Wirkung von Vitamin D als Zusatztherapie bei Patienten mit Lungentuberkulose (VitaminD)

Wir werden 60 Patienten einschließen, bei denen durch einen positiven Abstrich und eine Kultur auf Mycobacterium tuberculosis, die gegenüber Erstlinienmedikamenten (Rifampicin, Isoniazid, Pyrazinamid und Ethambutol) empfindlich sind, eine bestätigte TBP mit und ohne Diabetes mellitus diagnostiziert wurde. Diese werden wie folgt gruppiert: 1 ) Patienten, die Vitamin D (VD) (n = 30) erhalten, und 2) Patienten, die zusätzlich zur medikamentösen Behandlung von Tuberkulose an vorderster Front kein Vitamin D (NVD) (n = 30) erhalten. Bis zum Ende der Behandlung müssen jeden Monat Blutproben entnommen werden. Die VD-Teilnehmergruppe wird in den ersten beiden Behandlungsmonaten mit einer Tagesdosis Vitamin D 200 Internationalen Einheiten (IE) behandelt. Alle teilnehmenden Patienten müssen ihr schriftliches Einverständnis geben.

Zuerst werden wir die mononukleären Zellen des peripheren Blutes mit Ficoll-Reagenz trennen. Anschließend wird für die Bestimmung intrazellulärer Zytokine unter Basalbedingungen und nach der antigenen Stimulation mit M. tuberculosis die durchflusszytometrische Technik eingesetzt und die Ergebnisse in einem Durchflusszytometer analysiert. Wir werden infizierte Zellen mit dem Stamm M. tuberculosis bei einer Infektionsmultiplizität (MOI) von 1 und 10 untersuchen, um die Phagozytose und die bakterizide Aktivität des peripheren Vollbluts von Patienten mithilfe von Colony Forming Units (CFU) und Färbung zu bestimmen. Die Extraktion der RNA wird gemäß den Angaben des Kit-Lieferanten durchgeführt. Die Amplifikationsreaktion wird mit Applied Biosystems und Sybr Green Master Mix durchgeführt. Für die Normalverteilungsparameter verwenden wir den ungepaarten Student-t-Test.