COVID-19 凝固障害延長試験

1. 背景と科学的根拠:

   2019年後半に中国の武漢で最初に確認された新しいコロナウイルスSARS-CoV-2による感染は、209を超える国と地域に影響を与える世界的なパンデミックになりました。 SARS-CoV-2 によって引き起こされる病気は、COVID-19 に分類されます。 2021 年 8 月 23 日の時点で、220 か国以上で 2 億 1,200 万件を超える COVID-19 の症例が報告され、440 万人以上が死亡しています。 米国は総症例数が群を抜いて最大 (>3800 万) で、死亡率は 1.67% です。 多くの患者は軽度の上気道症状しかないかもしれませんが、一部の COVID-19 患者は多臓器不全に進行し、播種性血管内凝固症候群 (DIC) と同様の特徴を伴う全身性凝固障害を発症するリスクを伴う呼吸不全で重篤な状態になります.1 COVID-19 関連の凝固障害の病態生理は、複雑で多因子性であり、止血系の細胞要素と血漿要素の両方が関与しているようです。 凝固障害の発症は、COVID-19.2 患者の死亡率の予測因子です それでも、SARS-CoV-2感染と凝固障害または血栓症との間に確立された直接的な機械的リンクはありません。

   アイオワ大学では、COVID-19 の入院患者を対象に、標準予防用量と中用量エノキサパリンを比較する多施設無作為化臨床試験を研究者らが主導しました (NCT04360824) 3。 この試験の探索的バイオマーカーコンポーネントの一部として、研究者は、登録時および最大 30 日間の入院期間中、毎週入院している COVID-19 患者から血液サンプルを収集しました。 私たちのパイロット結果は、他のグループからのレポートと同様に、COVID-19 患者の血漿中のトロンビン生成の可能性が高いことを示しています。 特に、私たちの COVID-19 患者コホートでは、トロンビン生成の可能性の増強が少なくとも 30 日間の入院期間持続することを研究者は観察しました。 研究者らは現在、血球（血小板や好中球など）、微粒子、細胞外ヒストン、インターロイキン-6（IL6）、およびガレクチン-3（Gal-3）の活性化の機序的役割を、細胞内での増強されたトロンビン生成のメディエーターとして調査することを提案しています。 COVID-19 の患者。 研究デザインは縦断的なコホート研究であり、これにより、COVID-19 患者から最大 3 年間にわたって得られた連続サンプルの臨床転帰および細胞活性化マーカーの変化に関連して、トロンビン生成の可能性の増強の時間経過を決定することができます。 SARS-CoV-2に感染した後。 この研究は、COVID-19 患者のサブセットが、SARS-CoV-2 感染から明らかに回復した後でも後期血栓性合併症を呈する理由の手がかりを提供する可能性があります.4 したがって、このプロジェクトは、特にデルタやオミクロンなどの SARS-CoV-2 変異体の出現がパンデミックを長引かせたり、今後数か月で COVID-19 の急増を引き起こしたりする可能性があることを考えると、直接的な臨床的意味を持つ強力な科学的根拠を持っています。

2. 目的:

   2.1 主な目的 2.1.1 COVID-19 患者における増強されたトロンビン生成の可能性の時間経過を決定します。

   2.1.2 COVID-19 患者の血漿による血小板、好中球、および内皮細胞の活性化は、Gal-3、IL6、および/またはヒストンによって媒介されるという仮説を検証します。

   2.1.3 好中球、血小板、内皮細胞がトロンビン生成の増加を媒介する役割を決定し、IL6、Gal-3、またはヒストンを標的とすることで COVID-19 患者の血漿サンプルにおけるトロンビン生成の可能性が減少するかどうかを決定します。

