A detecção de HIV-1 resistente a medicamentos em Taiwan

Cepas de HIV resistentes a medicamentos podem se desenvolver durante a terapia antirretroviral, e a transmissão de vírus resistentes a medicamentos foi documentada como possível. O surgimento de resistência aos medicamentos no HIV tem sido associado a uma resposta virológica subótima à terapia antirretroviral [1]. A probabilidade de um paciente adquirir vírus resistente a medicamentos está relacionada à prevalência de resistência a medicamentos na população com comportamentos específicos de alto risco. Nos países ocidentais, estudos sugerem que a prevalência de resistência viral a pelo menos um antirretroviral varia de 6% a 16% em pacientes virgens de tratamento e, entre eles, cerca de 3% a 5% com suscetibilidade reduzida a mais de uma classe [2-4]. No entanto, não há dados que abordem a prevalência de resistência aos medicamentos em várias populações em Taiwan atualmente.

A resistência aos medicamentos pode ser medida usando ensaios de resistência genotípica ou fenotípica. Ensaios genotípicos detectam mutações que causam resistência ao cavado; ensaios fenotípicos são ensaios de suscetibilidade a medicamentos que medem a capacidade in vitro do vírus de crescer na presença de diluições seriadas dos inibidores (ou seja, medicamentos antirretrovirais). Devido ao seu tempo de resposta mais rápido e menor custo, um ensaio genotípico é geralmente preferido ao ensaio fenotípico [5]. O ensaio de resistência genotípica está disponível em três centros de AIDS em Taiwan. No entanto, os métodos utilizados para o teste genotípico são diferentes nos três centros, e esses dados não foram coletados e analisados ​​para conhecer a epidemiologia da resistência do HIV em Taiwan, portanto, a interpretação e aplicação dos resultados do teste de resistência genotípica para seleção de antirretrovirais são bastante questionáveis ​​em Taiwan.

Além disso, embora o ensaio genotípico seja menos direto, existem várias condições para causar a discordância entre genótipo e fenótipo, e a discordância pode resultar na dificuldade de predição do fenótipo a partir do genótipo [6]. Assim, o ensaio fenotípico pode ajudar na interpretação dos resultados dos testes de resistência e fornecer um guia para decidir o regime ideal. Com a disponibilidade de novas classes de antirretrovirais em um futuro próximo, os testes fenotípicos atualmente disponíveis comercialmente usando os vírus recombinantes com inserção de transcriptase reversa e sequências de genes de protease podem não ser suficientes. Será necessário um novo ensaio fenotípico que possa medir a capacidade do vírus crescer nas diferentes concentrações de NRTIs, NNRTIs, IPs, inibidores de entrada, inibidores de CCR5 e inibidores de integrase.

Sabe-se que a carga de HIV-1 no plasma está fortemente correlacionada com a progressão da doença, resposta ao tratamento antiviral e transmissão de mãe para filho. O RNA viral plasmático é mais representativo do pool de vírus em replicação em qualquer ponto do tempo do que o DNA proviral associado à célula. Para estudar a relação do genoma completo do HIV-1 com a resistência fenotípica, optamos por nos concentrar nos vírions plasmáticos. No entanto, para aqueles pacientes cuja carga viral plasmática não é alta o suficiente para realizar esta análise, em vez de usar o DNA proviral dos pacientes de PBMC infectados para análise de resistência fenotípica. Duas estratégias serão utilizadas para amplificar o genoma viral. A primeira será a amplificação de um genoma viral quase completo. Se essa estratégia não funcionar, a segunda estratégia será amplificar dois fragmentos do genoma viral e montar esses dois fragmentos por enzimas de restrição únicas.