Lidské vrozené imunitní reakce na mykobakteriální infekci aerodigestivního traktu (UBC-INNATE01)

Přístup, který použijeme, je využít imunitní odečet a genomiku, abychom se podívali na vzorce reakcí během kontrolované infekční výzvy lidského střeva.

Genomics používá genová pole „Affymetrix“ a další techniky k určení profilu genové exprese. Když je gen „zapnut“, vytváří mRNA, kterou tělo používá jako templát pro tvorbu proteinů. Extrahujeme veškerou mRNA z bílých krvinek před, během a po infekci. Genové čipy mají stovky nebo tisíce mini-senzorů, které mohou měřit, kolik mRNA z jakéhokoli konkrétního genu je přítomno ve vzorku. Můžeme tedy začít vidět, které geny jsou zapnuté, vypnuté nebo neovlivněné uvnitř bílých krvinek během fází vyvíjející se vrozené imunitní odpovědi. To nám umožňuje sledovat reakci těla na infekci a zjistit, které rodiny genů jsou důležité v různých fázích střevní infekce.

BCG vakcína je odvozena od Mycobacterium bovis (celý název organismu je Mycobacterium bovis Baccille Calmette Guérin). V této studii navrhujeme použít perorální BCG přípravek vyrobený jako profylaktická a terapeutická perorální vakcína jako bezpečný model přirozené střevní infekce patogenním Mycobacterium bovis. Buněčná stěna mykobakterií, jako je BCG, je silné imunitní adjuvans (adjuvans je látka, která zvyšuje imunitní odpověď), protože lipidy, cukry a proteiny v buněčné stěně silně interagují s molekulami vrozeného imunitního systému. Poskytuje tedy bezpečný, ale vysoce účinný způsob, jak stimulovat vrozenou imunitu za „přirozených“ podmínek střevní infekce. Tento první model byl vybrán, protože odráží „skutečný svět“ vysoce prioritní oblast prevence nemocí, přičemž má vysokou úroveň bezpečnosti a reprodukovatelnosti v orálním BCG modelu.

Pečlivým podáváním orálních BCG provokací zdravým dobrovolníkům za kontrolovaných podmínek můžeme snížit hluk a aktivitu pozadí v proteomických a genomických testech, které použijeme k profilování vyvíjející se vrozené imunitní odpovědi. Můžeme zkontrolovat, že BCG skutečně kolonizoval a „infikoval“ subjekt měřením specifických adaptivních T buněk a odpovědí protilátek pomocí citlivých testů, které jsme vyvinuli v předchozích studiích k detekci těchto imunitních odpovědí. Toto je kritický aspekt studie: pokud detekujeme BCG-specifické T buněčné reakce, můžeme si být jisti, že k „infekci“ došlo, a tak můžeme interpretovat profily, které vidíme v imunologii a genomice.

Pokud vidíme imunitní odpověď, můžeme přiřadit jakoukoli vrozenou imunitní aktivaci do souvislosti s kolonizací BCG. Naproti tomu, i když nevidíme žádné imunitní reakce, ale můžeme si být jisti, že vakcína byla dodána správně v životaschopném složení (což uděláme dodržováním přísné správné klinické praxe), pak se můžeme podívat na rysy v genomických a proteomických profilech. v základních měřeních před infekcí, která mohou předpovědět selhání organismů při infekci.

Sběrem dat o dalších příhodách, jako jsou interkurentní onemocnění nebo jiné nežádoucí příhody, můžeme také určit, zda jsou změny v profilech proteomické nebo genové exprese skutečně způsobeny modelovou infekcí nebo vnějšími příhodami. Tato předběžná studie nám umožní vylepšit drahé techniky, protokoly a testy, abychom se mohli podrobněji zaměřit v následujících studiích

Tato studie bude provedena podle standardních operačních postupů (SOP) St George's Vaccine Institute. Do této studie bude zahrnuto až 10 subjektů. Studie se bude skládat z předstudijní screeningové návštěvy a 23 návštěv po dobu 12 měsíců v časech uvedených v plánu vyšetřování.