Diagnosi genetica preimpianto (PGD) mediante ibridazione comparativa del genoma (CGH) e biopsia della blastocisti

Motivazione dello studio:

L'obiettivo di questo studio è determinare se la strategia impiegata per il gruppo Test può risolvere due problemi principali nell'ART, uno il tasso di impianto ancora basso nelle donne in età materna avanzata, e due il frequente verificarsi di gravidanze multiple derivanti dalla risoluzione del primo problema sostituendo troppi embrioni.

La diagnosi genetica preimpianto (PGD) è stata proposta come mezzo potenziale per raggiungere questi obiettivi, ma finora i risultati con la biopsia del terzo giorno e l'analisi FISH di 5-12 cromosomi hanno prodotto risultati contraddittori, la differenza tra gli studi spiegata da differenze tecniche (Munne et al. 2010). Recentemente si sono verificati tre sviluppi tecnici che possono cambiare radicalmente l'efficacia della PGD. Uno, biopsia laser assistita da blastocisti, che sembra meno dannosa della biopsia in fase di clivaggio; Due, vetrificazione degli embrioni che consente di congelare quelle blastocisti con poca o nessuna perdita di vitalità, e tre, tecniche di screening completo dei cromosomi, come l'array CGH (Gutierrez-Mateo et al. 2011) che consentono il rilevamento di tutte le anomalie cromosomiche .

I dati preliminari del nostro centro indicano che la tecnica da utilizzare, un miglioramento della nostra precedente tecnica CGH, comporterà un miglioramento molto significativo dei tassi di impianto e una riduzione dei tassi di aborto spontaneo, giustificando così l'uso del trasferimento di un singolo embrione in questa configurazione .

Ricerca preliminare di supporto:

In uno studio recente, i ricercatori hanno osservato un aumento di 1,6 volte (p < 0,001) nel tasso di impianto quando aCGH è stato applicato agli embrioni di blastocisti (Schoolcraft et al. 2010). Il gruppo di test ha utilizzato CGH, un'iterazione più vecchia e meno sensibile della tecnica da utilizzare nello studio proposto: array CGH. L'array CGH ha una risoluzione di 6 megabase e scherma il 30% di tutte le basi del DNA (rispetto allo 0,1% degli array SNP). Con l'array CGH il tasso di falsi positivi e falsi negativi è dello 0% durante la biopsia delle blastocisti e del 3% durante la biopsia degli embrioni del giorno 3 (Gutierrez Mateo et al, 2011). Sulla base dei nostri dati preliminari, i pazienti con 5 o più embrioni al giorno 3 e di età inferiore a 43 anni hanno maggiori probabilità di beneficiare della PGD, poiché producono abbastanza embrioni e abbastanza embrioni normali, quindi una tecnica di selezione, come la PGD, potrebbe sceglierli e migliorare le loro probabilità riproduttive.

Anche i nostri dati preliminari PGD mostrano un < 10% di morte embrionale dopo l'impianto per una popolazione di 38 anni (previsto sarebbe circa il 28%).

Ipotesi di studio Gli investigatori prevedono un aumento significativo dei tassi di impianto nel gruppo di prova rispetto al gruppo di controllo. I ricercatori hanno calcolato che sarebbero necessari 60 pazienti in ciascun braccio per ottenere un aumento significativo dei tassi di impianto (p <0,05) con una potenza dell'80%, sulla base di uno studio comparativo in cui i ricercatori hanno osservato un aumento di 1,6 volte del tasso di impianto ( Schoolcraft e altri 2010).

Popolazione in studio, interventi:

vedi sotto.