Ottimizzazione delle raccolte cervicali in gravidanza (OCCP)

Lo studio sarà non interventistico e progettato per la raccolta prospettica di campioni e l'analisi simultanea. L'endpoint primario sarà la determinazione del numero di cellule del trofoblasto extravilloso (EVT) (cellule placentari che migrano nel tratto riproduttivo) ottenute da ciascun dispositivo e procedura. Il numero di cellule EVT, aggiustato per la purezza (espressione di un marcatore fetale, ad esempio, citocheratina 7) determina direttamente la quantità di DNA fetale che sarà disponibile per i test genetici prenatali. Gli endpoint secondari includeranno il numero totale di cellule nei campioni cervicali iniziali e la quantità di DNA fetale, RNA e/o proteine ​​isolate dalle cellule EVT. Quando si ottiene il DNA fetale, sequenziamo il DNA fetale e materno per confrontare la variante a singolo nucleotide (SNV) e i loci a ripetizione tandem breve (STR) per valutare la purezza del DNA fetale (frazione fetale) o eseguire il sequenziamento dell'intero genoma. Le biomolecole prive di cellule presenti nel fluido cervicale verranno valutate anche per proteine ​​o RNA associati a esiti avversi della gravidanza o DNA fetale privo di cellule. Questi parametri verranno confrontati tra i vari metodi di raccolta per descrivere un protocollo di raccolta ottimale allo scopo di analizzare le cellule fetali e i loro componenti.

Coorte: seguiremo un gruppo di individui in gravidanza nel tempo, raccogliendo le secrezioni cervicali in varie fasi durante la gravidanza e quindi confrontando questi dati con i risultati della gravidanza.

Controllo: Raccoglieremo il fluido cervicale da donne in età riproduttiva non incinte e non mestruate per il confronto con i campioni dei partecipanti alla coorte. Si prevede che le cellule o le biomolecole prodotte dalla placenta saranno assenti e che eventuali segnali rilevati definiranno i livelli di fondo.

Descrittivo: lo studio mira a osservare e descrivere le proprietà delle secrezioni cervicali durante la gravidanza e la loro associazione con gli esiti della gravidanza o con il genotipo fetale.

Creazione di un registro/database: i ricercatori devono creare un database per organizzare e analizzare le informazioni raccolte dai partecipanti, come le proprietà delle loro secrezioni cervicali e gli esiti delle loro gravidanze.

Le donne incinte (N = 2000) verranno arruolate in questo studio perché si tratta di un'indagine su un metodo per i test prenatali e l'endpoint è il rilevamento delle cellule EVT o dei loro prodotti di origine fetale, in particolare dalla placenta. È stata scelta la fascia di età compresa tra 18 e 45 anni perché questa è la fascia principale per l'attività riproduttiva nelle donne. Verranno inoltre arruolate donne non gravide (N = 600) per controllare le cellule EVT nei campioni gravidi e determinare il rispettivo numero di cellule ottenute nel protocollo di studio quando non sono presenti cellule EVT.

Non ci saranno restrizioni alle iscrizioni basate sulla razza o sulle origini etniche. L’obiettivo è includere una diversità sufficiente nelle iscrizioni per garantire che i benefici e gli oneri della partecipazione alla ricerca siano distribuiti in modo equo. È inoltre auspicabile che i risultati siano riproducibili in tutti i gruppi razziali ed etnici.

Se il campione viene prelevato al momento del Pap test, l'operatore sanitario seguirà le procedure consigliate. Il muco iniziale in eccesso dal canale e dall'ectocervice verrà depositato nei contenitori di raccolta forniti dal PI anziché essere scartato. Se il prelievo del campione viene effettuato in un momento diverso rispetto alla citologia cervicale della gravidanza, è possibile ottenere in aggiunta uno spazzolino cervicale. Verranno forniti alle cliniche kit per la raccolta dei campioni utilizzando dispositivi utilizzati per il Pap test (anche durante la gravidanza) e altri metodi da indagare. Questi kit conterranno tutti i dispositivi per la raccolta dei campioni e la spedizione al PI. I kit conterranno anche una scheda dati del partecipante e le istruzioni per la raccolta del campione. Tutti i materiali del kit saranno codificati per identificare ciascun partecipante. La chiave dei codici sarà conservata da ciascun collaboratore del sito clinico in un armadietto chiuso a chiave nel proprio ufficio in modo che il personale che lavora con il PI avrà solo il codice deidentificato per ciascun partecipante. Per collegare i dati di laboratorio ai dati clinici, il collaboratore del sito clinico condurrà l'analisi utilizzando la chiave dei codici. Nessuna informazione derivante dall'analisi del fluido cervicale verrà restituita al partecipante o al suo medico poiché lo studio è progettato per valutare le procedure per il prelievo del campione, non i risultati del test.