Dokładność diagnostyczna samodzielnego pobierania próbek w porównaniu z pobieraniem próbek w służbie zdrowia w celu wykrycia koronawirusa-choroby-2019. (COVID-19)

Tło:

Koronawirus 2 zespołu ostrej niewydolności oddechowej (SARS-CoV-2) i wynikająca z niego pandemia COVID-19 nadal stanowią ogólnoświatowy stan zagrożenia zdrowia, skutkujący blokadą w całym kraju.

Zaproponowano, aby strategia otwierania społeczeństwa polegała na szeroko zakrojonych testach.

Złotym standardem prawidłowego wykrywania SARS-CoV-2 jest reakcja łańcuchowa polimerazy z odwrotną transkryptazą (RT-PCR) próbki z górnych dróg oddechowych. Wymaga to jednak zaplecza laboratoryjnego, a badanie jest czasochłonne. Szybkie testy antygenowe oferują prostsze podejście, a wyniki testu są dostępne w ciągu kilku minut. Szczególnie ta ostatnia może potencjalnie prowadzić do szybszego powstrzymania infekcji w społeczeństwie. Jak dotąd próbki do szybkiego testu antygenowego były pobierane głównie z wymazów z jamy nosowo-gardłowej przez przeszkolony personel.

Samodzielne pobieranie wymazów daje możliwość zwiększenia dostępu do badań i umożliwiłoby wykonywanie testów poza systemem ochrony zdrowia. Ponadto pobieranie wymazów we własnym zakresie mogłoby obniżyć ryzyko narażenia pracowników służby zdrowia i zmniejszyć wydatki na środki ochrony indywidualnej, a ponadto zgłasza się, że pobieranie wymazów we własnym zakresie jest preferowaną metodą pobierania próbek. Jednak wymazy pobierane samodzielnie mogą stwarzać problemy związane ze zwiększonym ryzykiem nieprawidłowego pobierania próbek, ponieważ pobieranie próbek odbywa się bez nadzoru, a czułość testów pobieranych samodzielnie w porównaniu z testami pobieranymi przez profesjonalistów została zakwestionowana ze względu na różne wyniki. Badania nad szybkim testem antygenowym i samodzielnie pobieranymi wymazami jako narzędziem przesiewowym są nieliczne.

Celem pracy jest porównanie trafności diagnostycznej samodzielnego testu na SARS-CoV-2 z testem wykonywanym przez przeszkolony personel. Zarówno pobranie we własnym zakresie, jak i pobranie przez przeszkolony personel będą dwoma niezależnymi szybkimi testami antygenowymi SARS-CoV-2 (Standard Q COVID-19 Ag - test, SD Biosensor INC.) poprzez pobranie próbek zarówno z przedniej części nosa, jak i jako część ustna gardła. Dokładność diagnostyczna obu testów antygenowych zostanie ponadto porównana z testem RT-PCR opartym na wymazie z jamy ustnej i gardła.

metoda

Projekt badania:

Projekt jest porównawczym, prospektywnym, randomizowanym badaniem trafności diagnostycznej.

Uczestnicy:

Obywatele, którzy zarezerwowali wizytę i pojawią się na test COVID-19 w Centrum Testowym Valby w regionie stołecznym, mogą wziąć udział w projekcie na zasadzie wolontariatu.

W Danii obywatele są testowani na obecność SARS-CoV-2 za pomocą wymazów z jamy ustnej i gardła, a następnie analizują próbki za pomocą testu RT-PCR. Wyniki wymazów podaje się w ciągu 48 godzin. Procedura pobierania próbek jest wykonywana przez przeszkolony personel. Wymaz z jamy ustnej i gardła to wymaz z migdałków podniebiennych i tylnej ściany gardła badany metodą RT-PCR w kierunku SARS-CoV-2.

Interwencje:

Uczestnicy, oprócz zaplanowanego już wymazu z jamy ustnej i gardła, zostaną przebadani wymazami z przedniej części nosa, które zostaną pobrane samodzielnie i przez przeszkolony personel. Uczestnicy są losowo przydzielani w stosunku 1:1 między kolejnością metody pobierania próbek z przedniej części nosa, odpowiednio pobierania samodzielnego i pobierania przez przeszkolony personel.

Wymazy z przedniej części nosa i jamy ustnej gardła są analizowane szybkim testem antygenowym (Standard Q COVID-19 Ag - test, produkcji SD Biosensor INC.). Wymaz z przedniej części nosa wprowadza się na głębokość około 1 cala/2 cm lub do oporu w obu nozdrzach za pomocą tego samego wymazu i bada się natychmiast po pobraniu zgodnie z instrukcjami producenta. Próbki z jamy ustnej i gardła pobiera się wymazówką z tylnej ściany jamy ustnej i gardła oraz obu migdałków. Próbka ta jest analizowana podobnie jak szybki test antygenowy z przedniej części nosa. Uczestnicy są instruowani w zakresie samodzielnego pobierania próbek za pomocą pisemnych instrukcji i mają możliwość obejrzenia filmu instruktażowego dostępnego za pomocą kodu QR.

