Prenatale en verloskundige blootstelling van moeders en ISlet-autoantilichamen in het vroege leven (PROMISE)

We zullen een prenataal cohort samenstellen waarin het nageslacht een eerstegraads familielid (FDR) heeft met T1D (moeder, vader of volle broer of zus). Om voldoende deelnemers te kunnen inschrijven, voeren we een multicenteronderzoek uit in het Barbara Davis Center for Diabetes (BDC) in Aurora, CO [coördinatiecentrum], het Mt Sinai Hospital in New York, NY, het Joslin Diabetes Center (JDC) in Boston, MA, en Ohio State University (OSU) in Columbus, OH. Deze locaties werden gekozen op basis van een geschiedenis van succesvolle eerdere samenwerkingen, toegang tot grote gevestigde populaties van mensen met T1D (deze centra behoren tot de grootste in de Verenigde Staten met betrekking tot zwangerschapszorg voor vrouwen met T1D, en hebben ook volwassen- en pediatrische klinieken), locatiespecifieke verbindingen met verloskundige praktijken, en een geschiedenis van succesvolle rekrutering in studiecohorten. Naast de vier genoemde studielocaties hebben we nog meer potentiële locaties benaderd om succes bij de werving te garanderen. We hebben een extra potentiële locatie geïdentificeerd aan het Mayo Clinic College of Medicine onder leiding van Yogish Kudva, en deze site is bereid te activeren als de rekrutering in het eerste jaar van de subsidie ​​op de vier locaties niet aan de verwachtingen voldoet. Ons doel is om tijdens deze initiële financieringsperiode een zwangerschapscohort van 800 samen te stellen, en om in fase 2 en 3 nog eens 1.200 in te schrijven (totaal N=2.000).

D. Beschrijving, risico's en rechtvaardiging van procedures en hulpmiddelen voor gegevensverzameling:

Screening- en toestemmingsprocedures: Deelnemers worden gescreend, toestemming gegeven (beschikbaar via papieren en elektronische toestemmingsprocedure) en zullen vragenlijsten invullen via een online database met elektronische enquêtemogelijkheden (REDCap) die HIPAA-compatibel is en overal toegankelijk is met internettoegang. Indien nodig kan REDCap-toegang in de kliniek worden geboden met behulp van een tablet. We hebben het REDCap-databasesysteem met succes gebruikt voor talrijke onderzoeken waarbij enquêtes werden verzameld, en we hebben op grote schaal gebruik gemaakt van online screening- en toestemmingsprocedures in onderzoeken onder volwassenen met T1D (inclusief zwangere vrouwen) tijdens de Covid-19-pandemie. Het onderzoekspersoneel zal beschikbaar zijn om het toestemmingsformulier telefonisch door te nemen met potentiële deelnemers, met behulp van een HIPAA-compatibel videoplatform zoals Zoom, of persoonlijk, afhankelijk van de omstandigheden. Screeningsvragen omvatten de geschiedenis van T1D bij de zwangere vrouw of vader/broer of zus van de foetus, de leeftijd van de moeder en de verloskundige geschiedenis van de zwangere vrouw, inclusief de huidige zwangerschapsdata (datum van de laatste menstruatie, verwachte bevallingsdatum).

