COVID-19 koagulopati forlængelsesundersøgelse

1. Baggrund og videnskabelig begrundelse:

   Infektion med den nye coronavirus SARS-CoV-2, først identificeret i Wuhan, Kina i slutningen af ​​2019, er blevet en global pandemi, der påvirker over 209 lande og territorier. Sygdommen forårsaget af SARS-CoV-2 er klassificeret som COVID-19. Fra den 23. august 2021 var mere end 212 millioner tilfælde af COVID-19 blevet rapporteret i mere end 220 lande, hvilket resulterede i mere end 4,4 millioner dødsfald. USA har langt det største antal samlede tilfælde (>38 millioner) med en dødelighed på 1,67 %. Selvom mange patienter kun har milde øvre luftvejssymptomer, bliver nogle COVID-19-patienter alvorligt syge med respirationssvigt med risiko for progression til multipel organsvigt og udvikling af systemisk koagulopati med funktioner, der ligner dissemineret intravaskulær koagulation (DIC).1 Patofysiologien af ​​COVID-19-associeret koagulopati ser ud til at være kompleks og multifaktoriel, der involverer både cellulære og plasmatiske elementer i det hæmostatiske system. Udvikling af koagulopati er en prædiktor for dødelighed hos patienter med COVID-19.2 Alligevel er der ingen direkte mekanistiske forbindelser etableret mellem SARS-CoV-2-infektion og koagulopati eller trombose.

   Ved University of Iowa ledede efterforskerne et multicenter randomiseret klinisk forsøg, der sammenlignede standard profylaktisk dosis med mellemdosis enoxaparin hos indlagte patienter med COVID-19 (NCT04360824).3 Som en del af en udforskende biomarkørkomponent i dette forsøg indsamlede efterforskerne blodprøver fra hospitalsindlagte COVID-19-patienter ved indskrivning og ugentligt i op til 30 dages indlæggelse. Vores pilotresultater samt rapporter fra andre grupper viser øget potentiale for thrombindannelse i plasma fra COVID-19-patienter. Især i vores COVID-19-patientkohorte observerede efterforskerne, at øget trombingenereringspotentiale varede i mindst 30 dages indlæggelse. Forskerne foreslår nu at udforske de mekanistiske roller for aktivering af blodceller (såsom blodplader og neutrofiler), mikropartikler, ekstracellulære histoner, interleukin-6 (IL6) og galectin-3 (Gal-3) som mediatorer af øget thrombindannelse i patienter med COVID-19. Undersøgelsesdesignet vil være et longitudinelt kohortestudie, som vil give os mulighed for at bestemme tidsforløbet for øget trombingenereringspotentiale i forhold til kliniske resultater og ændringer i markører for cellulær aktivering i serielle prøver opnået fra COVID-19 patienter i op til 3 år efter infektion med SARS-CoV-2. Denne undersøgelse kan give fingerpeg om, hvorfor en undergruppe af COVID-19-patienter har sene trombotiske komplikationer, selv efter tilsyneladende bedring efter SARS-CoV-2-infektion.4 Dette projekt har således et stærkt videnskabeligt rationale med direkte kliniske implikationer, især i betragtning af fremkomsten af ​​SARS-CoV-2-varianter såsom delta og omicron, der kan forlænge pandemien og/eller forårsage stigninger i COVID-19 i de kommende måneder.

2. Mål:

   2.1 Primære mål 2.1.1 Bestem tidsforløbet for øget trombingenereringspotentiale hos patienter med COVID-19.

   2.1.2 Test hypotesen om, at aktivering af blodplader, neutrofiler og endotelceller med plasma fra COVID-19-patienter medieres af Gal-3, IL6 og/eller histoner.

   2.1.3 Bestem rollerne af neutrofiler, blodplader og endotelceller i at mediere øget thrombingenerering, og om målretning mod IL6, Gal-3 eller histoner nedsætter trombingenereringspotentialet i plasmaprøver fra COVID-19-patienter.

   2.2 Sekundære mål 2.2.1 Bestem tidsforløb for ændringer i plasmaniveauer af IL6, sIL6R, H3Cit og Gal-3 hos patienter med COVID-19.

   2.2.2 Bestem sammenhængen mellem plasmaniveauer af IL6, sIL6R, H3Cit og Gal-3 med trombingenereringspotentiale hos patienter med COVID-19.