Wyniki wymazów będą dostępne w ciągu 15 minut, a uczestnicy będą mogli je zobaczyć w formie elektronicznej.

Uczestnicy są rejestrowani przez personel testowy Regionu w bezpiecznej internetowej bazie danych (REDCap) na miejscu i proszeni o wypełnienie ankiety online dotyczącej informacji na temat ich objawów i statusu szczepień.

Materiał pozostały po testach antygenowych jest następnie umieszczany w oddzielnych probówkach z inaktywującymi wirusami nośnikami transportowymi do konserwacji. SAWszystkie próbki przeznaczone do analizy RT-PCR są wysyłane do ośrodka badawczego na Uniwersytecie Technicznym w Danii (DTU) w celu przeprowadzenia testu SARS-CoV-2 RT-PCR ukierunkowanego na dwa segmenty genu nukleoproteiny. Wyniki analiz są przesyłane drogą elektroniczną do Zakładu Mikrobiologii Klinicznej w Rigshospitalet, który jest odpowiedzialny za interpretację i przekazanie końcowego wyniku uczestnikowi.

Wynik kliniczny:

Badacze zdefiniują uczestnika z dodatnim wynikiem RT-PCR jako zakażonego COVID-19 i będzie to diagnostyczny standard referencyjny do obliczenia dokładności szybkiego testu na antygen pobranego samodzielnie. Kryterium pozytywnego wyniku testu RT-PCR będzie wartość progu cyklu (Ct) poniżej 34 dla co najmniej jednego genu docelowego dla SARS-CoV2. .

Wielkość próbki:

Na podstawie wcześniejszych badań badacze spodziewają się, że pobieranie próbek przez przeszkolony personel będzie miało o 5% wyższą czułość niż pobieranie próbek samodzielnie. Badacze szacują, że próba 1225 uczestników zapewniłaby badaniu 80% mocy przy 5% poziomie istotności. Badacze chcą zatem objąć łącznie 8000 uczestników. Częstość występowania COVID-19 w Danii wynosi obecnie około 9,3%, dlatego badacze spodziewają się około 700 pacjentów z pozytywnym wynikiem na COVID-19.

Sekwencja randomizacji:

Randomizacja jest generowana przez program komputerowy (https://www.sealedenvelope.com/simple-randomiser/v1/lists). Uczestnicy są wybierani losowo podczas rejestracji w blokach po 40 uczestników. Ta tabela z numerami randomizacji jest dostępna tylko dla określonego personelu Oddziału Otorynolaryngologii, Chirurgii Głowy i Szyi oraz Audiologii, Rigshospitalet.

Statystyka:

Badacze chcą obliczyć czułość i swoistość z 95% przedziałem ufności szybkiego testu na antygen pobranego samodzielnie w odniesieniu do szybkiego testu na antygen pobranego przez służbę zdrowia. Szybkość wykrywania SARS-CoV-2 za pomocą dwóch szybkich metod pobierania antygenów zostanie porównana za pomocą testu McNemara. Poziom istotności statystycznej wynosi p < 0,05.

Grupa badawcza:

Grupa badawcza w Klinice Otorynolaryngologii, Chirurgii Głowy i Szyi oraz Audiologii Rigshospitalet, kierowana przez profesora dr n. med. Christiana von Buchwalda, ma już duże doświadczenie w badaniach nad COVID-19, w tym dobrze omówione badanie dotyczące skuteczności maseczek oraz badanie wrażliwości wymazów zbiorczych do samodzielnego pobrania, a także trwające projekty dotyczące zaburzeń węchu i zakażenia COVID-19 wśród personelu szpitali. Grupa badawcza przeprowadziła niedawno duże badanie dotyczące czułości i swoistości szybkiego testu antygenowego z wymazami pobranymi z nosogardzieli. Ten projekt będzie realizowany we współpracy z prywatnym dostawcą, firmą Copenhagen Emergency Medical Services. Prywatny dostawca w Danii firmy SD Biosensor INC., Copenhagen Medical, zapewni szybkie testy antygenowe w celu pobrania szybkich testów antygenowych.

Praktyczne aspekty projektu:

Testcenter Danmark zapewni personel wymagany do pobierania wymazów do testów RT-PCR w swoich ośrodkach testowych w Regionie Stołecznym i stąd dostarczy wyniki.

Ponadto podpisano umowę z firmą Copenhagen Medical, która dostarczy szybki test antygenowy (Standard Q COVID-19 Ag – test, wyprodukowany przez firmę SD Biosensor INC.) do ośrodków badawczych, w których realizowany jest projekt.

Względy etyczne:

Projekt dostarczy niezbędnej wiedzy na temat czułości i swoistości możliwości samodzielnego wykonania testu na obecność COVID-19 za pomocą szybkiego testu antygenowego, jako alternatywy dla testów zbieranych w służbie zdrowia, podczas obecnej pandemii w Europie. Jeśli czułość szybkich testów będzie wysoka i zostanie wdrożone szersze zastosowanie, może to potencjalnie doprowadzić do szybszego powstrzymania zakażenia COVID-19 w społeczeństwie.