Bezoek- en monsterafnameschema: Studiebezoeken en monsterafname (tabel 2) worden gepland op een van de onderzoekslocaties, op één tijdstip voor vaders en op vier tijdstippen voor moeders: eerste trimester (8-<14 weken), tweede trimester (14-<28 weken), derde trimester (28+ weken) en tot 12 weken postpartum. Medische dossiers worden verkregen met behulp van formulieren voor het vrijgeven van medische dossiers voor de zwangerschaps-, bevallings- en postpartumbezoeken, en voor de geboorteakten van de baby's. Alle onderzoekslocaties hebben toegang tot elektronische medische dossiers (EPD) waarmee onderzoekers medische dossiers kunnen verkrijgen voor prenatale zorg en bevalling voor onderzoeksdeelnemers die binnen hun ziekenhuisnetwerk leveren, en alle locaties beschikken over protocollen en hebben ervaring met het verkrijgen van gegevens van externe faciliteiten met behulp van formulieren voor het vrijgeven van medische dossiers. Bij het BDC-coördinatiecentrum hebben we eerder medische gegevens verzameld over zwangerschaps-, bevallings- en geboortegegevens van kinderen en deze gegevens samengevat in REDCap-databases. Voor dit onderzoek zullen we onze vastgestelde procedures voor het abstracteren van verloskundige en pasgeboren gegevens volgen. De maternale en foetale uitkomsten van vrouwen die in dit onderzoek zijn opgenomen en die aan BDC-aanbieders worden gerapporteerd, zullen worden verkregen door handmatige beoordeling van EPD-grafieken. Ziekenhuisopnames van moeders en foetussen in elk ziekenhuissysteem dat EPIC gebruikt en voor wie patiënten het delen van gegevens autoriseren, kunnen worden bekeken via de interoperabele deeltool van EPICS genaamd Care Everywhere. Handmatige beoordeling van gegevens zal worden gebruikt om specifieke uitkomstmaten te verkrijgen.

Alle gegevens zullen worden verzameld en verzameld in het Barbara Davis Center, om de kwaliteitscontrolenormen te handhaven en de training van en het toezicht op het personeel te stroomlijnen.

Zwangerschapsbezoeken: Zwangere vrouwen die in aanmerking komen voor het onderzoek worden, indien mogelijk, in het eerste trimester (vóór de zwangerschapsduur van 14 weken) ingeschreven, maar na de zwangerschapsduur van 8 weken om de kans op vroegtijdig zwangerschapsverlies na inschrijving te verminderen. Vaders worden op hetzelfde moment ingeschreven en worden gevraagd om hun studiebezoek (inclusief een bloedmonster van maximaal 33 ml of 2 1/4 eetlepels bloed) af te ronden op hetzelfde moment als het eerste zwangerschapsbezoek van de vrouw, of helemaal niet mogelijk. Vrouwen die zich al in het tweede trimester bevinden (tot 24 weken) wanneer ze worden benaderd voor het onderzoek, worden ingeschreven en zullen de bezoeken aan het tweede en derde trimester en het postpartumbezoek voltooien. Gegevens over routinematige zwangerschapsbezoeken, waaronder gewicht en bloeddruk, worden verzameld in de kliniek of uit het medisch dossier. Gegevens over routinematige zwangerschapsbezoeken, waaronder gewicht en bloeddruk, routinematige laboratoriumtests (inclusief HbA1c voor vrouwen met T1D, lipiden, enz.) worden verzameld in de kliniek of uit het medisch dossier. De timing en procedures van de studiebezoeken worden weergegeven in Tabel 3 hieronder.

Monsterverzameling: Er worden monsters verzameld bij elk onderzoeksbezoek op de deelnemende klinieklocatie. Externe centra sturen alle monsters naar het BDC voor opslag. Het verzamelen van monsters wordt gestandaardiseerd in onze Manual of Operations om een ​​consistente verzameling op alle locaties te garanderen. Verder zijn de monsterverzameling, timing en typen zorgvuldig ontworpen om vergelijkbaar te zijn met de verzameling die in bestaande cohorten is voltooid, in het bijzonder het ENDIA-onderzoek, om vergelijking van resultaten tussen onderzoeken mogelijk te maken. De timing van trimester- en postpartumbezoeken wordt echter bepaald door de zorgstandaard in onze klinieken en komt mogelijk niet precies overeen met het ENDIA-onderzoek. Vrouwen voltooien bijvoorbeeld doorgaans een postpartumbezoek in onze klinische centra na 4 tot 6 weken. Daarom plannen we onze postpartumgegevens en monsterafname op hetzelfde tijdstip, om de last voor de deelnemers tot een minimum te beperken. In het ENDIA-onderzoek ondergingen moeders een postpartumbezoek na 3 maanden.