   2.3 Udforskningsmål 2.3.1 Ved hjælp af musemodeller af eksperimentel venøs trombose bestemmes, om infusion af plasma eller mikrovesikler isoleret fra COVID-19 patientplasma forstærker trombose, og om neutraliserende histoner er beskyttende.

   2.3.2 Bestem, om plasmathrombingenereringspotentiale eller plasmaniveauer af IL6, sIL6R, Gal-3 eller H3Cit forudsiger kliniske resultater i op til 3 år efter indlæggelse med COVID-19.

3. Studere design:

   3.1. Enkeltcenter longitudinalt kohortestudie af indlagte patienter med COVID-19 (laboratoriebekræftet SARS-CoV-2-infektion).

4. Udvalg af fag:

   4.1 Inklusionskriterier Forsøgspersoner skal opfylde alle inklusionskriterier for at deltage i denne undersøgelse

   • Laboratorie bekræftet SARS-CoV-2-infektion
   • Alder ≥18 år
   • Hospitalsindlæggelse på UIHC for klinisk behandling af COVID-19 eller komplikationer af COVID-19 4.2 Eksklusionskriterier Forsøgspersoner, der opfylder et af eksklusionskriterierne ved baseline screening, vil blive udelukket
   • Nuværende graviditet
   • Fange
   • Anamnese med en blødningsforstyrrelse
   • Aktiv kræft

5. Studieprocedurer og evalueringer:

   5.1 Screening og tilmelding: Potentielt kvalificerede patienter vil blive identificeret af en sundhedsperson i henhold til institutionens politik om privatliv. Sundhedspersonalet vil vurdere patientens egnethed ved at udføre en diagramgennemgang, som vil omfatte laboratorieresultater. Kun patienter, der opfylder alle inklusions- og eksklusionskriterier, vil blive bedt om at deltage. Efter at have indhentet mundtligt samtykke fra patienten til at blive kontaktet til undersøgelsen, vil et medlem af forskningspersonalet henvende sig til patienten for at blive en del af undersøgelsen. Forskningspersonalet vil indhente informeret samtykke fra patienten eller den juridisk autoriserede repræsentant (LAR), før de indsamler data og udfører eventuelle procedurer.

   5.2 Blodprøvetagning:

   • Blodprøver vil blive indsamlet ved baseline (inden for 24 timer efter tilmelding), derefter ugentligt under op til 30 dages indlæggelse og hver 3. måned (± 30 dage) i en periode på 3 år fra indskrivning.

   • Hver blodprøvesamling vil omfatte følgende (samlet blodvolumen 17 ml):

     • To 4,5 ml citratrør
     • Et 3,0 ml EDTA-rør
     • Et 5,0 ml serumseparatorrør
   • Alle blodprøver behandles inden for en time efter indsamling. Et rør med citratblod centrifugeres ved 2000 g i 10 minutter, og blodpladefattigt plasma (PPP) uddeles og lynfryses øjeblikkeligt til analyser af cytokiner og markører for cellulær aktivering. Prøver af PPP, der er beregnet til thrombingenereringsassays, centrifugeres igen ved 10.000 g i 10 minutter, uddeles i portioner og lynfryses. Mikrovesikler isoleres fra dobbeltcentrifugeret plasma ved centrifugering ved 20.000 g i 30 min. Et rør med citratblod vil blive brugt til at isolere blodplader. Blod opsamlet i EDTA vil blive brugt til at måle fuldstændige blodtal og isolere leukocytter. Serumprøver vil blive brugt til at måle immunglobuliner og andre biomarkører.

   5.3 Klinisk datafangst:

   • Kliniske og demografiske data vil blive indsamlet ved UIHC-journalgennemgang og patientinterview på tidspunktet for tilmelding og hvert opfølgningsbesøg og indgået i UIHC RedCap

   • Data, der skal indsamles:

     • Alder
     • Køn
     • Race/etnicitet (selvrapporteret)
     • Højde, vægt og kropsmasseindeks
     • COVID-19 vaccinationshistorie
     • Medicin
     • Andre medicinske tilstande/tidligere sygehistorie
     • Historie om trombose
     • Historie om cigaretrygning
     • Aktuelle symptomer (feber, kulderystelser, træthed, hovedpine, myalgi (muskel- eller kropssmerter), dyspnø (åndetnød), hoste, anosmi (delvist eller fuldstændig tab af lugtesansen), dysguesi (ændret smagssans), kvalme, Diarré, svimmelhed, andre symptomer
     • Kliniske resultater af særlig interesse (dødelighed af alle årsager, trombose, arteriel trombose bekræftet med billeddannelse, venøs tromboemboli bekræftet med billeddannelse)
     • Blødende
   • Større blødning, defineret i henhold til ISTH-kriterier.5
   • Mindre blødning, defineret som en blødningshændelse, der ikke opfylder ISTH-kriterierne for større blødninger

