Approvvigionamento di campioni di tessuto per colture cellulari e analisi

Contesto: è ora evidente che praticamente ogni tessuto postnatale umano contiene un qualche tipo di popolazione di cellule staminali/progenitrici che è responsabile del ricambio e della riparazione dei tessuti. Nostri studi precedenti hanno identificato un sottogruppo di cellule stromali del midollo osseo umano (BMSC) che è multipotente e in grado di rigenerare ossa, cartilagine, stroma mielosupportivo e adipociti, mentre le cellule stromali derivate solo dalla milza umana (SpSC) e dal timo (TSC) forma uno stroma mielosupportivo. Studi recenti suggeriscono che le cellule stromali derivate da adiposo umano (ASC) possono essere simili alle BMSC, mentre le cellule stromali derivate dal derma umano (DSC) non hanno nessuna di queste proprietà (e servono come controllo negativo per la maggior parte degli esperimenti in vitro e in vivo) . Quanto simili o dissimili siano queste diverse popolazioni di cellule stromali deve ancora essere determinato. Il profilo molecolare è necessario per confrontare queste diverse popolazioni e per chiarire i fattori che controllano la differenziazione delle cellule stromali in un tipo di cellula o in un altro.

Obiettivi: I rifiuti chirurgici (osso con midollo rosso, derma, milza, timo e tessuti adiposi) di maschi e femmine di età diverse sottoposti a procedure chirurgiche clinicamente indicate saranno utilizzati per stabilire colture di cellule stromali per studiare il profilo molecolare e la capacità di differenziazione dello stroma popolazioni cellulari di diversi tessuti e per caratterizzare ulteriormente la regolazione dell'espressione genica e della sintesi proteica in queste cellule staminali/progenitrici.

Eleggibilità: Qualsiasi paziente sottoposto a intervento chirurgico clinicamente indicato che comporti la rimozione di osso con midollo rosso, derma, milza, timo e tessuto adiposo e che non abbia: 1) una storia di malattia ossea metabolica, 2) qualsiasi forma di cancro o sono stati trattati con chemioterapia o irradiazione per il cancro e 3) non hanno ricevuto agenti noti per influenzare il metabolismo osseo.

Design: i normali rifiuti chirurgici (ossa con midollo rosso, derma, milza, timo e adiposo) provenienti da procedure eseguite su maschi e femmine presso il Suburban Hospital saranno collocati in mezzo nutritivo (fornito da NIDCR) e inviati al NIDCR per l'istituzione di ceppi di colture cellulari. Verranno registrati solo l'età, il sesso e il sito da cui è stato prelevato il tessuto. Le colture cellulari dei diversi tessuti saranno utilizzate per determinare il loro carattere fenotipico e le proprietà di differenziazione mediante profili molecolari e per studi volti a chiarire la regolazione dell'espressione genica e della sintesi proteica. Allo stesso modo, una parte dei campioni ottenuti presso il Suburban Hospital verrà utilizzata per generare sezioni istologiche dei tessuti normali che verranno utilizzate per lo screening di anticorpi e sonde molecolari di nuova concezione. In alcuni casi, l'RNA verrà estratto dai tessuti per l'analisi RT-PCR. Questi campioni (cellule, sezioni, mRNA) serviranno anche come normali controlli per gli studi eseguiti su campioni ottenuti da pazienti con varie malattie reclutati presso NIH secondo gli attuali protocolli NIH (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184).