Vergelijking van de prestatie van SB2-Infliximab met Originator Infliximab in de meting van serumconcentraties in serum

EXPERIMENTEEL PLAN Serum Dit wordt gescheiden van perifeer bloed dat is afgenomen van 2 gezonde proefpersonen, 2 patiënten met colitis ulcerosa (een met rustende en de andere met actieve ziekte), en 2 patiënten met de ziekte van Crohn (een met rustende en de andere met actieve ziekte). Het zal vers of vers ontdooid worden gebruikt uit serum dat is bewaard bij -20 oC.

Infliximab

Er zullen twee bronnen van infliximab worden gebruikt:

• Orig-IFX van Janssen
• MSD-IFX van Merck Sharp & Dome.

Bereiding van gesimuleerde serummonsters Vers of ontdooid serum wordt verrijkt met IFX om serum te verkrijgen in concentraties van 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15 en 20 µg/ml. Dit bereik dekt wat in de dagelijkse praktijk wordt gezien. Deze preparaten worden vers gebruikt of in aliquots bewaard bij 4 oC of -20 oC.

Te evalueren assays Deze in de handel verkrijgbare assaykits zijn gekozen op basis van het feit dat ze algemeen worden gebruikt. Ze zullen allemaal worden gebruikt volgens de aanbevelingen van de fabrikant.

• SHIKARI Q-INFLIXI van Matriks Biotech;
• LISA TRACKER Premium van Theradiag;
• Promonitor ELISA-kit van Grifols;
• Quantum Blue Infliximab dalspiegel sneltest van Buhlmann. Testprotocol De twee IFX-moleculen zullen in tweevoud op dezelfde platen worden getest bij de bereide concentraties (zoals hierboven). Eén testplaat is voldoende voor sera van 2 personen. Op een bepaalde dag wordt slechts één assay uitgevoerd.

Voor de directe vergelijkingen zijn 3 ELISA-assaykits nodig om 6 paar IFX-verrijkte sera te beoordelen. De sneltest wordt op soortgelijke wijze in tweevoud uitgevoerd.

Om het effect van bewaren bij -20 oC gevolgd door invriezen-ontdooien en bewaren bij 4 oC te beoordelen, worden sera van twee proefpersonen bereid in één concentratie (7 µg/ml), vers getest en 7 dagen later opnieuw na opslag bij de twee temperaturen. Dit zal worden uitgevoerd met slechts één assaykit (degene die het beste presteert in de vergelijkende onderzoeken als er verschillen in kits optreden).

Analyse Het resultaat van MSD-IFX wordt vergeleken met dat van Orig-IFX door de respectieve concentratiekrommen uit te zetten en ze voor elke assay visueel te vergelijken. De procentuele afwijking voor elke concentratie wordt berekend. De resultaten zullen ook worden vergeleken tussen verschillende assays voor elke IFX-bron en vervolgens zullen de bevindingen worden vergeleken.