Impacto da qualidade do ar na eficácia do padrão de terapia de cuidados em crianças com transtorno do espectro do autismo: um estudo prospectivo longitudinal

• Todas as crianças com TEA com TEA de 3 a 12 anos de frequência em neurologia pediátrica OPD e clínica de autismo serão rastreadas quanto à elegibilidade.
• Essas crianças que cumprem os critérios de inclusão e exclusão serão inscritos no estudo.
• O primeiro grupo de crianças será matriculado no mês de abril de 2025 e acompanhado por um período de 6 meses durante os quais os níveis de poluição do ar são mais baixos (AQI médio <200) (abril a setembro de 2025), após o qual a avaliação primária será feita no final de setembro de 2025 e depois seguiu posteriormente novamente por mais 6 meses. No final de 1 ano, ou seja, no final de março de 2026, eles passarão por avaliação secundária.
• O segundo grupo de crianças será matriculado no mês de outubro de 2025 e acompanhado por um período de 6 meses durante os quais os níveis de poluição do ar são maiores (AQI médio> 200) (outubro a março de 2026), após o qual a avaliação primária será realizada no final de março de 2026 e depois segui posteriormente por mais 6 meses. No final de 1 ano, ou seja, no final de setembro de 2026, eles passarão por avaliação secundária.

• Combinagem de ambos os grupos: ambos os grupos serão correspondidos para todos os fatores de confusão possíveis

  1. Idade
  2. Gênero
  3. Status socioeconômico
  4. Combustível doméstico
  5. Gravidade do autismo
  6. Qualquer fumante em casa
  7. Método de cozimento usado em casa
  8. Superlotação
  9. Uso de AC/Cooler/Fan/Heater, conforme apropriado
  10. IMC
  11. Outros detalhes clínicos e médicos relevantes
• Viés: Para evitar possíveis viés de observador, a avaliação da linha de base será feita e o módulo de intervenção será fornecido pelo investigador primário. As avaliações de acompanhamento aos 6 e 12 meses serão feitas por outro morador sênior da DM da Divisão de Neurologia Infantil.

Intervenção e gerenciamento de pacientes inscritos

• O consentimento informado será retirado dos pais/representantes legalmente aceitáveis ​​para o estudo
• Detalhes demográficos da linha de base e a seguinte avaliação serão realizados - Avaliação da gravidade do autismo usando os carros -2 Avaliação cognitiva de pontuação usando VABS/DP -3/Avaliação Comportamental Mástica usando a triagem de questionários do CBCL para distúrbios relacionados ao sono usando a menor poluição por escore CSHQ I- Crianças com o espectro do autismo seguidos durante os meses com menor poluição do ar com poluição do ar
• O primeiro grupo de crianças com transtorno do espectro do autismo que atende aos critérios de inclusão e exclusão será matriculado no estudo após o devido consentimento informado no mês de abril de 2025.
• Seus detalhes demográficos, incluindo o local de residência, serão coletados na linha de base.
• As crianças também serão avaliadas quanto à sua pontuação na linha de base, DQ/SQ/QI, distúrbios relacionados ao sono e problemas comportamentais usando ferramentas validadas padronizadas, conforme descrito acima.
• As crianças serão acompanhadas por um período de 6 meses até setembro de 2025, quando serão avaliadas quanto à pontuação do Primário-Carros-2 e outros resultados secundários-behavioural questões/problemas de sono/capacidade cognitiva.
• Eles serão seguidos pelos próximos 6 meses até março de 2026, a serem avaliados quanto aos resultados secundários.
• No final do período de acompanhamento de 12 meses, as crianças serão novamente avaliadas quanto à pontuação do CARS-2, DQ/SQ/QI, distúrbios relacionados ao sono e problemas comportamentais usando ferramentas validadas padronizadas, conforme descrito acima.
• Os dados sobre a exposição à poluição do ar (níveis médios diários de pm 2,5 e 10 níveis) serão coletados para o período total de acompanhamento de 1 ano com base no local de monitoramento da poluição do ar mais próximo do CPCB.
• Essas crianças identificadas com problemas de sono no questionário CSHQ serão gerenciadas de acordo com as diretrizes padrão e passarão por actigrafia e polissomnografia como e quando justificadas.
• Em crianças com problemas de comportamento, o padrão de atendimento será fornecido na forma de medicamentos antipsicóticos e outras intervenções comportamentais.

