Czynniki blokujące TNF i IL23 Współczynniki ekspresji genów w badaniu łuszczycowego zapalenia stawów Synovium_(TIGERS) (TIGERS)

STRESZCZENIE BADANIA 1.1 Uzasadnienie Łuszczycowe zapalenie stawów (ŁZS) jest przewlekłą chorobą zapalną, prowadzącą do upośledzenia funkcji, obniżenia jakości życia, chorób współistniejących i zwiększonej śmiertelności. Na szczęście lepsza wiedza na temat mechanizmów chorobowych umożliwiła szybki rozwój skutecznych terapii celowanych na tę chorobę. PsA jest klinicznie heterogenną chorobą. Nadal nie są zrozumiałe powiązania między objawami klinicznymi, aktywnością choroby, ciężkością choroby a wzorami molekularnymi przyczepów ścięgnistych/maziówki. Ponadto, chociaż obecnie dostępnych jest wiele metod leczenia ukierunkowanych na różne cząsteczki lub cytokiny, klinicyści nadal napotykają trudności w wyborze leczenia ze względu na brak wiarygodnych markerów poprawiających stratyfikację pacjentów. W niniejszym projekcie chcemy skorzystać z naszej wiedzy w tej dziedzinie, aby porównać globalne profile molekularne regulowane w górę lub w dół w zapaleniu błony maziowej pacjentów z ŁZS opornym na konwencjonalne syntetyczne leki przeciwreumatyczne modyfikujące przebieg choroby (csDMARD), przed i po podawanie terapii celowanych w celu identyfikacji markerów molekularnych związanych z odpowiedzią na terapię. To może pozwolić nam pójść dalej w kierunku medycyny precyzyjnej.

1.2 Cel badania Zamierzamy ocenić globalne efekty transkryptomiczne ustekinumabu (bloker IL-12/IL-23/p40) i guselkumabu (bloker IL-23/p19) w biopsjach błony maziowej pobranych od chorych na PsA opornych na csDMARD, nieleczonych biologicznie , uzyskanych przed i 24 tygodnie po rozpoczęciu terapii. Równolegle wykonywane będą biopsje błony maziowej przed i po rozpoczęciu podawania adalimumabu (szeroko stosowanego blokera TNFα) w celu oceny różnych szlaków molekularnych, na które wpływają różne leki. W celu realizacji projekt ten będzie oparty na wykorzystaniu platformy Affymetrix (układy GeneChip HGU133 Plus2.0). My i inni obszernie wykazaliśmy moc tego podejścia analitycznego w identyfikowaniu szlaków maziowych związanych z aktywnością choroby i odpowiedzią na terapię w przeszłości (co zaowocowało opracowaniem komercyjnego zestawu diagnostycznego i teranostycznego). Jednak materiał zebrany w trakcie badania będzie wyjątkową okazją do przeprowadzenia bardziej odkrywczej procedury RNASeq pojedynczej komórki na naszych próbkach, potencjalnie odkrywając w ten sposób molekularne skutki terapii w określonych populacjach komórek. Identyfikacja wpływu tych terapii na błonę maziową w łuszczycowym zapaleniu stawów będzie krokiem naprzód w zrozumieniu nie tylko sposobu działania leku w miejscu zapalenia, ale także identyfikacji wzorców molekularnych związanych z dobrą odpowiedzią na terapię. Główną zaletą naszego podejścia w porównaniu z innymi badaniami biomarkerów jest to, że używamy materiału maziowego jako takiego, a nie krwi obwodowej, która jest bardziej odległą lokalizacją pod względem komórkowych celów leku. Projekt ten wykorzystuje nasze bogate doświadczenie w zakresie profilowania molekularnego biopsji błony maziowej oraz oceny odpowiedzi na czynniki biologiczne. Kluczem do sukcesu naszego podejścia translacyjnego jest połączenie niezawodnych technik molekularnych z dobrze potwierdzoną kliniczną oceną aktywności choroby i odpowiedzi na terapię, przy użyciu panelu technik klinicznych, biologicznych i obrazowania.

1.3 Projekt badania Dwuośrodkowe, 24-tygodniowe, otwarte, randomizowane badanie z udziałem pacjentów z klinicznie czynnym łuszczycowym zapaleniem stawów obwodowych, leczonych odpowiednimi lekami. Biopsje błony maziowej będą pobierane od pacjentów przed i po 24 tygodniach leczenia różnymi lekami.