   2.2 副次的な目的 2.2.1 COVID-19 患者における IL6、sIL6R、H3Cit、および Gal-3 の血漿レベルの変化の時間経過を決定します。

   2.2.2 COVID-19 患者における IL6、sIL6R、H3Cit、および Gal-3 の血漿中濃度とトロンビン生成能との関連を決定する。

   2.3 探索目的 2.3.1 実験的静脈血栓症のマウスモデルを使用して、COVID-19 患者の血漿から分離された血漿または微小胞の注入が血栓症を増強するかどうか、およびヒストンの中和が保護的であるかどうかを判断します。

   2.3.2 COVID-19 による入院後最大 3 年間の血漿トロンビン生成能または血漿中 IL6、sIL6R、Gal-3、または H3Cit レベルが臨床転帰を予測するかどうかを判断します。

3. 研究デザイン:

   3.1. COVID-19 (検査室で確認された SARS-CoV-2 感染) の入院患者の単一施設縦断コホート研究。

4. 科目の選択:

   4.1 包含基準 被験者は、この研究に参加するためにすべての包含基準を満たさなければなりません

   • 検査室でSARS-CoV-2感染が確認された
   • 18歳以上
   • -COVID-19またはCOVID-19の合併症の臨床管理のためのUIHCへの入院 4.2除外基準 ベースラインスクリーニングで除外基準のいずれかを満たす被験者は除外されます
   • 現在の妊娠
   • 囚人
   • 出血性疾患の病歴
   • 活動中のがん

5. 研究手順と評価:

   5.1 スクリーニングと登録:潜在的に適格な患者は、プライバシーに関する施設のポリシーに従って医療専門家によって識別されます。 医療専門家は、検査結果を含むカルテレビューを実行することにより、患者の適格性を評価します。 すべての包含および除外基準を満たす患者のみが参加を求められます。 研究のために連絡を取る患者から口頭で同意を得た後、研究スタッフのメンバーが患者に研究に参加するよう働きかけます。 研究スタッフは、データを収集して手順を実行する前に、患者または法定代理人 (LAR) からインフォームド コンセントを取得します。

   5.2 血液サンプルの採取:

   • 血液サンプルは、ベースライン（登録から24時間以内）に収集され、その後は最大30日間の入院中に毎週、および登録から3年間、3か月ごと（±30日）に収集されます。

   • 各血液サンプル コレクションには、次のものが含まれます (総血液量 17 mL)。

     • 2 つの 4.5 mL クエン酸チューブ
     • 3.0 mL EDTA チューブ 1 本
     • 5.0 mL 血清分離チューブ 1 本
   • すべての血液サンプルは、採取後 1 時間以内に処理されます。 クエン酸添加血液の 1 本のチューブを 2000 g で 10 分間遠心分離し、乏血小板血漿 (PPP) を分注して、サイトカインおよび細胞活性化マーカーのアッセイのために直ちにスナップ凍結します。 トロンビン生成アッセイ用に指定された PPP のサンプルを再度 10,000 g で 10 分間遠心分離し、等分してスナップ凍結します。 マイクロベシクルは、20,000 g で 30 分間遠心分離することにより、二重遠心分離された血漿から分離されます。 血小板を分離するために、クエン酸血液のチューブが使用されます。 EDTA で収集された血液は、完全な血球数を測定し、白血球を分離するために使用されます。 血清サンプルは、免疫グロブリンやその他のバイオマーカーの測定に使用されます。

   5.3 臨床データの取得:

   • 臨床および人口統計データは、登録時および各フォローアップ訪問時のUIHC医療記録レビューおよび患者インタビューによって収集され、UIHC RedCapに入力されます

   • 収集するデータ:

