Morbido tessuto perimplantare attorno a diversi materiali per monconi

Gli impianti dentali sono ancorati nell'osso mascellare attraverso un legame diretto tra l'osso e l'impianto. Il successo e la sopravvivenza di un impianto, tuttavia, non dipendono esclusivamente dall'osteointegrazione. Un tessuto molle, che circonda la parte transmucosa di un impianto dentale, separa l'osso perimplantare dalla cavità orale. Questo collare di tessuto molle è chiamato "mucosa perimplantare". L'attaccamento dei tessuti molli alla superficie dell'impianto funge da sigillo biologico che previene lo sviluppo di malattie infiammatorie perimplantari (ad es. mucosite perimplantare e perimplantite) Pertanto, il sigillo dei tessuti molli attorno agli impianti garantisce condizioni sane e un'osteointegrazione stabile e quindi anche la sopravvivenza a lungo termine di un impianto. Mentre il sigillo dei tessuti molli attorno ai denti si sviluppa durante l'eruzione del dente, la mucosa perimplantare si forma dopo la ferita chirurgica creata per inserire l'impianto. La fase di cicatrizzazione della ferita può avvenire a seguito della chiusura di un lembo mucoperiosteo attorno alla porzione di collo di un impianto inserito in una procedura cosiddetta one stage o dopo un secondo intervento chirurgico per le connessioni del moncone ad un impianto dentale già installato (procedura in due fasi ).

Sembra che l'adesione dei tessuti molli sia influenzata dalle proprietà (materiale del moncone e micro-topografia) dei componenti dell'impianto che vengono posti a contatto con i tessuti molli. È stato riscontrato che il materiale dell'abutment influenza il sanguinamento al sondaggio (BoP) anche nei tessuti molli perimplantari.

Poiché la guarigione della ferita avviene in presenza di un biomateriale (cioè un corpo estraneo) in una regione critica, devono essere prese in considerazione le interferenze positive o negative degli eventi di guarigione della ferita con questo biomateriale e l'adattamento del tessuto molle a questo biomateriale. La biocompatibilità, l'adesione dei tessuti molli, la ritenzione della placca, il comportamento meccanico e l'estetica sono elencati tra i criteri di selezione del materiale per abutment. Il titanio rimane il materiale più affidabile data la sua resistenza meccanica, la biocompatibilità, la modifica della superficie che aumenta l'adesione cellulare e la ritenzione della placca. Tuttavia, nel caso di maggiori esigenze estetiche, in particolare per il biotipo sottile, i monconi in alluminio in zirconia e ceramica danno risultati migliori con risultati tecnici e biologici paragonabili ai monconi in titanio.

Il polietereterchetone (PEEK) è un materiale termoplastico resistente prodotto dalla resina di polietereterchetone. Grazie alla sua elevata resistenza meccanica e durata, alle buone caratteristiche elettriche e all'eccezionale resistenza all'idrolisi, il PEEK è stato ampiamente utilizzato nell'industria aerospaziale, automobilistica, chimica, elettronica, petrolifera e alimentare. Recentemente è stato sviluppato un PEEK di livello medico. Il PEEK di grado medico ha le stesse proprietà fisiche del PEEK; tuttavia, PEEK-OPTIMA™ è anche biocompatibile, ha un'elevata resistenza chimica e resiste a diversi metodi di sterilizzazione. È interessante notare che il PEEK ha un modulo elastico simile a quello dell'osso che previene la perdita ossea marginale in caso di sovraccarico occlusale. A causa delle suddette proprietà, il PEEK è stato utilizzato come materiale per abutment.

Anche la morfologia del moncone merita considerazioni. Una certa recessione fisiologica dei tessuti molli può essere osservata nel tempo intorno ai restauri implantari quando viene scelto un profilo di emergenza divergente (il più comune) accanto al tessuto molle. Recentemente è stato mostrato come una certa migrazione coronale gengivale possa essere osservata con l'uso di abutment con profilo di emergenza conico. Infatti, utilizzando questi abutment conici o un design implantare con forma conica a livello del collo dell'impianto (livello transmucoso), è possibile ottenere nel tempo non solo la migrazione dei tessuti molli ma anche quella dei tessuti duri.