Via aderlating wordt een monster van maximaal 33 ml of 2 ¼ eetlepels bloed verkregen. Plasma wordt verzameld in EDTA-buizen, op ijs bewaard en gescheiden door centrifugatie. Het serum wordt verzameld in serumscheidingsbuizen met gel en gescheiden door centrifugatie nadat het is gaan stollen. Serum en plasma worden verdeeld in cryovials van 2 ml en bewaard bij -80° C. Buffy coats worden bij elk bezoek bewaard voor toekomstig DNA- en methyleringsonderzoek. Bloed-RNA-monsters zullen worden verzameld met behulp van Tempus™-buizen, die stabilisatie en isolatie van totaal RNA uit volbloed mogelijk maken voor analyse van genexpressie. Deze monsters kunnen maximaal vijf dagen bij kamertemperatuur worden bewaard en vervolgens bij 4 °C worden ingevroren. Optionele vaginale uitstrijkjes kunnen door de deelnemers zelf worden verzameld met behulp van een CultureSwab-transportsysteem. Optionele ontlastingsmonsters worden door de deelnemers zelf verzameld met behulp van een in de handel verkrijgbare ontlastingsverzamelingskit zoals de OMNIgene_GUT.

Verzameling van vragenlijsten: Deelnemers wordt gevraagd om voor elk bezoek online vragenlijsten in te vullen met behulp van het REDCap-databaseprogramma, om de tijd die nodig is voor het voltooien van de persoonlijke afspraken voor studiedeelnemers die bezoeken aan de klinieken voltooien, te verkorten en om de procedures voor het verzamelen/invoeren van gegevens te stroomlijnen en de fouten bij het invoeren van gegevens. De vragenlijsten omvatten de inname via de voeding met behulp van een gevalideerde vragenlijst over de voedselfrequentie43, tabak en alcohol met behulp van gevalideerde vragenlijsten44,45, en we zullen screeningvragenlijsten verzamelen die betrekking hebben op algemene [Patient Health Questionnaire-8]46 en perinatale [Edinburgh Postnatal Depression Scale]47 depressie. Vrouwen die positief screenen (een PHQ8-score van 14 of hoger, of een Edinburgh Postnatale Depressie-score van 10 of hoger) op een van deze vragenlijsten, worden voor verdere evaluatie doorverwezen naar hun vaste zorgverlener.

Onder moeders en vaders met T1D zullen beoordelingen van de T1D-distress scale (T1-DDS), diabetes-zelfmanagement en hypoglykemie-angst worden beoordeeld met behulp van gevalideerde instrumenten. Vaders met T1D zullen de vragenlijsten tijdens één bezoek invullen, terwijl moeders met T1D gevraagd zullen worden deze vragenlijsten bij elk studiebezoek in te vullen (eenmaal per trimester en postpartum). Gegevens over diabeteszorg, inclusief HbA1cs en andere laboratoriumtests (lipiden, albumine-creatinine-ratio in urine, serumcreatinine), retinopathie-onderzoeken en onderzoeksgegevens zullen worden opgevraagd voor het jaar voorafgaand aan de inschrijving voor het bepalen van complicaties en glykemische controle.