     • 年
     • 性別
     • 人種/民族 (自己申告)
     • 身長、体重、体格指数
     • COVID-19 の予防接種歴
     • 薬
     • その他の病状/過去の病歴
     • 血栓症の病歴
     • 喫煙歴
     • 現在の症状 (発熱、悪寒、疲労、頭痛、筋肉痛 (筋肉または体の痛み)、呼吸困難 (息切れ)、咳、嗅覚障害 (嗅覚の部分的または完全な喪失)、嗅覚障害 (味覚の変化)、吐き気、下痢、立ちくらみ、その他の症状
     • 特に注目される臨床転帰（全死因死亡率、血栓症、画像診断で確認される動脈血栓症、画像診断で確認される静脈血栓塞栓症）
     • 出血
   • ISTH基準に従って定義された大出血.5
   • 大出血のISTH基準を満たさない出血イベントとして定義される軽度の出血

6. 撤回または終了:

   研究からの脱退を希望する参加者は、いつでもそうすることができます。 参加者が研究からの撤退を選択した場合、その参加者に関する新しいデータが研究目的で収集されることはありません。 参加者は、すでに収集されたデータ (人口統計データを含む撤回を追跡するために必要なデータを除く) を研究者が使用するための許可を撤回することもできますが、参加者はサイトの主任研究者に書面でこれを行う必要があります。 .

   治験実施計画書を継続しても統計的または科学的に有用なデータが得られないと判断された場合、治験責任医師はいつでも治験を中止することができます。

7. 統計分析：

   すべての実験室測定値の要約統計が提供されます。 カテゴリ尺度は、カウントとパーセンテージとして表示されます。 連続測定分布は、D'Agostino-Pearson オムニバス テストを使用して評価され、分布の正規性に応じて、平均と標準偏差、または中央値と IQR として表示されます。

   シリアル サンプルとベースライン サンプル間の差の検定は、変数のタイプと分布に応じて、フィッシャーの正確なスチューデントの t 検定またはマン ホイットニーの U 検定に従います。 時間の経過に伴う分析では、反復測定データとさまざまな結果変数分布に対応する一般化線形混合モデリング (GLMM) フレームワークが利用されます。 すべてのモデルには、グループ内およびグループ間の違いをテストするための予測因子として時間が含まれます。 未調整の評価に加えて、最適な予測因子セットを特定するために、モデルに含めるために年齢や性別などの変更要因が考慮されます。 各結果について、最小の赤池情報量基準 (AIC) を持つ多変量モデルが最適な予測子セットと見なされます。 最適なモデルの主効果と交互作用の統計的有意性に関するすべての検定は、アルファ = 0.05 で実施され、複数の比較を説明するモデル予測子の数に基づくボンフェローニ調整に従います。

   パイロット データに基づいて、少なくとも 1.5​​4 の効果サイズを想定すると、アルファ = 0.00625 (ボンフェローニ補正、0.05/8) でこれらの測定値の差をテストする場合、合計 46 人の被験者が 80% を超える検出力を持つ必要があります。 一部のサンプルに関する技術的な問題や長期的なサンプル収集への患者の参加の中止を予想して、研究者は技術的に適切な連続サンプルを取得するために 60 人の被験者を募集することを提案しています。

8. 試験管理:

IRB は、連邦政府が定める規制に従って、適切な代表者と機能を持つことが期待されています。 IRB は、同意書とプロトコルを承認する必要があります。 インフォームドコンセントを取得して文書化する際、治験責任医師は適用される規制要件を遵守し、ヘルシンキ宣言に由来する臨床試験実施基準 (GCP) および倫理原則を順守する必要があります。 この研究への募集と登録の前に、患者には研究の完全な説明が与えられ、同意書を確認する機会が与えられます。 各同意書には、FDA 規則および地域または州の規則で現在要求されているすべての関連要素を含める必要があります。 この重要な情報が患者に提供され、研究に参加することの意味を患者が理解していることを治験責任医師が確認したら、患者は IRB 承認の同意書に署名することにより、研究に参加することに同意するよう求められます。 患者が治験に参加する前に、書面によるインフォームド コンセント フォームに、患者または患者の法的に認められた代理人、およびインフォームド コンセントの話し合いを行った人物が署名し、個人的に日付を記入する必要があります。