Valutazione meccanicistica dei trattamenti per il rigetto acuto mediato da anticorpi del trapianto di rene (MOT-AMR)

Disegno: studio osservazionale prospettico di pazienti arruolati in TAR:GET-1

Obiettivi: TAR-GET-1 (a partire dal 2019) è uno studio clinico multicentrico nel Regno Unito che confronterà il trattamento standard di cura (SOC) del rigetto acuto mediato da anticorpi del trapianto di rene (AAMR) con lo standard di cura più rituximab ( SOCR). Questo studio rappresenta una rara opportunità per studiare i meccanismi d'azione dei trattamenti (incluso il rituximab) nell'AAMR. Il razionale per l'utilizzo di rituximab è l'esaurimento dei precursori CD20-positivi nelle cellule produttrici di anticorpi. Tuttavia, il rituximab ha effetti su altri sottotipi di cellule B e non tutti gli studi hanno mostrato riduzioni del livello di anticorpi. Inoltre, l'AAMR è una malattia eterogenea, definita dalla variabilità dei marcatori meccanicistici dell'AAMR nel sangue (caratteristiche delle cellule B e degli anticorpi) e nelle biopsie del trapianto (caratteristiche istologiche ed espressione genica).

Gli obiettivi di questo studio sono:

1. Studiare in che modo il trattamento con rituximab influisce su questi marcatori meccanicistici, confrontando SOC con SOCR
2. Prevedere precocemente i benefici del trattamento, analizzando l'effetto del trattamento sui marcatori meccanicistici

Metodologia: nei pazienti arruolati nello studio TAR:GET-1 (n=170), i marcatori meccanicistici saranno analizzati con prova di concetto stabilita (caratteristiche delle cellule B e degli anticorpi, marcatori istologici e trascrizionali nella biopsia) al basale e al follow-up, facendo uso di dati clinici, materiale diagnostico in eccedenza da TAR:GET-1 e materiale da campioni di sangue extra facoltativi per la ricerca prelevati nell'ambito di TAR:GET-1, a 3, 6 e 12 mesi. Verrà inoltre offerta una biopsia del protocollo opzionale a 6 mesi dopo il trattamento.

TARGET-1 sta valutando il DSA MFI e il numero di linfociti B e target al basale e 3 mesi dopo il trattamento. Questo studio analizzerà inoltre:

1. DSA sierico MFI e target a 6 mesi; capacità di attivazione del complemento al basale, 3 mesi e 6 mesi;
2. Biopsia Punteggi istologici di Banff al basale e nelle biopsie di indicazione post-trattamento e una biopsia del protocollo opzionale;
3. Firma della trascrizione relativa alla biopsia AAMR, valutata utilizzando la tecnologia Nanostring nCounter, al basale e nelle biopsie di indicazione delle biopsie post-trattamento e una biopsia del protocollo opzionale;
4. Numero di linfociti B a 6 mesi.

Le differenze pre e post trattamento saranno analizzate confrontando SOC e SOCR. I modelli di analisi della mediazione verranno utilizzati per scomporre l'effetto totale dell'effetto del trattamento sulla perdita del trapianto a 4 anni (endpoint primario) in un effetto indiretto, che misura la quantità dell'effetto che agisce attraverso le variabili intermedie e un effetto diretto residuo .

Numero di soggetti e popolazioni di studio: 170 soggetti arruolati in TAR:GET-1

Misure di esito: come l'esito primario del TAR:GET-1 (perdita del trapianto a 4 anni dall'inizio del trattamento)

Criteri di inclusione: tutti i pazienti arruolati in TAR:GET-1; Consenso informato firmato prima di qualsiasi procedura specifica dello studio.

Criteri di esclusione: nessuno

Durata dello studio: 8 anni (la durata è dettata dalla necessità di raggiungere l'esito primario di TAR-GET-1)

Metodi statistici: i dati di questo progetto di ricerca saranno uniti e collegati con i dati della sperimentazione clinica TAR:GET-1 dal team di statistici.

Dati descrittivi: includeranno la descrizione di tutte le caratteristiche biologiche analizzate in 2 popolazioni (rituximab + SOC e SOC) al basale e in tutti i punti temporali di follow-up. Verranno riportate statistiche di riepilogo (media, mediana, deviazione standard, intervallo per le variabili continue e tabelle di frequenza per le variabili categoriali) suddivise per trattamento, con cifre esplorative (grafici a scatola e baffi per i grafici continui e a barre in pila per i categorici) .

Analisi dei risultati: le misure appropriate delle differenze tra i gruppi di trattamento saranno stimate con stime puntuali, intervalli di confidenza al 95% e valori p. A seconda del tipo di variabile (continua, categorica, time-to-event), verranno prese in considerazione tecniche di regressione (lineare, logistica, cox) e trasformazione degli endpoint.

Verranno analizzate le differenze nelle caratteristiche che confrontano i campioni prima e dopo il trattamento in punti temporali sequenziali confrontando i 2 gruppi di pazienti (SOCR contro SOC) utilizzando r modelli a effetti misti ripetono le tecniche di misurazione.

L'analisi della mediazione, un caso speciale di analisi di regressione, verrà utilizzata per documentare che il trattamento effettua un cambiamento nel biomarcatore. I modelli di analisi della mediazione verranno utilizzati per scomporre l'effetto totale dell'effetto del trattamento sulla perdita del trapianto in un effetto indiretto, che misura quanto dell'effetto agisce attraverso le variabili intermedie, e un effetto diretto residuo. Tutte le analisi di mediazione saranno basate sul principio dell'Intention-to-Treat. Verrà adattata la stessa forma di modelli di risultato delle analisi di efficacia, incluso il mediatore come covariata. Verrà utilizzato il pacchetto di mediazione all'interno di R che è stato sviluppato specificamente per rendere valida l'inferenza causale nelle analisi esplicative dei meccanismi del cambiamento indotto dal trattamento negli esiti clinici negli studi clinici randomizzati. Tutte le stime delle differenze di trattamento saranno riassunte utilizzando stime della dimensione dell'effetto e intervalli di confidenza al 95% (Dunn 2013). Collaboratore per l'analisi della mediazione: Prof Ian White, Professore di Metodi Statistici per la Medicina, UCL.