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Um teste de escarro para descartar pneumonia em um estágio inicial (self-test)

19 de agosto de 2017 atualizado por: Fariba Nayeri, University Hospital, Linkoeping
Em pacientes com sintomas clínicos de infecção respiratória, a identificação rápida de casos que requerem antibioticoterapia é crucial para evitar o desenvolvimento de bactérias multirresistentes. A identificação de reagentes locais de fase aguda pode ajudar a avaliar a resposta do hospedeiro à infecção bacteriana no local da lesão. Aqui, os investigadores desenvolveram uma ferramenta de diagnóstico acessível, estável, viável e precisa com base em uma proteína produzida localmente com afinidade de ligação específica para polissacarídeos. Os investigadores avaliaram ainda mais a capacidade da nova tira de teste para descartar pneumonia.

Visão geral do estudo

Status

Concluído

Condições

Intervenção / Tratamento

Descrição detalhada

Uma infecção do trato respiratório inferior é uma situação grave que pode se tornar abruptamente complicada por sepse, insuficiência respiratória, necrose do tecido pulmonar e disfunção de múltiplos órgãos. Portanto, o tratamento antibiótico empírico é comumente iniciado assim que a infecção é suspeitada e as culturas e/ou outros testes diagnósticos são obtidos, representando um dos principais motivos para a prescrição de antibióticos. O uso excessivo e indevido de antibióticos generalizados levou ao surgimento de várias cepas bacterianas resistentes, representando uma grande ameaça à saúde. Existe uma necessidade crítica de soluções práticas para evitar o uso excessivo de antibióticos, especialmente em comunidades onde os antibióticos estão disponíveis sem receita.

Estudos fisiopatológicos mostram que a infecção não resulta apenas do supercrescimento bacteriano ou viral, mas sim da penetração dos microrganismos além do sistema imunológico do hospedeiro. Portanto, a avaliação da infecção requer a investigação tanto da presença do microrganismo quanto dos mecanismos de defesa ativados no organismo do paciente. O supercrescimento de bactérias leva à inflamação do tecido pulmonar, recrutamento de glóbulos brancos para a área infectada e produção e liberação de quimiocinas e citocinas, o que pode fazer com que os alvéolos fiquem cheios de líquido, levando o paciente a desenvolver tosse com catarro ou pus, febre , calafrios e dispnéia.

O diagnóstico microbiológico de infecções do trato respiratório inferior requer a avaliação do microrganismo invasor por exame de escarro usando microscopia, cultura quantitativa e PCR. No entanto, tais investigações microbiológicas têm valor limitado no manejo da pneumonia. A flora polimicrobiana dificulta a interpretação de culturas de pacientes com bronquite crônica. Também é difícil avaliar culturas de pneumonia nosocomial, uma vez que as bactérias patogênicas são frequentemente idênticas às que aparecem na flora da garganta. Pacientes imunossuprimidos freqüentemente produzem escarro contendo baixo número de glóbulos brancos. Os sinais clínicos do paciente, como o estado respiratório e circulatório, são os marcadores mais confiáveis ​​para determinar a eficácia do tratamento.

Na prática, a maioria dos médicos opta por examinar marcadores adicionais nos estágios iniciais para monitorar de perto os efeitos da terapia, particularmente em pacientes de alto risco que foram internados em unidades de terapia intensiva. Marcadores sistêmicos comumente usados ​​incluem temperatura corporal, proteína C reativa (PCR), procalcitonina (PCT) e interleucina 6 (IL-6). A concentração do fator de crescimento de hepatócitos (HGF) supostamente aumenta durante danos aos órgãos, como os causados ​​por doenças infecciosas. Estudos mostram concentrações aumentadas de HGF no soro e no condensado da respiração exalada de pacientes com pneumonia, sendo a presença de HGF significativamente correlacionada com a sobrevida. Além disso, os níveis de HGF diminuem acentuadamente dentro de 48 horas após o início da terapia antibiótica apropriada. Os resultados da ressonância de plasmon de superfície (SPR) indicam que o HGF produzido durante a infecção aguda apresenta alta afinidade para o componente da matriz extracelular proteoglicano sulfato de heparano (HSPG). Esses achados sugerem que a avaliação do HGF no escarro pode ser uma ferramenta para detectar infecção bacteriana no local da lesão.

