만성 편두통에서 Erenumab 치료의 신경생리학적, 생체분자학적 및 심리적 측면

이 연구는 IRCCS Mondino Foundation의 두통 과학 센터의 신경과 전문의와의 첫 번째 스크리닝 방문으로 구성되었으며, 전체 신경학적 및 일반 검사가 수행되었으며 Mondino Foundation에 참석하는 모든 환자가 사용하는 일상적인 두통 일지에서 수집된 데이터는 다음과 같습니다. 포함/제외 기준을 확인하기 위해 확인했습니다.

환자가 기준을 충족하면 한 달 동안 기본 관찰 기간에 등록되었습니다. 기준선 관찰 기간(T0)이 끝날 때, 포함/제외 기준이 여전히 충족되면 환자는 다음 절차를 완료했습니다: 임상 및 인구통계학적 특징 기록, 활력 징후 평가, 신경생리학적 평가 및 DSM(The Diagnostic and 정신 장애의 정적 매뉴얼), 정맥혈 샘플링, 심리적 상태, 건강 상태 및 삶의 질에 대한 일련의 자가 관리 설문지 편집.

T0에 환자들은 에레누맙 70mg의 첫 번째 용량을 피하로 치료받았다.

28일(완전 4주) 후 환자는 두 번째 방문(T1)을 위해 돌아와 임상 변수 및 부작용을 보고했습니다. T1 기간 동안 에레누맙 70mg의 두 번째 주사가 투여되었고, 세 번째이자 마지막 용량인 에레누맙 70mg은 추가 28일 간격(T2) 후에 환자가 집에서 자가 투여했습니다. 연구의 마지막 방문(T3)은 T1에서 56일, 즉 erenumab의 마지막 투여 후 28일에 계획되었습니다. T3에서 환자는 T0에서 수행된 것과 동일한 다학제적 평가(임상 및 인구통계학적 특징 기록, 활력 징후 평가, 신경생리학적 평가, 정맥혈 샘플링, 환자의 심리적 상태, 건강 상태 및 품질에 관한 설문지 편집)로 테스트되었습니다. 인생의.

통각 수용성 철수 반사 측정. 통각수용 철회 반사(NWR)는 척수 통각수용 전달 연구를 위한 객관적이고 견고한 신경생리학적 기술로 간주됩니다. 반사는 오전 9시에서 오전 11시 사이에 전문 기술자에 의해 조용한 환경에서 잘 검증된 절차에 따라 하지에서 기록되었습니다. 환자는 편안한 자세로 발목을 90° 굴곡하고 무릎을 130° 굴곡했습니다. 비복 신경은 한 쌍의 Ag/AgCl 표면 전극으로 측면 복사뼈 뒤에서 전기적으로 자극되었습니다. 전기 자극은 5개의 연속 제곱 펄스(1ms, 200Hz)로 이루어졌으며, 60-120초마다 무작위로 전달되었습니다. 근전도 스윕(Synergy, Medelec, United Kingdom)은 한 쌍의 Ag/AgCl 표면 전극을 사용하여 동측 대퇴이두근의 두두부 단부로부터 기록되었습니다. 모든 역치 평가는 계단식 방법을 사용하였으며, 강도는 단계당 0.3mA씩 증가시켰다. 기록 매개변수는 분석 시간 300ms, 감도 20mV, 필터 대역 통과 3~3000Hz였습니다.

연구자들은 먼저 최소 20mV 및 10ms의 3회 연속 안정적인 근육 반응을 유도할 수 있는 최저 강도(mA)로 정의되는 NWR(RTh)의 단일 자극 반사 임계값을 평가했습니다. 그들은 또한 평균 AUC(곡선 아래 면적 - mV x ms), 평균 대기 시간(ms) 및 0-10점 시각적 아날로그 척도(VAS-RTh)로 평가된 주관적 통증 인식을 평가했습니다.

그런 다음 조사관은 2Hz의 주파수에서 5개의 전기 자극을 사용하여 시간 합산 임계값(TST)을 평가했습니다. TST는 네 번째 및 다섯 번째 근전도 검사에서 최소 20mV 및 10ms의 3회 연속 안정적인 근육 반응을 이끌어낼 수 있는 가장 낮은 강도(mA)로 정의되었습니다. 또한 TST의 첫 번째(VAS-TST-1) 및 다섯 번째(VAS-TST-5) 자극에 대한 주관적인 통증 인식을 0~10점의 시각적 아날로그 척도로 평가했습니다.

MicroRNA 발현. microRNA 발현은 말초 ​​혈액 단핵 세포(PBMC)에서 실시간 역전사(RT) PCR에 의해 평가되었습니다.