La guarigione della mucosa perimplantare è caratterizzata da una rapida formazione di strutture vascolari e reclutamento di cellule infiammatorie seguite dalla maturazione di un tessuto che alla fine stabilisce una solida barriera di tessuto connettivo sopracrestale e lungo epitelio giunzionale, che previene efficacemente la crescita di un biofilm batterico . Si nota che l'angiogenesi come parte critica della guarigione della ferita raggiunge il picco a 2 settimane con un declino in 10 settimane, mentre il reclutamento di cellule infiammatorie (cellule B e cellule T) si verifica in gruppi e diminuisce da 4 a 8 settimane di guarigione nel tessuto connettivo .

Tuttavia, poco è disponibile sulla risposta molto precoce che potrebbe determinare l'organizzazione istologica dei tessuti molli perimplantari in generale e in contatto con diversi materiali macroscopici e microscopici modificati. I tessuti molli perimplantari fanno parte della gengiva e della mucosa orale e il posizionamento dell'impianto avviene attraverso la creazione di una ferita. I miofibroblasti rappresentano attori chiave nella ricostruzione fisiologica del tessuto connettivo dopo la lesione e nel generare le deformazioni patologiche del tessuto che caratterizzano la fibrosi. Costituiscono una fonte cellulare critica di collagene di tipo I, che è essenziale durante la guarigione delle ferite. L'eccessiva contrazione e sovrapproduzione di matrice extracellulare, principalmente collagene, da parte dei miofibroblasti può causare fibrosi tissutale con formazione di cicatrice ipertrofica caratterizzata da ridotta resistenza alla trazione e fibre di collagene disorientate. Nelle ferite cutanee a tutto spessore, la differenziazione dei miofibroblasti inizia circa una settimana dopo la lesione e i picchi di contrazione a 5-15 giorni dopo la lesione, ma nella cavità orale questo passaggio si verifica prima che nella pelle, dato il tempo di guarigione più breve di questi tessuti.

Pertanto, lo scopo del presente studio era valutare la componente miofibroblastica dei tessuti della mucosa perimplantare in diversi materiali per abutment di guarigione (titanio gr4, titanio gr 5, zirconio e PEEK) 24 ore dopo il posizionamento.

MATERIALI E METODI Aspetto etico Il presente protocollo sarà valutato dal Comitato Etico della Sapienza Università di Roma dopo l'approvazione del Dipartimento. Ad ogni paziente verrà fornito un consenso informato scritto.

Disegno dello studio Studio biomolecolare di biopsie prelevate dai tessuti molli perimplantari 24 ore dopo l'impianto e posizionamento del moncone di guarigione di quattro diversi materiali (titanio gr4, titanio gr 5, zirconio e PEEK).

Operatori, cecità e assegnazione Gli impianti e gli abutment saranno posizionati da un unico operatore, non coinvolto in altre funzioni durante lo studio. Un secondo operatore, non coinvolto nel posizionamento dell'impianto o del moncone, eseguirà la biopsia. L'operatore di laboratorio sarà all'oscuro dell'assegnazione delle biopsie. Il tipo di abutment associato a ciascun impianto sarà determinato in una busta chiusa che verrà aperta solo al momento dell'inserimento dell'impianto. I pazienti saranno informati sul tipo di impianti e monconi utilizzati ma non sulla posizione esatta di ciascuno di essi.

Caratteristiche del campione Un totale di 10 pazienti reclutati per il trattamento implantare presso la Clinica Odontoiatrica dell'Università La Sapienza di Roma parteciperanno allo studio in seguito al soddisfacimento dei criteri di inclusione ed esclusione.

Criterio di inclusione:

(I) Età ≥ 18 anni (II) Assenza di malattie/disturbi sistemici (III) Fumo ≤ 5 sigarette al giorno (IV) Parodontalmente sano o trattato (V) Punteggio della placca a bocca piena (FMPS) ≤ 15% al ​​basale (VI ) Punteggio di emorragia a bocca piena (FMBS) ≤ 15% al ​​basale (VII) Presenza di spazio edentulo che necessita di un trattamento all on four o all on six con overdenture (VIII) Larghezza della gengiva cheratinizzata ≥ 2 a livello della cresta

Criteri di esclusione: (esclusione del rischio/fattori confondenti):