As proteínas podem ser detectadas com base em sua interação específica com um anticorpo correspondente. No entanto, esse sistema de medição depende de recursos especializados, limitando sua utilidade em centros não equipados ou como autoteste. A metacromasia é uma mudança de cor característica exibida por certos corantes de anilina após a ligação a substâncias cromotrópicas. Este fenômeno tem sido amplamente utilizado em histologia. O azul de metileno (O-Toluidina) é um excelente corante metacromático que muda de azul para rosa quando se liga a polissacarídeos de alto peso molecular, como glicano sulfatado. O corante rosa voltará rapidamente ao azul após a adição de uma quantidade proporcional de uma proteína com alta afinidade ao glicano sulfatado (metacromacia invertida).

Aqui, os investigadores usaram essa abordagem para desenvolver um novo teste de tira - referido aqui como o texto do índice - para avaliar a presença de proteínas de ligação ao sulfato de dextrana no escarro. Os pesquisadores então avaliaram a precisão deste teste de tira para detectar infecção bacteriana no escarro, analisando restos de amostras de escarro que foram enviadas para exame no Departamento de Microbiologia do hospital universitário em Linköping.

Tipo de estudo

Observacional

Inscrição (Real)

467

Contactos e Locais

Esta seção fornece os detalhes de contato para aqueles que conduzem o estudo e informações sobre onde este estudo está sendo realizado.

Locais de estudo

    • Östergotland
      • Linköping, Östergotland, Suécia, 58185
        • Department of Infectious Diseases

Critérios de participação

Os pesquisadores procuram pessoas que se encaixem em uma determinada descrição, chamada de critérios de elegibilidade. Alguns exemplos desses critérios são a condição geral de saúde de uma pessoa ou tratamentos anteriores.

Critérios de elegibilidade

Idades elegíveis para estudo

  • Filho
  • Adulto
  • Adulto mais velho

Aceita Voluntários Saudáveis

Não

Gêneros Elegíveis para o Estudo

Tudo

Método de amostragem

Amostra de Probabilidade

População do estudo

Todos os casos que procuraram as instalações especializadas em saúde do hospital universitário de Linkoeping ou foram admitidos na enfermaria em diferentes clínicas do Hospital Universitário de Linkoeping entre 1º de novembro de 2015 e 30 de janeiro de 2016 devido a suspeita de infecção respiratória e amostras de escarro foram coletadas para cultura no Departamento de Microbiologia do Hospital Universitário em Linkoeping.

Descrição

Critério de inclusão:

  • Amostras de escarro coletadas para diagnóstico de rotina e chegaram ao laboratório em até 12 horas após a coleta e consideradas representativas pela microscopia e mantidas 4-8 C após a cultura.

Critério de exclusão:

  • Amostras não coletadas como acima

Plano de estudo

Esta seção fornece detalhes do plano de estudo, incluindo como o estudo é projetado e o que o estudo está medindo.

Como o estudo é projetado?

