Atividades anti-inflamatórias in vitro e ex vivo de lipídios polares de salmão

Experimental: Depois de jejuar durante a noite, os indivíduos virão para nossa unidade metabólica onde, de forma aleatória e duplo-cega, receberão várias versões do suplemento alimentar, seja resistente ao estômago (liberação intestinal) ou não resistente ao estômago (liberação estomacal), cada uma contendo 0,25 (dose baixa) ou 0,50 g (dose alta) de lipídios polares de salmão (SPL)

Avaliação e resultado medido: Amostras de sangue serão coletadas de cada indivíduo na linha de base (0 horas) e após 1-4 horas da intervenção SPL-suplemento alimentar. A agregação de plaquetas será avaliada nestas amostras conforme descrito anteriormente (ver referências 1-4), a fim de avaliar os efeitos pós-prandiais deste suplemento na agregação plaquetária.

Também serão avaliados outros parâmetros da coagulação sanguínea, como tempo de protrombina, fibrinogênio, tempo de tromboplastina parcial ativada, perfil lipídico plasmático (níveis de colesterol total plasmático, LDL, HDL e triglicerídeos) e níveis séricos de PCR.

Experimental: Após jejum noturno os sujeitos chegarão à unidade metabólica no UL às 08h00 onde de forma randomizada e duplo-cego será fornecida uma cápsula de placebo contendo apenas glicerina.

Avaliação e resultado medido: Amostras de sangue serão coletadas de cada indivíduo na linha de base (0 horas) e após 1-4 horas da administração do placebo. A agregação de suas plaquetas será avaliada conforme descrito anteriormente (ver referências 1-4), a fim de avaliar os efeitos pós-prandiais deste suplemento na agregação plaquetária.

Também serão avaliados outros parâmetros da coagulação sanguínea, como tempo de protrombina, fibrinogênio, tempo de tromboplastina parcial ativada, perfil lipídico plasmático (níveis de colesterol total plasmático, LDL, HDL e triglicerídeos) e níveis séricos de PCR.

Os bioensaios de plaquetas serão avaliados conforme descrito anteriormente. Brevemente:

PAF padrão dissolvido em BSA terá concentrações finais 2,6e-8 - 2,6e-5 mol/L ao testar em um agregômetro de plaquetas turbidimétrico de dois canais Chronolog-490. A agregação plaquetária máxima reversível ou mínima irreversível induzida por PAF é determinada como a agregação de 100% e, em seguida, várias concentrações de PAF são adicionadas, de modo a atingir agregações entre 20% e 80% de agregação, que são de resposta linear ao PAF adicionado concentração. O valor de EC50 que representa a concentração de PAF (mol/L) induzindo 50% de agregação de plaquetas humanas será calculado pela equação derivada desta curva linear. Os resultados serão expressos como alteração percentual de EC50 em 1, 2, 3 e 4 horas da administração do suplemento alimentar/placebo, em comparação com a linha de base (0 horas)

Os bioensaios de plaquetas serão avaliados conforme descrito anteriormente. Brevemente:

A trombina ativa padrão dissolvida em solução salina terá concentrações finais de 0,01 - 1,0 UI/mL ao testar em um agregômetro de plaquetas turbidimétrico de dois canais Chronolog-490. A agregação plaquetária máxima reversível ou mínima irreversível induzida por trombina é determinada como a agregação de 100% e, em seguida, várias concentrações de trombina são adicionadas, de modo a atingir agregações entre 20% e 80% de agregação, que são de resposta linear à trombina adicionada concentração. O valor de EC50 que representa a concentração de Trombina (UI/mL) induzindo 50% de agregação de plaquetas humanas será calculado pela equação derivada desta curva linear. Os resultados serão expressos como alteração percentual de EC50 em 1, 2, 3 e 4 horas da administração do suplemento alimentar/placebo, em comparação com a linha de base (0 horas).