(I) Gravidanza/allattamento (II) Uso di antibiotici sistemici negli ultimi 3 mesi (III) Uso di antibiotici sistemici come profilassi per l'endocardite (IV) Un paziente trattato cronicamente (cioè 2 settimane o più) con farmaci noti per influenzare i tessuti parodontali (per esempio. fenitoina, calcioantagonisti, ciclosporina, warfarin e farmaci antinfiammatori non steroidei) l'ultimo mese prima dell'inizio dello studio (V) Radioterapia nella regione collo-testa (VI) HIV, TB, epatite o altre malattie infettive (VII) Abuso con droghe o alcol (VIII) Sigarette fumate> 5 sigarette al giorno (IX) Parodontite non trattata (X) FMPS> 15% al ​​basale (XI) FMBS> 15% al ​​basale (XII) Impianti con anamnesi perimplantare (XIII) Larghezza di tessuto cheratinizzato sulla cresta <2 mm (XIV) Necessità di ricostruzione ossea intorno agli impianti da inserire

Trattamento clinico

Il protocollo seguirà Tomasi et al 2014 con la modifica di un campione di riferimento prelevato durante l'incisione per la preparazione del lembo. In breve, dopo l'anestesia locale, il sollevamento del lembo e l'inserimento dell'impianto (Svezia e Martina SpA, Padova, Italia), un moncone appositamente progettato di quattro diversi materiali (tigran gr4, tigran gr 5, zirconio e PEEK) sarà collegato a ciascun impianto dopo un allocazione in doppio cieco e verranno suturati i lembi. I pazienti sciacquaranno con clorexidina per 1 settimana fino alla rimozione della sutura. Dopo 24 ore dal posizionamento dell'impianto, verrà utilizzato un dispositivo di taglio personalizzato per recuperare una biopsia circonferenziale del tessuto molle perimplantare. Un perno guida sarà collegato al moncone e un punzone circolare con un tagliente verrà forzato apicalmente attorno al moncone sezionando un collare di tessuto molle perimplantare spesso 1,5 mm e rimuovendolo insieme al moncone e al dispositivo di taglio. L'intero sistema sarà posto in formalina al 4% e trasferito in una soluzione di etanolo al 70% dopo 48 h.

Analisi cito-istologica

Colorazione immunofluorescente cellulare e microscopia confocale. Una volta raccolte con un punch attorno al collo dell'impianto, le cellule vengono ottenute utilizzando il metodo dell'espianto. I campioni di 2 mm vengono prima tritati e poi posti in un pallone di coltura e incubati in terreno completo in 5% CO2 a 37°C. In alternativa, i campioni vengono posti in DMEM ad alto contenuto di glucosio integrato con FBS al 15% e antibiotici e conservati a 4 C per 24 ore. Le cellule vengono quindi fissate in PFA al 4% in PBS per 30 minuti a temperatura ambiente. Per etichettare le molecole di interesse, le cellule vengono permeabilizzate in PBS/10% siero di capra/0,3% Triton X-100 (1h, 20°C), seguito da anticorpi primari (contro le proteine ​​associate al citoscheletro/citoscheletro e le proteine ​​della matrice) in PBS/0,1% BSA/0,3% Triton X-100 (4°C, 20°C), lavato e incubato con anticorpo secondario, DAPI e/o falloidina (4°C, 20°C). La microscopia in fluorescenza confocale (Leica SP8) e in epifluorescenza (sistema DeltaVision) viene eseguita utilizzando obiettivi 20x/0,50 NA e 40x/0,80 NA (Olympus FV1000).

Microscopia tissutale per biopsia. I campioni di tessuto ottenuti dopo la rimozione chirurgica vengono fissati in formalina e sezionati con un vibratomo (Leica, VT100s) per ottenere fette spesse 200 μm. Per una penetrazione anticorpale ottimizzata, viene eseguita un'incubazione sequenziale di 24 ore (4°C) per ciascuna fase di incubazione e lavaggio dell'anticorpo primario e secondario (PBS/2% siero di capra/0,1% Triton X-100/0,05% NaN3). Le immagini vengono acquisite utilizzando la microscopia a due fotoni con un obiettivo 20x /NA 0,95 (Olympus XLUMPlanFI 206) ed eccitazione a 910/1090/1180 nm.

analisi statistica

Verranno prelevati un totale di 80 campioni all'inserimento dell'impianto e 24 ore dopo, ciascuno analizzato tre volte. I risultati saranno espressi come valori medi e SD e test ANOVA e Mann-Whitney da un software appropriato (STATA versione 13.1; StataCorp LP; College Station, TX) utilizzato per trovare la differenza tra i quattro materiali dell'abutment