Uczestnictwo w projekcie może wiązać się z niewielkim dyskomfortem związanym z pobraniem próbek, ale nie większym niż dyskomfort związany z pobraniem wymazów na COVID-19. Ponieważ pacjenci zarezerwowali już wizytę w celu wykonania testu na COVID-19, oczekuje się, że uczestnicy się z tym zgodzą, a zatem badacze spodziewają się wysokiego wskaźnika uczestnictwa. Nie są znane żadne zagrożenia związane z udziałem w projekcie.

Protokół jest zgodny z Deklaracją Helsińską II. Ponadto projekt jest pozytywnie oceniany przez Komisję Etyki Naukowej.

Rekrutacja uczestników i świadoma zgoda:

Wszyscy pacjenci w wieku powyżej 16 lat, którzy zarezerwowali wizytę na test na COVID-19 w centrach testowych Testcenter Danmark w regionie stołecznym, mogą wziąć udział w projekcie.

Uczestnicy otrzymają ustną i pisemną informację o projekcie, a także pisemną informację o prawach podmiotów. Wyjaśnione zostanie również prawo do przyprowadzenia obrońcy na przesłuchanie informacyjne.

Wywiad informacyjny przeprowadzają pracownicy Regionu Stołecznego. W razie potrzeby pacjentom oferuje się 24-godzinny czas do namysłu przed uzyskaniem pisemnej zgody. Uczestnicy są informowani, że mogą wycofać swoją zgodę w dowolnym momencie bez wpływu na dalsze procesy lub potencjalne leczenie.

Fizyczna i psychiczna integralność pacjentów oraz prywatność:

Każdy uczestnik musi wyrazić pisemną świadomą zgodę przed włączeniem go do badania. Uzyskane informacje o stanie zdrowia uczestników, innych sprawach czysto prywatnych oraz inne informacje poufne objęte są tajemnicą zawodową.

Ponadto pacjenci są objęci ubezpieczeniem zdrowotnym „Lov om klage- og erstatningsadgang”.

Skutki uboczne, ryzyko i wady dla pacjentów:

Procedury wykonywane w projekcie są już wykonywane w wykrywaniu zakażenia COVID-19 i nie wiążą się z żadnym znanym ryzykiem wystąpienia skutków ubocznych. Sam pobór wymazu może wiązać się z pewnym dyskomfortem, dodatkowo istnieje niewielka niedogodność dla pacjentów w postaci czasu, jaki będą musieli poświęcić na badanie. Jednak uczestnikami będą obywatele, którzy już zarezerwowali wizytę na test na COVID-19, w związku z czym oczekuje się, że zgodzą się z dyskomfortem lub czasem oczekiwania.

Informacje kliniczne z dokumentacji pacjentów:

Wiek uczestników, powód rezerwacji wizyty w jednym z ośrodków testowych Testcenter Denmark, a także wyniki testu PCR i szybkiego testu antygenowego będą rejestrowane dla wszystkich uczestników badania.

Koszty operacyjne i warunki finansowe:

Żaden z członków grupy badawczej stojącej za projektem nie ma interesów finansowych w realizacji lub wynikach projektu. Personel testowy, który ma pobierać wymazy do testów RT-PCT, jest częścią personelu Testcenter Danmark i stąd jest opłacany. Szybkie testy antygenowe są udostępniane bezpłatnie przez dystrybutora (Copenhagen Medical), jednak nie odgrywają one żadnej roli w projektowaniu projektu ani interpretacji danych.

Wniosek o dofinansowanie nie jest planowany, ale jeśli mimo to wsparcie finansowe zostanie uzyskane, zostanie ono zdeponowane na koncie fundacji w administracji fundacji w Rigshospitalet, która jest kontrolowana przez szpital.

Komitety ds. Etyki Naukowej zostaną poinformowane, a informacje o uczestnikach zostaną zaktualizowane w przypadku uzyskania finansowania.

Przerwanie eksperymentu:

Próba zostanie przerwana w wyjątkowych okolicznościach, gdy nie będzie możliwe zakończenie eksperymentu. Podobnie nadzwyczajne zdarzenia, które sprawiają, że projekt jest niekompletny w całości, doprowadzą do wycofania się wszystkich uczestników trwających prób.

Perspektywy:

Wiarygodna czułość szybkich testów antygenowych może doprowadzić do szerszego wykorzystania szybkich testów antygenowych w wykrywaniu zakażenia COVID-19 w Danii. Ponieważ czas reakcji szybkich testów antygenowych jest znacznie krótszy niż w przypadku testów PCR, może to potencjalnie prowadzić do szybszego powstrzymania infekcji, a tym samym lepszej okazji do opanowania zakażenia COVID-19 w Danii.