Edição de gene intensificador de células-tronco hematopoiéticas BCL11A para Β-hemoglobinopatias graves

Critérios de inclusão:

1. Diagnóstico de a) doença falciforme com genótipo HbSS, talassemia HbS/B0, HbSD ou HbSO, ou b) talassemia β dependente de transfusão
2. Idade 13-40 anos.
3. Doença clinicamente grave, definida como: Para doença falciforme, a presença de um ou mais dos seguintes complicações clínicas: i) Mínimo de dois episódios de síndrome torácica aguda (SCA) nos 2 anos anteriores à entrada no estudo. ii) História de três ou mais episódios de dor intensa que requerem visita a um centro médico e tratamento com opioides parenterais nos 2 anos anteriores à entrada no estudo. Para pacientes com talassemia β: i) Pelo menos 100 mL/kg/ano ou 10 unidades/ano de transfusões de sangue, anualmente, durante os dois anos anteriores à inscrição.

4. Parâmetros hematológicos adequados, incluindo:

   1. Contagem de glóbulos brancos (leucócitos) na faixa de 2,5 - 25,0 x 109 /L
   2. Contagem de plaquetas na faixa de 150 - 700 x 109/L

5. Função orgânica adequada e status de desempenho:

   1. Status de desempenho de Karnofsky ≥70%
   2. Creatinina sérica </=1,5 vezes o limite superior do normal para a idade e depuração de creatinina calculada ou TFG </= 60 mL/min/1,73 m2.
   3. Bilirrubina direta ≤ 2,0 mg/dL
   4. DLCO (corrigido para hemoglobina), VEF1, CVF >50% do previsto
   5. Fração de ejeção do ventrículo esquerdo >40% ou fração de encurtamento >25%
6. Para pacientes falciformes: Falha na terapia com hidroxiureia devido à falta de melhora clínica, incapacidade de tolerar devido a efeitos colaterais (por exemplo, mielossupressão, sintomas gastrointestinais ou elevações de enzimas hepáticas) ou não clinicamente indicado (como em um paciente em transfusão crônica). regime). Os critérios clínicos (conforme acima) devem ser atendidos apesar do uso de hidroxiureia por mais ou igual a 6 meses, a menos que não seja indicado ou não seja tolerado. Pacientes em uso de hidroxiureia que ainda atendem a todos os critérios de inclusão são elegíveis para o estudo. A hidroxiureia deve ser descontinuada quando as transfusões antes da terapia genética começarem.
7. Diagnóstico confirmado de doença falciforme ou β-talassemia por teste genético molecular.
8. Não está disponível nenhum doador de medula óssea apropriado, relacionado com HLA genotipicamente idêntico.
9. Os pais/responsáveis/paciente assinaram consentimento informado.
10. Disponibilidade para retornar para acompanhamento por 15 anos.

Critérios de exclusão:

1. Indivíduos que têm condição ou doença concomitante, incluindo, mas não limitado a:

   1. Infecção não controlada, como doença febril atual, infecção que requer antibióticos parenterais ou infecção fúngica sistêmica.
   2. Malignidade ativa.
   3. Complicação ativa de hemoglobinopatia subjacente que colocaria o paciente em risco inaceitável de participação, no julgamento dos investigadores.
   4. Grande cirurgia nos últimos 30 dias.
   5. Doenças médicas/psiquiátricas/situações sociais que limitariam o cumprimento dos requisitos do estudo, conforme determinado pelo médico assistente.
2. Contraindicação à administração de medicamento condicionador (busulfan).
3. Indivíduos que foram submetidos a transplante alogênico ou autólogo de células-tronco hematopoiéticas anteriormente.
4. Um ou ambos os seguintes achados na triagem de aspirado/biópsia de medula óssea: a) diagnóstico de síndrome mielodisplásica (SMD) com base na morfologia e/ou citogenética (com base nas definições da OMS) ou b) mutação patogênica em qualquer gene no Painel Heme Rápido (RHP), um ensaio clínico de sequenciamento direcionado de próxima geração para mutações associadas a malignidades hematológicas.

5. Para pacientes com DF:

   1. Vasculopatia cerebral grave (definida por oclusão ou estenose no círculo de Willis; ou presença de doença de Moyamoya)
   2. Receber um regime de transfusão crônica para profilaxia primária ou secundária de AVC. (Nota: pacientes com histórico de Doppler transcraniano (DTC) anormal que fizeram a transição de transfusões para hidroxiureia para profilaxia de acidente vascular cerebral também não são elegíveis para o estudo. O DTC mais recente deve ocorrer dentro de um ano após a triagem para pacientes com até 16 anos de idade.)
   3. História de acidente vascular cerebral evidente ou qualquer evento neurológico com duração > 24 horas. (Nota: pacientes com evidência de imagem de acidente vascular cerebral silencioso, mas não em regime de transfusão crônica, não são excluídos.)
6. Sobrecarga grave de ferro que é considerada motivo de exclusão com base na opinião do Investigador Principal.
7. Sorologia positiva conhecida para HIV ou teste de ácido nucleico do HIV, ou sorologia positiva para HCV, HBV ou HTLV.
8. Hepatite aguda conhecida ou evidência de fibrose portal moderada ou grave ou cirrose em biópsia prévia.
9. Recebimento de um medicamento ou procedimento do estudo experimental dentro de 90 dias após a inscrição no estudo.
10. Gravidez ou amamentação em uma mulher no pós-parto, ou ausência de contracepção adequada para indivíduos férteis. Mulheres com potencial para engravidar devem concordar em usar um método de controle de natalidade clinicamente aceitável, como anticoncepcional oral, dispositivo intrauterino, barreira e espermicida ou implante/injeção anticoncepcional desde a triagem até pelo menos 6 meses após a infusão do medicamento. Os indivíduos do sexo masculino devem concordar em usar métodos contraceptivos eficazes (incluindo preservativos) desde a triagem até pelo menos 6 meses após a infusão do medicamento.
11. Uma avaliação pelos investigadores de que o sujeito não cumprirá os procedimentos do estudo descritos no protocolo do estudo, ou que, conforme determinado pelos investigadores e/ou médico transplantador, o sujeito tem qualquer outra condição que o torne inelegível para TCTH ou outro estudo procedimentos.
12. Pacientes portadores de pelo menos um alelo alternativo de citosina (C) no sítio SNP rs114518452, chr2:210530659-210530659 (GRCh38/hg38), onde guanina (G) é o alelo de referência.