Efeito da Vitamina D como Terapia Adjunta em Pacientes com Tuberculose de Evolução Pulmonar (VitaminD)

Incluiremos 60 pacientes diagnosticados com TBP confirmada com e sem diabetes mellitus, por baciloscopia positiva e cultura para Mycobacterium tuberculosis sensível a drogas de primeira linha (rifampicina, isoniazida, pirazinamida e etambutol), que serão agrupados da seguinte forma: 1 ) pacientes que recebem vitamina D (VD) (n = 30) e 2) pacientes que não recebem vitamina D (NVD) (n = 30) além do tratamento medicamentoso da linha de frente de medicamentos para tuberculose. Amostras de sangue devem ser coletadas mensalmente até o final do tratamento. O grupo de participantes VD receberá tratamento com uma dose diária de Vitamina D 200 Unidades Internacionais (UI) durante os primeiros dois meses de tratamento. Todos os pacientes que participarem devem dar seu consentimento por escrito.

Primeiro, vamos separar as células mononucleares do sangue periférico com o reagente Ficoll. Em seguida, para a determinação das citocinas intracelulares em condições basais e após a estimulação antigênica com M.tuberculosis, será utilizada a técnica de citometria de fluxo e os resultados serão analisados ​​em um citômetro de fluxo. Vamos a células infectadas com cepa de M. tuberculosis em uma multiplicidade de infecção (MOI) de 1 e 10, a fim de determinar a fagocitose e atividade bactericida do sangue total periférico dos pacientes, usando Unidades Formadoras de Colônias (UFC) e coloração. A extração do RNA será realizada de acordo com o fornecedor do kit. A reação de amplificação será realizada com Applied Biosystems e Sybr Green Master Mix. Vamos usar o teste t de Student não pareado, para os parâmetros de distribuição normal.