1.4 Populacja badana Oporni na DMARD, nieleczeni biologicznie pacjenci z rozpoznaniem łuszczycowego zapalenia stawów zgodnie z kryteriami CASPAR, z co najmniej jednym obrzękiem stawu (małego lub dużego stawu), którzy planują otrzymać leczenie jednym z leków docelowych. Łącznie objętych zostanie 36 pacjentów. Pacjenci zostaną losowo przydzieleni w stosunku 1:1:1 do: Grupa 1 (n=12): ustekinumab 45 mg (lub 90 mg dla pacjentów > 100 kg) podskórnie na początku badania (T0), 4 tygodnie później (T4) i co 12 tygodni do 24 tygodnia (tj. W0, W4 i W16). Grupa 2 (n=12): guselkumab 100 mg podskórnie (niezależnie od masy ciała pacjenta) w tygodniach 0 i 4, a następnie dawka podtrzymująca co 8 tygodni do tygodnia 24 (tj. W0, W4, W12 i W20). Grupa 3 (n=12): adalimumab 40 mg (niezależnie od masy ciała pacjenta), podskórnie co drugi tydzień, zaczynając od wizyty początkowej do 24. tygodnia (tj. T0, T2, T4, T6, T8, T10, T12, T14 , W16, W18, W20 i W22).

1.5 Procedura biopsji błony maziowej Biopsje błony maziowej zostaną pobrane za pomocą biopsji pod kontrolą ultrasonografii (USGB) w przypadku małych stawów (nadgarstka, MCP, PIP) lub dużych stawów (łokieć, kolano, kostka) lub za pomocą artroskopii igłowej (NAP) w przypadku dużych stawów jak kolano.

W przypadku zajęcia dużego stawu, ten sam staw zostanie poddany biopsji w punktach W0 i W24. Z naszego doświadczenia wynika, że ​​powtórzenie zabiegu w dużym stawie, nawet jeśli nie jest spuchnięte, jest łatwe do osiągnięcia przez NAP.

W przypadku zajęcia małego stawu wybór stawu do biopsji będzie oparty na badaniu ultrasonograficznym (USG). Ocena USG z wynikiem powyżej 2 w skali Graya/Power Doppler (patrz dane dotyczące punktacji USG poniżej w załącznikach) zwiększa ilość stopniowalnej tkanki maziowej po zabiegu oraz jakość RNA wyekstrahowanego z tkanki maziowej.

Jeśli biopsja małego stawu w T0 nie jest zajęta klinicznie i/lub ma niski wynik w skali szarości US/Dopplera mocy niższy o T24, inny mały staw zostanie rozważony do biopsji, jeśli zostanie zaatakowany klinicznie. Jednak w W24 procedura zostanie przeprowadzona najlepiej w tym samym stawie, aby uniknąć stronniczości lub zbyt dużej heterogeniczności w analizach danych.

Dozwolone jest okno nie dłuższe niż 15 dni wokół wizyty wyjściowej (T0) i wizyty T24.

1.6 Główne parametry badania/punkty końcowe

Główne punkty końcowe:

• identyfikacja szlaków molekularnych ukierunkowanych przez ustekinumab, guselkumab w porównaniu z blokadą TNF w biopsjach błony maziowej (całkowitej i pojedynczych komórek) od pacjentów z łuszczycowym zapaleniem stawów z aktywną chorobą pomimo csDMARD, uzyskanych przed i 24 tygodnie po rozpoczęciu terapii.

Drugorzędowe punkty końcowe:

- odpowiedź kliniczna w T24 przy użyciu kryteriów odpowiedzi DAS-44 lub ACR20/50/70.

- identyfikacja potencjalnych markerów/ścieżek błony maziowej związanych z odpowiedzią na leczenie ustekinumabem, guselkumabem i anty-TNFalfa w PsA poprzez korelację sygnałów molekularnych na początku badania z odpowiedzią kliniczną obserwowaną w 24. tygodniu.

- złożone analizy związku między zmianami molekularnymi indukowanymi przez anty-IL23, anty-IL23/12 i anty-TNF w błonie maziowej a zmiennymi podstawowymi lub niepodstawowymi (klinicznymi, biologicznymi, obrazowymi) informującymi o odpowiedzi na terapię.

1.7 Kliniczna ocena aktywności choroby Aktywność choroby zostanie oceniona podczas badania przesiewowego, na początku badania (tydzień 0), w 6., 12., 18. i 24. tygodniu. Odpowiedź na terapię będzie oceniana w tym samym czasie przy użyciu zwalidowanych klinicznych wskaźników aktywności chorób stawów, przyczepów ścięgnistych i skóry oraz kwestionariuszy ogólnej oceny stanu zdrowia.

1.8 Analizy laboratoryjne Analiza biochemiczna zostanie przeprowadzona podczas każdej wizyty (T0, T6, T12, T18, T24). Obejmuje to białko C-reaktywne, enzymy wątrobowe (GOT, GPT, GGT, Alk. Fosfataza), czynność nerek (mocznik, kreatynina, przesączanie kłębuszkowe), hemogram, glikemia, profil lipidowy (cholesterol całkowity, LDL, HDL, trójglicerydy).

Status HLA-B27 i infekcji wirusowej (zapalenie wątroby typu B i C, HIV) zostanie sprawdzony podczas badania przesiewowego lub na początku badania, a także test skórny PPD lub test ilościowy TB GOLD krwi.