Zwangerschapsgeschiedenis en uitkomsten: We verzamelen gegevens over de maternale en foetale uitkomsten van de zwangerschap met medische dossiers; we verkrijgen de zwangerschapsduur bij de bevalling, het geboortegewicht van het kind, complicaties bij de bevalling en de maternale en foetale uitkomsten door gegevens op te vragen voor elke ziekenhuisopname voor bevalling en bevalling. Als back-up voor deze ziekenhuisdossiers en voor het geval we geen toegang hebben tot medische dossiers (bijvoorbeeld als een vrouw buiten ons gebied voor elektronische medische dossiers verhuist en we geen dossiers kunnen verkrijgen met behulp van een vrijgave van medische dossiers), verzamelen we dezelfde gegevens met behulp van een enquête die we hebben ontwikkeld voor een van onze eerdere zwangerschapsonderzoeken. Er wordt gevraagd naar de bevallingsdatum, de zwangerschapsduur, het geboortegewicht en de geboortelengte van het kind, de levensstatus van het kind, het geslacht van het kind, vroeggeboorte, het type bevalling, 16 specifieke zwangerschapscomplicaties, 15 specifieke arbeidscomplicaties, 5 specifieke neonatale complicaties en opname in het ziekenhuis. neonatale intensive care-afdeling (NICU). Tijdens het postpartumbezoek worden de borstvoedingspraktijken verzameld. We zullen ook gegevens verzamelen via een medisch dossieronderzoek voor gezondheidsinformatie voorafgaand aan de zwangerschap voor vrouwen met T1D (bloeddruk, nierfunctie, retinopathie, lengte en gewicht). We zullen de zwangerschapsdatering verifiëren door gegevens te verkrijgen van echo's die zijn uitgevoerd voor datering.

Glykemische factoren bij vrouwen met type 1 diabetes: HbA1c- en glucosewaarden (downloads van CGM en glucosemeter), huidige insulinedosering en insulinetoedieningsmethode worden verzameld tijdens routinematige zwangerschapsbezoeken en zullen worden verzameld uit het medisch dossier. We zullen ook toegang krijgen tot gegevens die zijn gedownload van CGM-apparaten (voor vrouwen die regelmatig een CGM gebruiken) tijdens routinematige zwangerschapsbezoeken om indices van glycemische variabiliteit te evalueren, zoals de tijd doorgebracht in relevante glucosebereiken (tijd binnen bereik: 63-140 mg/dL [zwangerschap ] en 70-180 mg/dl [postpartum], hypoglykemie: <63 mg/dl [zwangerschap] en <70 mg/dl [postpartum], en hyperglykemie: >140 mg/dl [zwangerschap] en >180 mg/dl [postpartum]50, variatiecoëfficiënt en SD).

Verzameling van navelstrengbloed en ontlasting: Het verzamelen van navelstrengbloed tot 20 ml krijgt prioriteit, omdat dit een ideaal monster is voor het onderzoeken van de DNA-methylatie bij het kind bij de geboorte en vóór blootstelling aan de buitenomgeving, inclusief borstvoeding of flesvoeding, blootstelling aan microben en andere omgevingsfactoren, in tegenstelling tot latere monsters die tijdens het vroege leven werden verkregen. Het verzamelen van navelstrengbloed is in onze eerdere onderzoeken tot stand gekomen via overeenkomsten met screeningsziekenhuizen en door het gebruik van navelstrengbloedafnamekits die naar de moeder zijn gestuurd voor het verkrijgen en terugsturen van de monsters. Aangezien vrouwen in dit cohort in een willekeurig aantal ziekenhuizen op nationaal niveau zullen bevallen, zijn we van plan om navelstrengbloedafnamekits naar de zwangere moeders te sturen/te geven met gedetailleerde instructies voor het verzamelen en retourneren van de monsters, volgens ons vastgestelde protocol. In het geval dat navelstrengbloedafname niet mogelijk is, leveren wij een kit mee waarmee u zo snel mogelijk na de geboorte (bij voorkeur binnen een week na de bevalling) een hielprikmonster van maximaal 1 ml bloed kunt afnemen. We zijn ook van plan om vrouwen ontlastingspakketten te geven voor het verzamelen van een ontlasting/meconiummonster kort na de bevalling.