6. Tilbagetrækning eller opsigelse:

   Enhver deltager, der ønsker at trække sig fra undersøgelsen, kan gøre det til enhver tid. Hvis en deltager vælger at trække sig fra undersøgelsen, vil der ikke blive indsamlet nye data om den pågældende deltager til undersøgelsesformål. En deltager kan også trække tilladelsen tilbage for forskerne til at bruge hans eller hendes data, der allerede er blevet indsamlet (ud over de data, der er nødvendige for at holde styr på tilbagetrækningen, herunder demografiske data), men deltageren skal gøre dette skriftligt til webstedets hovedinvestigator .

   Undersøgelsen kan til enhver tid afsluttes af den primære efterforsker, hvis det skønnes, at en fortsættelse af protokollen ikke vil give statistisk eller videnskabeligt brugbare data.

7. Statistisk analyse:

   Sammenfattende statistikker vil blive leveret for alle laboratorieforanstaltninger. Kategoriske mål vil blive præsenteret som tællinger og procenter. Kontinuerlige målfordelinger vil blive vurderet ved hjælp af D'Agostino-Pearson omnibus-testen og vist som middelværdier og standardafvigelser eller medianer og IQR'er, afhængigt af normaliteten af ​​fordelingen.

   Test for forskelle mellem serielle prøver og basislinjeprøver vil følge Fishers eksakte Students t- eller Mann-Whitney U-test, afhængigt af variabeltype og fordeling. Analyser over tid vil bruge den generaliserede lineære blandede modellering (GLMM), som rummer gentagne måldata og en række udfaldsvariable fordelinger. Alle modeller vil inkludere tid som en forudsigelse til at teste for forskelle inden for og mellem grupper. Ud over ujusterede vurderinger vil modificerende faktorer som alder og køn blive overvejet til inklusion i modellerne for at identificere det optimale prædiktorsæt. For hvert udfald vil den multivariate model med det mindste Akaike informationskriterium (AIC) blive anset for at være det optimale prædiktorsæt. Alle tests for statistisk signifikans af den optimale models hovedeffekter og interaktioner vil blive udført ved alfa = 0,05 og følge Bonferroni-justeringen baseret på antallet af modelprædiktorer for at tage højde for flere sammenligninger.

   Baseret på vores pilotdata og antagelse af effektstørrelser på mindst 1,54, er der behov for i alt 46 forsøgspersoner for at have >80 % effekt, når man tester for forskelle i disse mål ved alfa = 0,00625 (Bonferroni-korrektion, 0,05/8). Foregribelse af tekniske problemer med nogle prøver eller afbrudt deltagelse af patienter i den langsgående prøveindsamling, foreslår efterforskerne at rekruttere 60 forsøgspersoner for at få teknisk passende serielle prøver.

8. Studieledelse:

Det forventes, at IRB vil have den rette repræsentation og funktion i overensstemmelse med føderalt påbudte regler. IRB bør godkende samtykkeerklæringen og protokollen. Ved at indhente og dokumentere informeret samtykke bør investigator overholde de(n) gældende lovgivningsmæssige krav og overholde god klinisk praksis (GCP) og til etiske principper, der har deres oprindelse i Helsinki-erklæringen. Inden rekruttering og tilmelding til denne undersøgelse, vil patienten få en fuldstændig forklaring af undersøgelsen og vil få mulighed for at gennemgå samtykkeformularen. Hver samtykkeformular skal indeholde alle de relevante elementer, der i øjeblikket kræves af FDA-regulativerne og lokale eller statslige regler. Når denne væsentlige information er blevet givet til patienten, og investigatoren er sikret, at patienten forstår implikationerne af at deltage i undersøgelsen, vil patienten blive bedt om at give samtykke til at deltage i undersøgelsen ved at underskrive en IRB-godkendt samtykkeformular. Forud for en patients deltagelse i forsøget, skal den skriftlige informerede samtykkeformular være underskrevet og personligt dateret af patienten eller patientens juridisk acceptable repræsentant og af den person, der har gennemført samtalen om informeret samtykke.