Effetto di una dieta chetogenica a bassissimo contenuto calorico sul microbiota intestinale e sulla distribuzione dei grassi

Interventi a breve termine che utilizzano diete chetogeniche a bassissimo contenuto calorico e sostituti del pasto possono essere prescritti a pazienti selezionati in sovrappeso o obesi con diabete di tipo 2 o prediabete. Sono disponibili pochi dati incoerenti sull'assunzione di proteine ​​da varie fonti sul peso corporeo, la composizione del microbiota intestinale e gli esiti metabolici in questi pazienti. Lo scopo del presente studio è confrontare l'efficacia, la sicurezza e l'effetto sulla composizione del microbiota di VLCKD isocalorici a breve termine utilizzando proteine ​​del siero di latte, proteine ​​vegetali o proteine ​​animali in pazienti obesi con diabete o prediabete. 50 pazienti diabetici/prediabetici obesi saranno assegnati in modo casuale a tre regimi VLCKD isocalorici (≤800 kcal/giorno) contenenti proteine ​​del siero di latte, vegetali o animali. Le misure di esito saranno parametri antropometrici, segni vitali, profilo metabolico, composizione corporea e valutazione del microbiota. I pazienti saranno valutati al basale (T0) e ogni due settimane (T15, T30) fino al giorno 45 (T45) quando saranno finalmente valutati. I pazienti riceveranno supporto e consulenza per migliorare la loro compliance. I pazienti verranno inoltre istruiti a svolgere attività fisica di intensità moderata (ad esempio, 30 minuti camminando ogni giorno) durante lo studio.

Parametri antropometrici Peso corporeo, pressione arteriosa (sistolica e diastolica), frequenza cardiaca, circonferenza vita e fianchi saranno misurati al basale (T0), ogni due settimane fino alla fine della sperimentazione (T45).

Chimica del sangue e delle urine Emocromo completo (CBC), elettroliti (cloruro, calcio, potassio, sodio, magnesio), glicemia a digiuno, insulina, lipidi (colesterolo totale e frazionato e trigliceridi) e proteine, proteina C-reattiva (PCR) ed eritrociti velocità di sedimentazione (VES), creatinina plasmatica, azoto ureico nel sangue (BUN), alanina transferasi (AST), aspartato transaminasi (ALT), acido urico e velocità di filtrazione glomerulare stimata (utilizzando l'equazione di studio Modification of Diet in Renal Disease MDRD-eGFR) sarà determinato al basale e dopo 45 giorni.

I livelli plasmatici a digiuno notturno di Insulin Like Growth Factor-1 (IGF-1) saranno misurati utilizzando kit ELISA disponibili in commercio. I test delle urine verranno eseguiti al basale e ogni due settimane fino alla fine dello studio.

Misurazione dell'assorbimetria a raggi X a doppia energia (DEXA) La composizione corporea, la massa grassa corporea totale e regionale (FM) e la massa magra (FFM), saranno misurate utilizzando DEXA (Hologic 4500 RDR) al basale e alla fine del il processo.

Il tessuto adiposo viscerale (IVA) sarà calcolato utilizzando un software completamente automatizzato. La DEXA-VAT sarà misurata in un'area larga 5 cm situata nella regione addominale appena sopra la cresta iliaca, ad un livello che coincide approssimativamente con la 5a vertebra lombare sulla scansione DEXA di tutto il corpo. L'IVA sarà stimata sottraendo il grasso sottocutaneo dal grasso addominale totale mediante un algoritmo.

Forza muscolare La forza muscolare sarà misurata attraverso un dinamometro digitale all'impugnatura a T0 e T45. Prima di iniziare, ai pazienti verrà chiesto di stringere il più forte possibile il dinamometro per almeno 3 secondi. Verranno ripetute tre misurazioni sia con il braccio dominante che con quello non dominante. Il valore più alto misurato verrà registrato come forza di presa massima.

Composizione tassonomica del microbioma intestinale Il campionamento fecale sarà effettuato utilizzando un tampone sterile e la purezza del DNA delle provette sarà valutata in base al rapporto A260/A280 utilizzando uno spettrofotometro. L'integrità e le dimensioni del DNA saranno valutate mediante elettroforesi su gel di agarosio all'1,5%. Verrà amplificata la regione V3-V4 del gene dell'RNA ribosomiale 16S. Gli ampliconi della reazione a catena della polimerasi (PCR) saranno purificati e amplificati seguendo il protocollo Nextera XT Index. Le letture elaborate saranno raggruppate e le unità tassonomiche operative saranno assegnate ai taxa.

I dati ottenuti saranno espressi come valori medi ± Deviazione Standard (SD) e infine elaborati per accertare se le differenze statistiche tra loro possono essere dimostrate, utilizzando metodi appropriati. In particolare, l'analisi della varianza (ANOVA) in tempi diversi sarà utilizzata per dati di efficacia e sicurezza, come la riduzione del peso, i cambiamenti nelle misure antropometriche, FM e FFM e la variazione dei parametri metabolici. I valori P <0,05 saranno considerati statisticamente significativi.