Screening op genotypen met een hoog risico onder de nakomelingen: pasgeborenen zullen bij de geboorte worden gescreend op het genetische risico op T1D met behulp van gedroogde bloedvlekken die in de eerste levensweek zijn verkregen. Er zullen monsters naar het laboratorium van Dr. William Hagopian worden gestuurd voor bepaling van de genetische risicoscore 2 (GRS2), een panel van 67 single nucleotide polymorphisms (SNPs) waarvan is aangetoond dat ze het risico op T1D onderscheiden, vooral voor T1D met vroege aanvang. (AUC 0,96)1. Hoog-risico menselijke leukocytenantigeen (HLA) genotypen zijn sterk geassocieerd met IA- en T1D-risico, maar het gebruik van GRS2 is bijna twee keer zo efficiënt gebleken als alleen screening op hoog-risico HLA-genotype. Het gebruik van deze risicoscore is voorgesteld als een efficiëntere methode voor screening van pasgeborenen, waardoor de kinderen met het hoogste risico op het ontwikkelen van IA en T1D nauwer kunnen worden gevolgd, vooral in de vroege kinderjaren. Alle bezoeken en procedures voor de nakomelingen worden weergegeven in Tabel 4.

Gebaseerd op gegevens uit de TEDDY-studie, identificeerde een GRS2 die een risico met zich meebrengt dat gelijk is aan het 90e percentiel in de algemene bevolking, 23% van de TEDDY-deelnemers met een FDR als hoog risico, vergeleken met 10% van de algemene bevolking. Gegeven dat TEDDY-deelnemers met een FDR werden geselecteerd op basis van hun HLA-genotype met hoog risico, schatten we dat het percentage dat op basis van de GRS2-score als hoog-risico wordt geïdentificeerd in dit voorgestelde prenatale cohort (waar alle FDR's zullen worden ingeschreven, ongeacht het HLA-risico) enigszins zal zijn. lager dan het percentage waargenomen in TEDDY. Daarom schatten we dat ~20% van de FDR-nakomelingen in het voorgestelde zwangerschapscohort als een hoog risico zal worden geïdentificeerd en nauwlettender zal worden gevolgd dan degenen met een laag risico.

Bij kinderen met het hoogste risico op de GRS2 (bijvoorbeeld een risico hoger dan het equivalent van 90% van de risicoscores van de algemene bevolking) wordt tot en met de leeftijd van 2 jaar elke zes maanden bloed afgenomen voor IA-screening en opslag van genetische markers, en vervolgens tussen 5 en 6 jaar. jaar.

Bij kinderen met een laag risico op GRS2 wordt bloed afgenomen voor IA-screening op de leeftijd van 2 jaar en tussen de 5 en 6 jaar. HLA-genotypering en IA-testen zullen worden uitgevoerd in het Clinical Immunology Lab op de BDC (NIH/NIDDK aangewezen als North American Autoantibody/HLA Core), zoals eerder gerapporteerd40. Andere bloedmonsters zullen worden bewaard voor case-control studies van DNA-methylatie, Virscan en toekomstige metabolomische/proteomische markers.

Groei en gezondheid van baby's: Gegevens over de groei van baby's zullen worden verkregen door zelfrapportage van ouders via REDCap-enquêtes en via verzoeken om medische dossiers voor pediatrische dossiers. Er zullen vaccinatiegegevens worden verkregen. Elke 6 maanden tot de leeftijd van 2 jaar worden tijdens het kliniekbezoek klinische metingen (inclusief het verzamelen van maximaal 20 ml of iets meer dan een eetlepel bloed), ziekten en voedingspraktijken voor baby's/kinderen verzameld bij de risicogroep; deze gegevens zullen worden verzameld door een REDCap-vragenlijst voor de laagrisicogroep.

Beoordeling van eiland-auto-antilichamen: De belangrijkste uitkomstmaat van het totale onderzoek (alle fasen) zal de aanhoudende positiviteit voor eiland-auto-antilichamen (IA) bij het kind zijn. Er zullen serummonsters worden verkregen voor het meten van vier auto-antilichamen op eilandjes bij nakomelingen met een hoog genetisch risico op 6, 12, 18, 24 maanden en op 5-6 jaar. De nakomelingen met een laag genetisch risico zullen worden getest op de leeftijd van 24 maanden en 5-6 jaar. Er worden monsters verzameld, verwerkt en vanaf de externe locaties naar het BDC gestuurd voor het meten van IA's. Het serum wordt tot de analyse bij -70°C bewaard. Een frequentere controle op IA bij nakomelingen met een hoog risico is nodig omdat IA al in het eerste levensjaar kan optreden en T1D vaker op jongere leeftijd wordt gediagnosticeerd. Daarom zijn we van plan om zowel IA als de evolutie van dysglycemie (stadium 2 T1D) te monitoren, zoals hieronder beschreven.

