wymaganej do usunięcia zmiany i uzyskania wyraźnych marginesów zgodnie z wytycznymi NCCN. Pobrana próbka zostanie przetworzona w następujący sposób: za pomocą igły 22G zostanie przeprowadzona biopsja aspiracyjna cienkoigłowa (igła zostanie dwukrotnie przeprowadzona przez środek zmiany) w celu analizy RNA. Pozostała część tkanki zostanie wysłana do patologii w celu standardowej oceny histologicznej. Patolog zgłosi również zakres zaobserwowanych limfocytów naciekających guz (TIL) związanych z leczeniem w porównaniu z wstrzyknięciami kontrolnymi. Krew i mocz zostaną ocenione przy użyciu metod metabalomicznych i proteomicznych w celu oceny ogólnoustrojowej odpowiedzi immunologicznej na leczenie.

Wszystkie próbki krwi, moczu i biopsji zmian chorobowych zostaną oznaczone zakodowanym numerem (nie będą zawierać żadnych informacji identyfikujących pacjenta) i zostaną natychmiast przetransportowane do laboratorium Dr. Carman Giacomantonio na Uniwersytecie Dalhousie w celu przechowywania. Aspiracja cienkoigłowa wyciętych próbek zostanie oceniona pod kątem profilu genetycznego i epigenetycznego guza. Krew i mocz zostaną ocenione odpowiednio pod kątem profili proteomicznych i metabolomicznych.

Wszyscy uczestnicy badania będą poddawani ocenie co 4 miesiące przez 2 lata oraz ocenie co dwa lata przez lata od 3 do 5 po pierwszej interwencji w celu oceny postępu choroby lub rozwoju nowego czerniaka w celu porównania grup leczonych i kontrolnych. Nie ma wystandaryzowanego testu ani mierzalnego biomarkera do oceny ustalonej lub trwałej odporności. Ten aspekt badania jest identyczny z oceną pacjenta przeprowadzoną zgodnie ze standardem opieki nad chorymi na czerniaka. Ponownie, wszelkie publikacje wyników badań zostaną zakończone bez jakichkolwiek informacji, które mogłyby posłużyć do identyfikacji pacjentów objętych badaniem.