Forbehandling af meget mistænkelige pigmenterede hudlæsioner med interleukin-2 (IL-2)

Denne undersøgelse er primært designet til at bestemme, om tumorspecifik immunitet kan genereres hos patienter med meget mistænkelige pigmenterede læsioner som reaktion på intralæsionel IL-2, og om denne immunitet kan give resistens over for melanommetastase. Patienterne vil blive identificeret af kvalificerede hudlæger, og interviews vil blive afholdt på operationsklinikken (4. sal Dickson Center) QEII HSC, NSHA.

Standard ventetid fra konsultation til kirurgisk biopsi er op til 4 uger. Efterforskere vil sikre, at patienter ses umiddelbart efter meddelelse fra deltagende hudlæge, og at alle forskningskomponenter i undersøgelsen er afsluttet inden for den normalt forventede ventetid. Gennem udnyttelse af denne standardventetid kan intralæsionel IL-2 potentielt påvirke et immunrespons, som ellers ikke kunne opnås, efter at biopsien er afsluttet. Da undersøgelsen udføres inden for den normale ventetid, afviger den ikke fra den normale plejestandard. Efter undersøgelsesprotokollen vil patienter modtage intralæsionale injektioner på dag 1 (Uge 1 Besøg) og Dag 8 (Uge 2 Besøg), og excisionsbiopsier vil blive udført på Dag 15 (Uge 3 Besøg), godt inden for den accepterede ventetid fra konsultation til biopsi. De intralæsionale injektioner og indsamling af bioprøver ud over biopsien afviger fra, men forsinker ikke den normale standard for pleje. Der kræves to yderligere besøg ud over den indledende konsultation.

Denne undersøgelse er en randomiseret, kontrolleret, dobbeltblind undersøgelse. Patienter med meget mistænkelige pigmenterede læsioner vil blive tilfældigt ved hjælp af en algoritme tildelt en af ​​to grupper: 1) behandlingsgruppepatienter vil blive behandlet intralæsionalt med IL-2 (Proleukin (Aldesleukin), Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.) i en dosis på 500.000 International Enheder (IE) i 0,1 ml steriliseret saltvand (0,9 %, m/v) i 2 behandlingscyklusser med 1 uges mellemrum (dag 1 og dag 7); 2) kontrolgruppepatienter vil blive behandlet intralæsionalt med steriliseret saltvand (0,9 %, m/v) af samme volumen (0,1 ml). Randomisering vil blive genereret af en Random Block-algoritme for hver patient, og instruktionsforberedelse for hver patient vil blive sendt til apoteket. IL-2 (Proleukin) vil blive anskaffet fra Novartis af apoteket, betalt af Dr. Carman Giacomantonios forskningsservicekonto. Apoteket vil få instruktion i at forberede enten IL-2-behandling eller injicerbar kontrol (saltvand). Apoteket vil tildele et kodificeret ID, som vil blive leveret sammen med sprøjten med patientnavnet mærket som "Interleukin-2/Placebo" (derved blænder undersøgelsen for klinikeren og patienten). Som et pilotstudie er princippet i designet at teste muligheden for at gå videre til et større og dyrere forsøg efter den foreslåede metode og protokol. Som sådan vil der være minimum 20 (10 behandlinger, 10 placebo) deltagere (op til et maksimum på 60). Det anslås, at statistisk signifikans vil blive nået med 20 patienter, men hvis den ikke nås efter 20 patienter, vil yderligere 10 (5 behandlinger, 5 kontrol) patienter blive indskrevet. Hvis signifikansen stadig ikke opnås efter 30 patienter, vil yderligere 10 patienter blive indskrevet og så videre op til maksimalt 60 patienter. Hvis der efter 60 patienter ikke opnås betydning, vil yderligere rekruttering under den nuværende protokol ikke være logisk, og derfor skal metoden revideres eller undersøgelsen afbrydes.

På dag 1 (første behandling) og 15 (excisionsbiopsi) vil alle patienter få taget blodprøver (4 hætteglas) og urin (25-50 ml). Lokale reaktioner på injektioner vil blive overvåget for ikke-specifikke tegn såsom blødning, arythem, infektion eller irritation. Efterforskere forventer ikke specifikke ændringer i den pigmenterede læsion relateret til injektionen i denne korte tidsperiode, men alle ændringer vil blive noteret.

På dag 15, efter den anden intralæsionale injektion, vil der blive udført en excisionsbiopsi efter standard kirurgiske teknikker som følger: hudellipse, der omfatter den pigmenterede læsion, der strækker sig ind i det subkutane fedt, vil blive udført for at opnå en helt klar, men snæver udskæringsmargin. Denne lille defekt vil primært blive lukket med afbrudte suturer. Den biopsierede prøve vil efterfølgende blive evalueret ved hjælp af standard histologiske teknikker for at bekræfte diagnoser, vurdere marginstatus (klar eller involveret) og dybden af ​​læsionsinvasion. Dybden af ​​læsionsinvasionen vil diktere omfanget af efterfølgende kirurgiske udskæringer og marginudvælgelse i henhold til standard retningslinjer for National Comprehensive Cancer Network (NCCN). Pre-biopsi intralæsionale injektioner på 0,1 ml i læsionen vil ikke ændre dimensioner eller arkitektur af læsionen eller påvirke det omfang, den efterfølgende biopsi kræves. Læsioner, der menes at være for store til at kunne lukkes uden vævsmanipulation eller skabelse af flapper, vil blive biopsieret ved hjælp af en punch biopsi prøvetagningsteknik, hvorved 4 mm diameter vævsskiver fra repræsentative områder af læsionen vil blive taget for at bekræfte diagnosen og dybden af invasion. Dybden af ​​invasionen vil diktere omfanget og kompleksiteten af ​​den efterfølgende operation, der kræves for at fjerne læsionen og opnå klare marginer i henhold til NCCN-retningslinjerne. Den biopsierede prøve vil blive behandlet som følger: med en 22G nål udføres en finnålsaspirationsbiopsi (nålen føres gennem midten af ​​læsionen to gange) til RNA-analyse. Resten af ​​vævet vil blive sendt til patologi til standard histologisk vurdering. Patologen vil også rapportere omfanget af observerede tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL'er) forbundet med behandling sammenlignet med kontrolinjektioner. Blod og urin vil blive vurderet ved hjælp af metabalomiske og proteomiske metoder for at vurdere systemisk immunrespons på behandling.

Alle blod-, urin- og læsionsbiopsiprøver vil blive mærket med et kodificeret nummer (vil ikke indeholde nogen patientidentificerende information) og vil straks blive transporteret til Dr. Carman Giacomantonio-laboratoriet på Dalhousie University til opbevaring. Finnålsaspiration af udskårne prøver vil blive vurderet for tumorgenetisk og epigeneitisk profil. Blod og urin vil blive vurderet for henholdsvis proteomisk og metabolomisk profil.

Alle undersøgelsesdeltagere vil modtage vurderinger hver 4. måned i 2 år og halvårlige vurderinger i år 3 til 5 efter den indledende intervention for at vurdere sygdomsprogression eller udvikling af nyt melanom, for at sammenligne mellem både behandlings- og kontrolgrupper. Der er ingen standardiseret test eller målbar biomarkør til at vurdere etableret eller vedvarende immunitet. Dette aspekt af undersøgelsen er identisk med patientvurderingen udført i henhold til standarden for behandling af melanompatienter. Igen vil enhver publikation af undersøgelsesresultater blive afsluttet uden enhver information, der kunne bruges til at identificere patienter inkluderet i undersøgelsen.