"O CD163 solúvel pode discriminar entre indivíduos obesos saudáveis ​​e não saudáveis?" (sCD163)

É reconhecido que a inflamação de baixo grau é um fator chave no desenvolvimento da aterosclerose e resistência à insulina (Haslam, James 2005). Níveis circulantes de marcadores inflamatórios, como proteína C reativa de alta sensibilidade (hsCRP) e interleucina (IL)-6, estão aumentados em indivíduos com doença cardiovascular (DCV) e diabetes tipo 2 (Dandona, Aljada & Bandyopadhyay 2004). Nós e outros mostramos que a obesidade, e em particular a obesidade abdominal, está associada ao aumento persistente do nível de marcadores inflamatórios (Bruun et al. 2007, Christiansen et al. 2010a). Assim, esse baixo grau de inflamação pode representar "o solo comum" para a patogênese da aterosclerose e da resistência à insulina e representar a ligação entre esses distúrbios metabólicos e a obesidade.

Além da função de órgão de armazenamento, o tecido adiposo (TA) exerce um papel complexo no organismo. Na obesidade, o tecido adiposo é infiltrado por uma quantidade aumentada de macrófagos, e particularmente esses macrófagos expressam e liberam uma ampla gama de hormônios e citocinas, coletivamente chamados de adipocinas, cujas funções biológicas mostram envolvimento no metabolismo da glicose, metabolismo lipídico, diferenciação de adipócitos , imunidade, vasculatura e desenvolvimento de neurônios e comportamento alimentar (Trayhurn, Wood 2004).

Entre as adipocinas expressas no AT estão citocinas pró-inflamatórias como TNFα, IL-6, quimiocinas pró-inflamatórias como IL-8, MCP-1, MIP1α, fatores trombóticos como inibidor de plasminogênio 1 (PAI-1) e proteínas específicas do AT como adiponectina e leptina.

Os adipócitos hipertrofiados, como observados em indivíduos obesos e associados à resistência à insulina, mostram uma expressão gênica distinta de marcadores inflamatórios em comparação com pequenos adipócitos humanos e é demonstrado que o tamanho dos adipócitos é um importante determinante da secreção de adipocinas. Além disso, foi encontrada uma associação positiva entre o grau de obesidade e a expressão de citocinas pró-inflamatórias como TNFα, IL-6, IL-8, enquanto uma associação inversa entre adiponectina e obesidade foi relatada (Kern et al. 2003, Bruun et al. 2003). De acordo com essas observações, descobrimos que a expressão AT de MCP-1 foi suprarregulada em indivíduos obesos (Christiansen, Richelsen & Bruun 2005), enquanto a expressão AT de adiponectina em indivíduos obesos (IMC médio 40 kg/m2) foi regulado negativamente com 50% em comparação com indivíduos magros (IMC médio 22 kg/m2) (Christiansen et al. 2010b).

Assim, a inflamação do tecido adiposo resultando em disfunção do tecido adiposo pode ser o fator importante que relaciona a obesidade à resistência à insulina, síndrome metabólica, diabetes e doenças cardiovasculares.

CD163:

O CD-163 é um receptor ligado à membrana expresso primariamente em monócitos e macrófagos. O CD163 foi originalmente descrito como um receptor eliminador de hemoglobina, uma vez que está envolvido na remoção de hemoglobina liberada de glóbulos vermelhos rompidos (Moestrup, Moller 2004). Uma variante solúvel de CD-163 (s-CD-163) está presente no plasma e é elevada em condição patológica, ativando o sistema monócito-macrófago.

Recentemente, o s-CD-163 está associado a várias condições inflamatórias (Moestrup, Moller 2004) e muito recentemente como um forte preditor do desenvolvimento de diabetes tipo 2 em uma grande coorte dinamarquesa (Moller et al. 2011). Assim, o s-CD-163 pode ser um marcador tanto relacionado à inflamação quanto a condições metabólicas, talvez ligando inflamação de baixo grau e anormalidades metabólicas e, além disso, pode ser um marcador do estado obeso com complicações.

Apenas um subconjunto de indivíduos com sobrepeso e obesos desenvolve resistência à insulina, diabetes tipo 2 e doenças relacionadas (Stefan et al. 2008, Bluher 2010). Esses indivíduos obesos "saudáveis" são caracterizados por menos inflamação do tecido adiposo e menos resistência à insulina em comparação com indivíduos obesos não saudáveis. Consequentemente, seria de grande importância desenvolver marcadores ou preditores que pudessem discriminar entre indivíduos obesos "saudáveis" e não saudáveis, a fim de fazer uma melhor seleção para tratamentos mais invasivos, como e. cirurgia, farmacoterapia, etc.

Plano de pesquisa:

1. O CD163 está fisiopatologicamente envolvido na inflamação do tecido adiposo na obesidade? O tecido adiposo (AT) é retirado de várias regiões em indivíduos magros a muito obesos - de biópsias de gordura subcutânea (indivíduos magros), cirurgia (indivíduos obesos - IMC> 30) e de cirurgia bariátrica (bypass gástrico) em indivíduos muito obesos (IMC > 40) - tanto o TA subcutâneo quanto o visceral são investigados paralelamente nos indivíduos muito obesos.

   No tecido adiposo a quantidade de macrófagos será determinada tanto por bioquímica (ex. CD68) e métodos microscópicos (imuno-histoquímica). Além disso, a expressão gênica (PCR) e proteica (Western blot) de CD163 será detectada no AT e relacionada à expressão e proteína de várias outras adipocinas pró-inflamatórias.

2. O s-CD163 é um marcador de inflamação do tecido adiposo e distúrbios metabólicos? Amostras de sangue dos indivíduos no projeto 1 também serão obtidas e s-CD163 medido (kit ELISA sanduíche interno (Moller, Hald & Moestrup 2002)). Esses valores serão relacionados à quantidade de macrófagos no AT e à expressão de CD136 no AT. Além disso, será realizada a sensibilidade à insulina determinada pelo modelo HOMA, e s-CD163 relacionado ao escore HOMA.

3. O s-CD163 é afetado pela perda de peso e mudanças na dieta (por exemplo, o efeito da frutose (pró-inflamatório) e o efeito do resveratrol (antiinflamatório)?

   1. A perda de peso será induzida por cirurgia bariátrica (bypass) em indivíduos muito obesos (IMC > 40). S-CD163 e alterações na sensibilidade à insulina (HOMA) e outros marcadores inflamatórios (por exemplo, hsCRP, IL-6, TNF, MCP-1, adiponectina etc.) serão medidos antes e após 6 e 12 meses após a cirurgia. A partir dos cálculos de poder, planeja-se incluir 45 indivíduos muito obesos neste estudo - metade deles com diabetes tipo 2.
   2. Realizamos investigações dietéticas com frutose (refrigerantes tomados por 6 meses em 50 indivíduos com sobrepeso e obesos) que induz o acúmulo de gordura ectópica no fígado determinado por espectroscopia de ressonância magnética e resistência à insulina, e intervenção dietética com resveratrol que reduz a gordura hepática e tem propriedades antiinflamatórias efeitos. Em amostras de plasma congeladas desses estudos, o s-CD163 será medido para obter informações sobre o efeito dietético da frutose e do resveratrol neste e em marcadores relacionados.