간이식 중 중간엽 줄기세포의 동원

중간 엽 줄기 세포 (MSCs)는 상당한 면역 억제 효과가 있는 알려진 면역 조절제입니다. MSC는 인간 임상 시험에서 유망한 프론티어로 부상했습니다. 중간엽 줄기세포는 비면역원성이어서 동종이계 장벽을 가로질러 이식할 수 있는 것으로 나타났습니다. 이러한 특성으로 인해 MSC는 이식(이 경우 간 이식) 거부를 줄이는 데 관여하는 경우 연구하기에 이상적인 후보입니다. 그렇다면 중간엽 줄기세포로 대체하여 면역억제제 사용을 크게 줄일 수 있기 때문에 정보가 매우 중요할 것입니다. 이것은 두 가지 목적을 수행할 것입니다: 약리학적 면역억제와 관련된 임상적 문제 감소(다음 단락에서 논의됨); 중간엽 줄기세포에 의한 이식된 간 보호에 대한 추가적인 도움.

특히 면역억제제의 사용은 간 이식 환자를 포함한 장기 이식에서 매우 중요합니다. 그러나 이들의 사용은 바이러스성 간염의 재활성화, 기회 감염 및 기타 합병증과 같은 수많은 결점을 동반한다. MSC를 사용하여 간 이식 환자의 면역억제제 사용을 줄일 수 있다면 간 이식의 결과로 이환율과 사망률이 크게 감소할 수 있습니다.

간 대식세포, 즉 쿠퍼 세포는 단핵구를 간으로 모집하는 알려진 기능을 가지고 있습니다. 그들은 단핵구를 간으로 유인하여 염증 유발 효과가 있는 것으로 나타났습니다. 그들은 또한 전 섬유화 기능을 가진 간 성상 세포(HSC)와 상호 작용합니다. 그러나 섬유증 퇴행의 역할을 암시하는 항염증 효과도 있는 것으로 나타났습니다. 간 대식세포는 치료 개입을 위한 흥미로운 새로운 표적이며 kupffer 세포에 대한 스테로이드의 효과와 MSC와의 상호 작용은 완전히 탐구되지 않았습니다.

환자는 맥박 산소측정기, 심전도, 비침습적 혈압 모니터링 온도 및 카프노메트리를 포함한 표준 미국마취과학회(ASA) 모니터에 부착됩니다. 환자는 기관내 삽관 및 조절된 환기로 전신 마취 상태에 있게 됩니다. 모든 간 수술에 관례적인 것처럼 혈압 모니터링과 반복 혈액 샘플을 위해 동맥 라인을 삽입합니다. 표시된 경우 폐동맥 카테터를 삽입합니다.

마취는 휘발성 약제를 사용하여 유지됩니다. 마비는 마취 전문의가 선택한 비탈분극성 신경근 차단제를 사용하여 제공됩니다.

Protime(PT)/International Normalized Ratio(INR)/Complete Blood Count/electrolytes를 분석하기 위해 표준 관행과 마찬가지로 시간당 혈액 샘플을 동맥 라인에서 채취합니다. 적혈구, 신선 냉동 혈장 및 혈소판은 필요에 따라 수혈됩니다.

통상적인 간 이식 수혜자는 무간기 단계에서 면역 억제를 위해 통상적인 용량의 메틸프레드니솔론을 투여받게 됩니다.

수술 중 이식을 받는 환자는 연구 목적으로 동맥 라인에서 수집한 3개의 혈액 샘플을 갖게 됩니다. 각 샘플에는 3cc의 혈액이 들어 있습니다.

혈액 샘플의 시점은 다음과 같습니다.

• 기준선으로 동맥 라인 배치 직후
• 스테로이드 주사 전 무간기
• 스테로이드 투여 2시간 후 수술 후, 연구 팀원이 2개의 추가 3mL 혈액 샘플을 채취합니다. 첫 번째 샘플은 수술 후 1일째 면역억제제 투여 전이고 두 번째 샘플은 수술 후 5일째입니다. 따라서 간 이식 환자의 경우 연구를 위해 5일 동안 총 15밀리리터(mL)의 혈액을 수집합니다.

면역 억제 약물의 투여 및/또는 용량은 연구 연구의 구성 요소로 변경되지 않습니다.

간 기증 기관의 조직 샘플도 MCS 배양을 위해 채취됩니다(면제 동의서).

대조군 환자는 간 절제술을 받게 됩니다. 그들은 메틸프레드니솔론을 투여받지 않습니다. 수술 중 혈액 샘플은 다음 시점에 수집됩니다.

• 동맥 라인 배치 직후
• 간 절제 2시간 후. 수술 후 2개의 추가 3mL 혈액 샘플을 채취합니다. 첫 번째는 수술 후 1일째에, 두 번째는 수술 후 5일째 또는 퇴원일 중 더 빠른 날에 찍습니다. 이 샘플은 연구팀 구성원이 수집합니다. 연구 목적으로 간 절제술을 받은 환자로부터 5일 동안 총 12mL의 혈액을 채취합니다.

모든 혈액 샘플은 MSB, E579에 위치한 Dr. Rameswhar의 연구실로 즉시 전달됩니다. 두 그룹의 혈액에 존재하는 중간엽 줄기세포의 상대적 빈도는 유동 세포측정법으로 평가할 것입니다. 데이터는 MSC/106 단핵 세포의 백분율로 표시됩니다. 두 피험자 그룹 간에 차이가 있는지 확인하기 위해 통계 분석을 수행합니다.

기증자 간을 대상으로 한 위의 연구 외에도 간세포를 글루코코르티코이드로 치료한 다음 간에서 아쿠아포린의 변화를 검사할 것입니다. 이 수정의 이유는 아쿠아포린이 수분 축적 능력을 증가시키는지 확인하기 위함입니다. 이 추가 연구는 작은(<1mg) 조직만으로 충분하기 때문에 샘플을 변경하지 않습니다.