IA-tests zullen worden uitgevoerd op gecodeerde monsters voor IAA, GADA, IA-2A en ZnT8A in het Barbara Davis Center Core Autoantibody Laboratory, onder leiding van Liping Yu, MD. Dit laboratorium is CLIA-gecertificeerd en CAP-geaccrediteerd en is aangewezen als een NIH/NIDDK North American Autoantibody/HLA Core Laboratory. De afgelopen decennia heeft het autoantilichaamlaboratorium van het Barbara Davis Center een aantal grote klinische onderzoeken naar T1D uitgevoerd, waaronder de TEDDY-studie, TrialNet, DPT-1, T1DGC, ITN en andere. De tests voor GAD65 en IA-2 zijn onlangs geharmoniseerd in samenwerking met het NIH/NIDDK Diabetes Autoantibody Harmonizing Committee, waarbij gebruik wordt gemaakt van een standaard testprotocol met een gemeenschappelijke antilichaameenheid, uitgedrukt als DK-eenheden/ml (NIDDK-eenheden). Dit maakte het mogelijk dat de resultaten van auto-antilichamentests vergelijkbaar waren tussen alle lopende nationale/internationale onderzoeken tussen verschillende laboratoria over de hele wereld. De Autoantibody/HLA Core Facility van BDC is een van de drie internationale laboratoria die helpen deze geharmoniseerde testprotocollen te verwezenlijken. Alle positieve monsters en 5% van de negatieve monsters zullen een geblindeerde dubbele test ondergaan. IA wordt gedefinieerd als positiviteit voor ten minste één van de vier auto-antilichamen op de eilandjes bij ≥2 opeenvolgende bezoeken, of een enkele positieve test gevolgd door de diagnose T1D. Kinderen met een eerste positieve auto-antilichaamtest wordt gevraagd zo snel mogelijk na de eerste test terug te komen voor een bevestigingstest.

Controle op dysglycemie: Gezinnen zullen worden voorgelicht over de tekenen en symptomen van T1D en zullen worden geïnstrueerd om contact op te nemen met het onderzoekspersoneel om eventuele zorgen of vragen over mogelijke tekenen en/of symptomen bij hun kinderen te melden. Families van kinderen die IA ontwikkelen, zullen toegang krijgen tot het ASK-onderzoeksteam, ervan uitgaande dat de financiering voor dit onderzoek nog steeds actief is, voor deelname aan het ASK-vervolgonderzoek voor onderwijs, monitoring en ondersteuning, inclusief educatief materiaal om de risicofactoren die verband houden met het eilandje uit te leggen. auto-antilichaamstatus, herhaald testen van auto-antilichamen en HbA1c elke drie tot zes maanden om de progressie te controleren, voorzien van een gratis glucometer, strips en training. Elke 3 tot 6 maanden kan er gratis een continue glucosemonitor worden verstrekt. Daarnaast zal het nationale monitoringprogramma ASK the Experts, ook gefinancierd door Helmsley Charitable Trust, beschikbaar zijn voor gezinnen die lokale zorgverleners of pediatrische endocrinologen hebben die kunnen samenwerken met het ASK the Experts-team van het Barbara Davis Center voor onderwijs, monitoring en ondersteuning. Als de ASK/ASK the Experts-onderzoeken niet langer worden gefinancierd, zal dezelfde voorlichting en ondersteuning worden geboden via deze onderzoeksprotocollen, inclusief meting van HbA1c elke drie tot zes maanden en gratis glucometer, glucosestrips en training.