Próbki krwi (surowica, osocze, EDTA, probówki PaxGene, analiza komórek jednojądrzastych krwi obwodowej (PBMC)) również zostaną pobrane i/lub przechowywane do dalszej analizy. dla obu miejsc) (co najmniej 4 fragmenty biopsji/osobnik) RNA zostanie wyekstrahowany z materiału (co najmniej 4 sztuki) i użyty do hybrydyzacji mikromacierzy nakrapianych oligonukleotydami o dużej gęstości (slajdy Genechip U133 Plus 2.0). Grupowanie i analizy statystyczne zostaną przeprowadzone przy użyciu oprogramowania Genespring® w celu identyfikacji transkryptów regulowanych przez podawanie ustekinumabu, guselkumabu i blokady TNF oraz identyfikacji transkryptów związanych z odpowiedzią na którykolwiek z tych leków. Internetowe narzędzia eksploracji szlaków GO i KEGG zostaną wykorzystane do zidentyfikowania potencjalnych grup genów należących do tej samej rodziny.

Sekwencjonowanie RNA pojedynczych komórek (zostanie wykonane przez zespół UZGhent Site dla obu ośrodków) (2 do 4 biopsji) Jeśli uzyskana zostanie wystarczająca liczba biopsji, analiza pojedynczych komórek zostanie przeprowadzona przez zespół UZG. Sekwencjonowanie RNA pojedynczych komórek stało się niezbędnym narzędziem do analizy heterogeniczności komórek i rozkładu tkanek na typy komórek i/lub stany komórek, co oferuje ogromny potencjał do odkrywania de novo. Atlasy transkryptomiczne pojedynczych komórek zapewniają bezprecedensową rozdzielczość, aby ujawnić złożone zdarzenia komórkowe i pogłębić nasze zrozumienie systemów biologicznych.

Histologia / Immunohistochemia (od 2 do 4 biopsji zostanie wykonanych przez ośrodek CUSL) Jeśli jest wystarczająca ilość tkanki, część próbek (2 biopsje) zostanie wykorzystana do badań patologicznych i standardowej immunohistochemii (CD3, CD4, CD8, CD15, CD20, CD68 i immunobarwienie CD138). Dodatkowe barwienie zostanie wykonane w celu potwierdzenia wyników transkryptomicznych lub na podstawie wcześniej ustalonych pytań (markery swoiste dla Th1, Th17).

1.10 Obrazowanie

• RTG klatki piersiowej RTG klatki piersiowej w projekcji tylno-przedniej zostanie wykonane miejscowo podczas badania przesiewowego, chyba że wynika to z RTG klatki piersiowej wykonanego nie wcześniej niż 3 miesiące przed badaniem (lub wyjściowym) zgodnie z ogólnymi zaleceniami dotyczącymi stosowanie leków biologicznych.

Badanie rentgenowskie klatki piersiowej zostanie sprawdzone przez badacza lub osobę wyznaczoną w celu wykluczenia pacjentów z aktywną infekcją gruźlicy.

Badacze powinni postępować zgodnie z lokalnymi wytycznymi dotyczącymi monitorowania pacjentów w kierunku gruźlicy, jeśli pacjent jest w grupie wysokiego ryzyka zachorowania na gruźlicę lub reaktywacji utajonej gruźlicy

• Ultrasonografia: Równolegle z oceną kliniczną zostanie wykonane badanie ultrasonograficzne układu mięśniowo-szkieletowego (USG) na początku badania (T0), T6, T12 i T24 w celu oceny aktywności choroby, ze szczególnym uwzględnieniem stawów i przyczepów ścięgnistych.

• Obrazowanie metodą rezonansu magnetycznego: Ocena metodą rezonansu magnetycznego całego ciała (WBMRI) zostanie przeprowadzona w dwóch punktach czasowych, przed rozpoczęciem terapii i 24 tygodnie po rozpoczęciu leczenia, jako dodatkowe narzędzie oceny aktywności choroby. Pacjenci z przeciwwskazaniami do MRI (np. rozruszniki serca, klipsy do tętniaków, sztuczne zastawki serca, implanty uszne, fragmenty metali, ciała obce w oczach, skórze lub ciele lub ciężka klaustrofobia) nie będą wykonywane tej procedury. obrzęk i erozja. Obrazy będą analizowane lokalnie. Odczyty skanu będą wykonywane lokalnie.

1.11 Czas trwania studiów Czas trwania studiów: 3 lata

• Okres pokazowy rozpocznie się: grudzień 2019 r

• Szacunkowa data włączenia pierwszego pacjenta (FPI): styczeń 2020 r

• Szacowana data włączenia ostatniego pacjenta (LPI): styczeń 2023 r

• Przewidywana ostatnia wizyta pacjenta (LPLV): czerwiec 2023 r

• Koniec studiów: wrzesień 2023 r

• Podsumowanie publikacji: grudzień 2023 r
• Raport końcowy: październik 2023 r