Врожденный иммунный ответ человека на микобактериальную инфекцию дыхательных путей (UBC-INNATE01)

Подход, который мы будем использовать, заключается в использовании иммунных показателей и геномики для изучения моделей ответов во время контролируемого инфекционного заражения кишечника человека.

Геномика использует массивы генов «Affymetrix» и другие методы для определения профиля экспрессии генов. Когда ген «включается», он создает мРНК, которую организм использует в качестве матрицы для производства белков. Мы извлечем всю мРНК из лейкоцитов до, во время и после инфекции. Генные чипы имеют сотни или тысячи мини-сенсоров, которые могут измерять, сколько мРНК любого конкретного гена присутствует в образце. Таким образом, мы можем начать видеть, какие гены включены, выключены или не затронуты внутри лейкоцитов на стадиях развития врожденного иммунного ответа. Это позволяет нам отслеживать реакцию организма на инфекцию и видеть, какие семейства генов важны на разных стадиях кишечной инфекции.

Вакцина БЦЖ производится из Mycobacterium bovis (полное название микроорганизма — Mycobacterium bovis Baccille Calmette Guérin). В этом исследовании мы предлагаем использовать пероральный препарат БЦЖ, производимый в качестве профилактической и терапевтической пероральной вакцины, в качестве безопасной модели естественной кишечной инфекции патогенными Mycobacterium bovis. Клеточная стенка микобактерий, таких как БЦЖ, является мощным иммунным адъювантом (адъювант — это вещество, усиливающее иммунный ответ), поскольку липиды, сахара и белки в клеточной стенке сильно взаимодействуют с молекулами врожденной иммунной системы. Таким образом, он представляет собой безопасный, но очень эффективный способ стимуляции врожденного иммунитета в «естественных» условиях кишечной инфекции. Эта первая модель была выбрана, поскольку она отражает высокоприоритетную область профилактики заболеваний в «реальном мире», имея при этом высокий уровень безопасности и воспроизводимости в модели пероральной БЦЖ.

Осторожно вводя оральные пробы БЦЖ здоровым добровольцам в контролируемых условиях, мы можем уменьшить шум и фоновую активность в протеомных и геномных анализах, которые мы будем использовать для профилирования развивающегося врожденного иммунного ответа. Мы можем проверить, что БЦЖ действительно колонизировала и «заразила» субъекта, измерив специфические адаптивные ответы Т-клеток и антител с помощью чувствительных анализов, которые мы разработали в предыдущих исследованиях для обнаружения этих иммунных ответов. Это критический аспект исследования: если мы обнаружим специфические для БЦЖ ответы Т-клеток, мы можем быть уверены, что «инфекция» имела место, и поэтому можем интерпретировать профили, которые мы наблюдаем в иммунологии и геномике.

Если мы видим иммунный ответ, мы можем связать любую врожденную иммунную активацию с колонизацией БЦЖ. Напротив, даже если мы не видим иммунных ответов, но можем быть уверены, что вакцина была доставлена ​​должным образом в жизнеспособном составе (что мы и сделаем, строго придерживаясь надлежащей клинической практики), мы можем посмотреть на особенности геномного и протеомного профилей. в исходных измерениях до заражения, которые могут предсказать неспособность организмов заразить.

Собирая данные о других событиях, таких как интеркуррентные заболевания или другие неблагоприятные события, мы также можем определить, действительно ли изменения в профилях протеомной или генной экспрессии вызваны модельной инфекцией или посторонними событиями. Это предварительное исследование позволит нам усовершенствовать дорогостоящие методы, протоколы и анализы, чтобы мы могли более подробно сосредоточиться на последующих исследованиях.

Это исследование будет проводиться в соответствии со Стандартными операционными процедурами (СОП) Института вакцин Святого Георгия. В это исследование будет включено до 10 субъектов. Исследование будет состоять из визита для скрининга перед исследованием и 23 посещений в течение 12 месяцев во время, указанное в графике исследования.