Grupo II- Crianças com transtorno do espectro do autismo acompanhado durante os meses com maior poluição do ar

• O segundo grupo de crianças com transtorno do espectro do autismo que atende aos critérios de inclusão e exclusão será matriculado no estudo após o devido consentimento informado no mês de outubro de 2025.
• Seus detalhes demográficos, incluindo o local de residência, serão coletados na linha de base.
• As crianças também serão avaliadas quanto à sua pontuação na linha de base, DQ/SQ/QI, distúrbios relacionados ao sono e problemas comportamentais usando ferramentas validadas padronizadas, conforme descrito acima.
• As crianças serão acompanhadas por um período de 6 meses até março de 2026, quando serão avaliadas quanto à pontuação do Primário-Carros-2 e outros resultados secundários-behavioural questões/problemas de sono/capacidade cognitiva.
• Eles serão acompanhados pelos próximos 6 meses até setembro de 2026, a serem avaliados quanto aos resultados secundários.
• No final do período de acompanhamento de 12 meses, as crianças serão novamente avaliadas quanto à pontuação do CARS-2, DQ/SQ/QI, distúrbios relacionados ao sono e problemas comportamentais usando ferramentas validadas padronizadas, conforme descrito acima.
• Os dados sobre a exposição à poluição do ar (níveis médios diários de pm 2,5 e 10 níveis) serão coletados para o período total de acompanhamento de 1 ano com base no local de monitoramento da poluição do ar mais próximo do CPCB.
• Essas crianças identificadas com problemas de sono no questionário CSHQ serão gerenciadas de acordo com as diretrizes padrão e passarão por actigrafia e polissomnografia como e quando justificadas.
• Em crianças com problemas de comportamento, o padrão de atendimento será fornecido na forma de medicamentos antipsicóticos e outras intervenções comportamentais.

A análise da amostra de sangue para cromatina nuclear para avaliar as alterações na expressão gênica devido à poluição do ar, marca epigenética nas proteínas da histona, um componente central da cromatina que precisa ser fechado ou aberto para alterações transcricionais, pode ser medido. O H3 trimetilado na lisina 4 (H3K4me3) representa um estado de cromatina aberta que representa a transcrição ativa. A imunoprecipitação da cromatina usando o anticorpo detectando H3K4me3 seguida pelo sequenciamento dos fragmentos de DNA (ChIP-seq) determinará a transcrição ativa ou equilibrada. Portanto, o objetivo do estudo é realizar a análise de ChIP-seq a partir de amostras de sangue periférico para visualizar a mudança global na transcrição. A detecção de mudança transcricional levaria a um estudo posterior para avaliar o estado de cromatina aberta versus fechada. Isso será determinado pelo ATAC-seq que detecta estados de cromatina e subsequente RNA-seq da mesma amostra que determina o nível de expressão de RNA como um indicador de transcrição.

Três mililitros de amostra de sangue serão coletados de cada quinto paciente de cada grupo, no final de 6 meses de acompanhamento, para a análise acima. As amostras serão coletadas apenas dos pacientes que fornecem consentimento para o mesmo. Um total de 10 amostras, 5 de cada grupo serão coletadas e analisadas.

As crianças elegíveis de consentimento informado serão matriculadas somente após receber o consentimento informado por escrito dos pais/responsáveis. Os pais serão explicados sobre a natureza voluntária da participação no estudo e a opção de retirar do estudo a qualquer momento.

Considerações éticas que os pais ou as crianças elegíveis serão abordadas e explicadas em relação ao estudo. Somente aquelas crianças cujos pais/Lar fornecem consentimento informado por escrito serão matriculados no estudo. O protocolo do estudo será submetido ao Comitê de Ética do Instituto AIIMS para aprovação e o estudo será iniciado somente após a recebida essa aprovação.