Beoordeling van virale blootstelling: Blootstelling aan virussen zal longitudinaal worden beoordeeld bij moeders en nakomelingen met behulp van de Virscan-test. Voor de analyse van de initiële studieperiode van drie jaar zullen serummonsters van bezoeken tijdens elk trimester van de zwangerschap en postpartum, evenals die welke na zes levensmaanden zijn verzameld bij geselecteerde kinderen met een hoog risico (zoals beschreven in het data-analyseplan), worden getest op het Virscan panvirale serologische surveillance-instrument. Dit platform is gebaseerd op faag-immunoprecipitatiesequencing (PhIP-seq)-technologie die gebruik maakt van een bacteriofasebibliotheek die proteoombrede peptiden van menspathogene virussen bevat. De Virscan-bibliotheek bevat peptiden die de meeste bekende pathogene, menselijke virussen vertegenwoordigen (~ 400 soorten en stammen), evenals andere antigenen die zijn vermeld in de Immune Epitope Database van het National Institute of Allergy and Infectious Diseases (www.iedb.org). Het doel van het onderzoek op langere termijn, zodra alle fasen zijn voltooid en voldoende nakomelingen IA hebben ontwikkeld, is het uitvoeren van een patiënt-controleonderzoek naar de virale blootstelling bij moeders en nakomelingen onder degenen die IA hebben ontwikkeld versus leeftijd en HLA-gematchte controlegroep. nakomelingen die geen IA hebben ontwikkeld.

Om de serologische screening uit te voeren, worden serummonsters gemengd met de bibliotheek, waardoor antilichamen kunnen binden met pathogeenspecifieke epitopen die op het faagoppervlak worden weergegeven. De bacteriofaag-antilichaamcomplexen worden vervolgens immunologisch neergeslagen en het faag-DNA-gebied dat codeert voor de kunstmatig tot expressie gebrachte peptide-antigenen waaraan een antilichaam was gebonden, wordt gesequenced door NGS om het repertoire van antivirale antilichamen in een bepaald serummonster te onthullen. Gegevensanalyse om antilichamen tegen een breed scala aan pathogenen te detecteren, is afhankelijk van statistische beoordeling (p-waarden) van de relatieve verrijking van pathogeenspecifieke peptiden in serumspecimens. De resulterende gegevens zijn daarom kwalitatief van aard en zijn niet direct vergelijkbaar met antilichaamtiters die kunnen worden verkregen met conventionele, singleplex-serologische methoden.

Epigenetische en genexpressiestudies: DNA-methylatie zal worden gemeten in perifeer volbloed van de moeder en genexpressie (RNA) zal worden gemeten in volbloed-RNA-monsters verzameld tijdens de zwangerschap en postpartum, en in volbloed- en RNA-monsters van nakomelingen verzameld in het vroege leven vóór de bevalling. de ontwikkeling van IA. Metingen van DNA-methylatie en genexpressie zullen in de eerste drie jaar van het onderzoek worden vergeleken in navelstrengbloed van nakomelingen van moeders met T1D (n=86) vergeleken met nakomelingen die een vader hebben met T1D maar een moeder zonder diabetes (N=86). in een case-control design dat afgestemd was op de leeftijd van de moeder en het HLA-risico. Het doel van de analyse op langere termijn, zodra alle fasen zijn voltooid, is het onderzoeken van epigenetische veranderingen en genexpressie in een case-control studieontwerp, waarbij IA-gevallen worden geselecteerd uit zuigelingen die aanhoudend IA-positief zijn, en uit controles die overeenkomen op basis van leeftijd en HLA-risico. . Methylatiekwantificering zal worden uitgevoerd met behulp van de Infinium HumanMethylation450K Beadchip ("450 K") en de Infinium MethylationEPIC Beadchip ("EPIC") zoals eerder beschreven . De Anschutz Medical Campus van de Universiteit van Colorado herbergt een ultramoderne faciliteit en heeft een RNA Bioscience Initiative gelanceerd (https://medschool.cuanschutz.edu/rbi) met als doel een 'vloeibare pijplijn te bieden van fundamenteel tot klinisch RNA-onderzoek op de Anschutz Medical Campus' door het combineren van RNA-testen en informaticabronnen.