Detalhes do projeto

  • Modelos de observação: Coorte
  • Perspectivas de Tempo: Retrospectivo

Coortes e Intervenções

Grupo / Coorte
Intervenção / Tratamento
Escarro restante fresco
Todas as amostras de escarro frescas enviadas ao Departamento de Microbiologia entre 1º de novembro de 2015 e 30 de janeiro de 2016 de acordo com os requisitos padrão para culturas de escarro no laboratório acreditado (ISO 17025 e 15189 a partir de 1993) foram mantidas resfriadas (4-8 ͦC) após análise por microscópio e culturas até ser coletado e codificado pela enfermeira do estudo à noite (amostras que sobraram).
No total, 467 amostras foram coletadas de diferentes clínicas, e os procedimentos diagnósticos e as abordagens terapêuticas eram completamente desconhecidos para o grupo de estudo. As amostras codificadas foram armazenadas a 4-8°C e analisadas dentro de 72 horas após a amostragem usando o teste de escarro. De abril a junho de 2016, um médico e a enfermeira do estudo revisaram os periódicos. A idade, o sexo, o tempo de internação, os sintomas clínicos, as culturas de sangue e escarro e PCR juntamente com os resultados, as radiografias, a antibioticoterapia, o CRB-65 e o código diagnóstico final (CID-10) foram documentado em arquivos Excel.

O que o estudo está medindo?

Medidas de resultados primários

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
Valor preditivo negativo para descartar pneumonia
Prazo: Dentro de dois anos

As amostras de escarro foram coletadas aleatoriamente sem conhecimento sobre o paciente ou o diagnóstico final. Os diagnósticos foram estabelecidos primeiro após a alta do paciente da clínica.

INFECÇÃO RESPIRATÓRIA Pneumonia Os seguintes critérios foram usados ​​para definir o diagnóstico de pneumonia

  1. Sinais e sintomas clínicos
  2. Alterações detectadas por radiografia de tórax recente
  3. Recebeu antibioticoterapia, independentemente do uso prévio de antibióticos.
  4. O diagnóstico final J13-J18-J690 (CID-10). Pneumonia adquirida na comunidade: Os pacientes sem doença respiratória prévia.

Pneumonia adquirida no hospital (Nosocomial): Pacientes (n=11) adquiriram pneumonia no hospital pelo menos 48-72 horas após serem admitidos.

Dentro de dois anos

Medidas de resultados secundários

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
Correlação com a concentração de HGF e S100A8-A9 (Calprotectina) (Elisa) no escarro
Prazo: As amostras foram mantidas congeladas após a amostragem -20 C e depois descongeladas após 4 meses e a análise foi realizada em 1 dia.
Avaliamos as concentrações imunorreativas de HGF humano e calprotectina (heterodímero humano S100A8/S100A9) por ELISA (80 amostras escolhidas aleatoriamente) usando kits ELISA disponíveis comercialmente (Quantikine ELISA; R&D systems, Inc., Minneapolis, MN, EUA). Este método mede HGF e calprotectina em soro, plasma, meios de cultura e outros fluidos biológicos. Amostras de escarro armazenadas a -20°C foram descongeladas e centrifugadas a 1.000 g por 10 minutos antes da análise. A dose mínima detectável (MDD) conforme definida pelo fornecedor para este ensaio foi de 0,04 ng/ml para HGF e 0,086 ng/ml para calprotectina.
As amostras foram mantidas congeladas após a amostragem -20 C e depois descongeladas após 4 meses e a análise foi realizada em 1 dia.
Correlação com a afinidade de ligação às partes da molécula de HGF por ressonância de plasmon de superfície
Prazo: em 47 amostras, a análise pareada de Elisa e SPR foi realizada em amostras mantidas a -20 C dentro de 4 meses após a amostragem.
A análise pareada foi realizada em 47 amostras escolhidas aleatoriamente. As medições e os procedimentos de imobilização do ligante foram conduzidos usando um sistema Biacore 2000 (GE Healthcare Bio-Sciences AB, Uppsala, Suécia). Três ligantes diferentes foram imobilizados em canais separados no chip SPR. Os ligantes eram anticorpos policlonais purificados por afinidade direcionados contra peptídeos de HGF mapeados no terminal N do HGFβ humano (N-19), no terminal N do HGFα humano (N-17) e nos aminoácidos 32-176 do HGFα humano (H -145). Esses ligantes foram diluídos 1:10 em tampão acetato 10 mM (pH 4,5) e imobilizados em chips de dextrano CM5 carboximetilado
em 47 amostras, a análise pareada de Elisa e SPR foi realizada em amostras mantidas a -20 C dentro de 4 meses após a amostragem.