PBMC 분리: 혈액 샘플(10ml)을 참가자로부터 에틸렌디아민 테트라-아세트산 함유 튜브 내에서 수집했습니다. 혈액 샘플을 인산염 완충 식염수(PBS)(Sigma)와 1:1 비율로 희석했습니다. 희석된 혈액 샘플을 Ficoll 분리 용액(10ml)(Sigma)에 천천히 넣고 실온에서 30분 동안 800g에서 원심분리했습니다. 중간 백색 단층으로 축적된 PBMC를 멸균 PBS에서 300g에서 15분 동안 두 번 세척했습니다. 세척 후, PBMC를 펠릿화하고 사용할 때까지 -80℃에서 보관하였다.

MicroRNAs 유전자 발현: PBMCs로부터 RNA 분리는 Direct-zol RNA Mini prep plus(Zymo Research)를 사용하여 수행되었습니다. RNA 농도는 NanoDrop 분광광도계(Nanodrop™ Thermo Fisher Scientific, Euroclone Milano)를 사용하여 230 및 280 nm에서 흡광도에 의해 측정되었습니다. cDNA 합성은 MirXMirna First strand Synthesis(Takara-Diatech, Jesi-An Italy)를 사용하여 수행하였고 TB Green q-Rt PCR(Takara-Diatech, Jesi-An Italy)을 사용하여 miRNA-34a-5p의 발현 수준을 결정했습니다. 및 miRNA-382-5p. 변성은 95°C에서 수행되었고 증폭은 Light Cycler 480 Instrument RT-PCR Detection System(Roche, Milan, Italy)을 사용하여 40주기 동안 2단계 순환(95-60°C)을 통해 수행되었습니다. 표적 유전자 발현 수준은 하우스키핑 유전자로 사용되는 U6(소형 핵 RNA의 일종)로 정규화되었습니다. Ct 값을 이용하여 2-∆Ct = 2 - (Ct 유전자 - Ct 하우스키핑 유전자) 공식에 따라 유전자 발현 수준을 계산하였다.

장애 및 심리 평가.

배터리에는 다음에 대한 평가가 포함되었습니다.

4) 편두통 관련 장애 및 관련 특징:

• 편두통 장애 평가(MIDAS) 테스트: 0-5(등급 I): 경미한 장애, 6-10(등급 II): 경미한 장애, 11-20(등급 III): 중등도 장애, 21-40(등급 IVa): 중증 장애, 41 이상(등급 IVb): 매우 중증 장애;
• 두통 영향 시험-6(HIT-6): 49 이하: 영향 없음, 50-55: 약간의 영향, 56-59: 상당한 영향, 60-78 심각한 영향;
• 편두통 통증의 평균 강도 평가를 위한 통각수용 등급 척도: 0 통증 없음 - 10 매우 심함;

• 이질통 증상 체크리스트(ASC-12): 0-3: 경증 피부 이질통, 6-8: 중등도 피부 이질통, 9 이상: 중증 피부 이질통.

  5) 삶의 질:

• 편두통 관련 삶의 질 설문지(MSQ): 14개 항목 평가, 각 항목은 6점 척도("전혀 없음"에서 "항상" 범위)로 평가됩니다. 그런 다음 원시 점수는 100점 척도로 변환되며 점수가 높을수록 삶의 질이 높음을 나타냅니다.
• 약식 건강 조사(SF-36): 정신 구성 요소 요약(MCS) 및 물리적 구성 요소 요약(PCS)이라는 두 가지 주요 하위 영역을 참조하는 11개 항목 평가;

• 건강 0-100: 환자에게 정확한 평가 시점의 전반적인 건강 상태를 0-100 범위로 점수를 매기도록 요청했습니다.

  6) 심리적 상태:

• 병원 불안 및 우울증 척도(HADS): 불안 및 우울증의 증상을 평가하는 4점(0-3) 리커트 척도의 14개 항목 설문지. 두 개의 서로 다른 영역에서 8점 이상이면 불안 및/또는 우울증에 유의한 것으로 간주됩니다.
• Leeds Dependence Questionnaire(LDQ): 다양한 물질에 대한 의존도를 측정하기 위한 0-3 척도의 10개 항목 도구. 의존성을 나타내는 컷오프 점수가 설정되지 않았습니다.
• Toronto 감정표현불능증 척도(TAS-20): 감정표현불능증 특성, 즉 자신의 감정을 말로 표현하는 개인의 어려움을 평가하는 5점(1-5) 리커트 척도의 20개 항목 설문지. 61점 이상의 점수는 감정불능증의 존재에 대해 유의미한 것으로 간주되었습니다.
• 어린 시절 트라우마 설문지: 총 트라우마 경험 수 측면에서 고려된 다양한 유형의 어린 시절 트라우마를 언급하는 13개 항목 포함;
• 스트레스가 많은 생활 사건 설문지: 스트레스가 많은 생활 사건 58개(예: 이사, 이혼, 새 직장, 해고 등) 목록으로 구성됩니다. 환자들은 지난 10년 동안 그들에게 일어났던 사건들을 표시하도록 요청받았다.