Sammenligning af ydeevnen af ​​SB2-infliximab med original-infliximab i måling af serumkoncentrationer i serum

EKSPERIMENTEL PLAN Serum Dette vil adskilles fra perifert blod taget fra 2 raske forsøgspersoner, 2 patienter med colitis ulcerosa (en med hvilende og den anden med aktiv sygdom), og 2 patienter med Crohns sygdom (en med hvilende og den anden med aktiv sygdom). Den vil blive brugt visne frisk eller nyoptøet fra serum opbevaret ved -20 oC.

Infliximab

To kilder til infliximab vil blive brugt:

• Orig-IFX fra Janssen
• MSD-IFX fra Merck Sharp & Dome.

Forberedelse af simulerede serumprøver Frisk eller optøet serum tilsættes IFX til opnået serum i koncentrationer på 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15 og 20 ug/ml. Dette sortiment dækker det, der ses i rutinemæssig praksis. Disse præparater vil blive brugt friske eller opbevaret i alikvoter ved 4 oC eller -20 oC.

Assays, der skal evalueres. Disse kommercielt tilgængelige assay-sæt er blevet valgt på grundlag af, at de er almindeligt anvendte. De vil alle blive brugt i henhold til producentens anbefalinger.

• SHIKARI Q-INFLIXI fra Matriks Biotech;
• LISA TRACKER Premium fra Theradiag;
• Promonitor ELISA kit fra Grifols;
• Quantum Blue Infliximab dalniveau hurtigtest fra Buhlmann. Testprotokol De to IFX-molekyler vil blive testet på de samme plader i to eksemplarer ved de fremstillede koncentrationer (som ovenfor). En analyseplade vil være tilstrækkelig til sera fra 2 individer. Der udføres kun én analyse på en dag.

Til de direkte sammenligninger kræves der 3 ELISA-assaysæt til at vurdere 6 par IFX-spiked sera. Hurtigtesten vil blive udført i to eksemplarer på lignende måde.

For at vurdere effekten af ​​opbevaring ved -20 oC efterfulgt af fryse-optøning og opbevaring ved 4 oC, vil sera fra to forsøgspersoner blive fremstillet i én koncentration (7 ug/ml), testet frisk og derefter igen 7 dage senere efter opbevaring ved de to temperaturer. Dette vil kun blive udført med ét assay-kit (det, der klarer sig bedst i de sammenlignende undersøgelser, hvis forskelle i kits viser sig).

Analyse Resultatet af MSD-IFX vil blive sammenlignet med resultaterne af Orig-IFX ved at plotte de respektive kurver for koncentrationer og visuelt sammenligne dem for hvert assay. Den procentvise afvigelse for hver koncentration vil blive beregnet. Resultaterne vil også blive sammenlignet på tværs af assays for hver IFX-kilde og derefter sammenlignet resultaterne.