Outras medidas de resultado

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
A rotina de gerenciamento de pneumonia na clínica infecciosa em Linkoeping nas últimas décadas
Prazo: Os dados foram obtidos de jornais impressos de pacientes internados (dezembro a março) no Departamento de Doenças Infecciosas de Linköping em 1970,1980 e 1990
Estudamos os diários de papel arquivados de pacientes que foram admitidos em nossa enfermaria e dispensados ​​com diagnóstico de pneumonia/broncopneumonia, a partir de 1970. Nosso objetivo foi identificar as abordagens diagnósticas que foram usadas no mesmo centro e tiveram impacto no diagnóstico correto de pneumonia. Os pacientes receberam um código dependendo da data de admissão na enfermaria de janeiro a dezembro e foram registrados sob o código em um livro. Os códigos pertencentes a um determinado diagnóstico foram coletados em uma ficha e guardados separadamente em caixas (uma ficha correspondia a um diagnóstico e um ano). Escolhemos aleatoriamente os primeiros 40 casos codificados com diagnóstico de pneumonia (CID-9 código de diagnóstico 486.9) em 1970, 1980 e 1990 e coletamos os jornais impressos e identificamos os critérios para o diagnóstico.
Os dados foram obtidos de jornais impressos de pacientes internados (dezembro a março) no Departamento de Doenças Infecciosas de Linköping em 1970,1980 e 1990

Colaboradores e Investigadores

É aqui que você encontrará pessoas e organizações envolvidas com este estudo.

Patrocinador

Colaboradores

Datas de registro do estudo

Essas datas acompanham o progresso do registro do estudo e os envios de resumo dos resultados para ClinicalTrials.gov. Os registros do estudo e os resultados relatados são revisados ​​pela National Library of Medicine (NLM) para garantir que atendam aos padrões específicos de controle de qualidade antes de serem publicados no site público.

Datas Principais do Estudo

Início do estudo (Real)

1 de novembro de 2015

Conclusão Primária (Real)

5 de fevereiro de 2016

Conclusão do estudo (Real)

1 de abril de 2016

Datas de inscrição no estudo

Enviado pela primeira vez

16 de agosto de 2017

Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ

19 de agosto de 2017

Primeira postagem (Real)

22 de agosto de 2017

Atualizações de registro de estudo

Última Atualização Postada (Real)

22 de agosto de 2017

Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade

19 de agosto de 2017

Última verificação

1 de agosto de 2017

Mais Informações

Termos relacionados a este estudo

Outros números de identificação do estudo

  • Dexact-resp

Plano para dados de participantes individuais (IPD)

Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?

Sim

Descrição do plano IPD

Informações sobre as amostras que foram incluídas nos cálculos estatísticos, casos excluídos com infecção, pneumonia 1970-1980-1990, o custo real dos testes realizados em nosso centro para diagnóstico de pneumonia e os voluntários que aderiram ao teste de viabilidade nas Tabelas A-L

Prazo de Compartilhamento de IPD

Os dados estão disponíveis e aguardando a definição do endereço URL.

Tipo de informação de suporte de compartilhamento de IPD

  • Protocolo de estudo
  • Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE)
  • Relatório de Estudo Clínico (CSR)

Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo

Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA

Não

Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA

Não

Essas informações foram obtidas diretamente do site clinicaltrials.gov sem nenhuma alteração. Se você tiver alguma solicitação para alterar, remover ou atualizar os detalhes do seu estudo, entre em contato com register@clinicaltrials.gov. Assim que uma alteração for implementada em clinicaltrials.gov, ela também será atualizada automaticamente em nosso site .

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