Инновационный подход к сортировке предрака полости рта (iTOP)

Набор пациентов Это исследование будет проводиться в отоларингологической клинике Ванкуверской больницы общего профиля. Для участия в исследовании будут привлечены триста шестьдесят добровольцев. Подробные этапы набора пациентов для исследования представлены ниже.

1. Создание каналов направления для настоящей популяционной когорты OPL в Британской Колумбии.

   В Британской Колумбии Служба оральной биопсии Британской Колумбии (OBS) и отделение патологии Ванкуверской больницы общего профиля (VGH) получают биоптаты и хирургические образцы от стоматологов и врачей соответственно. Эти централизованные службы биопсии предлагают очень редкую возможность создать популяционную когорту ЛПН. Команда патологоанатомов определит подходящих пациентов в процессе выписки из патологии и позвонит подавшим заявку врачам, чтобы уведомить потенциальный канал направления в качестве альтернативного лечения для этих пациентов. В настоящее время существует система направлений пациентов с тяжелой дисплазией или более поздних злокачественных новообразований полости рта с использованием этой модели, которая позволяет направлять хирургических пациентов в исследование COOLS, финансируемое TFRI (автор Drs. Дарем и Пох; H09-03090). Эта же система/конвейер будет использоваться для выявления подходящих пациентов с диагнозом легкой и/или умеренной дисплазии, выявленных как медицинскими, так и стоматологическими сообществами.

2. Право на участие Субъекты старше 19 лет посещают стоматологическую или отоларингологическую клинику в Ванкуверской больнице общего профиля (Ванкуверская острая) для оценки поражений полости рта с диагнозом легкой или умеренной дисплазии; готовы дать информированное согласие.
3. Процедуры набора и информированного согласия Письмо-приглашение в отношении этого исследования будет отправлено по почте потенциально подходящим пациентам за неделю до даты их назначения вместе с документом о согласии. В день клинического визита ассистент-исследователь объяснит подходящему субъекту суть исследования и получит подписанное согласие участников. Будет набрано 400 испытуемых. Эти пациенты будут наблюдаться один раз в шесть месяцев (действующий стандарт лечения). Когда это клинически оправдано из-за признаков прогрессирования заболевания или через 2 года наблюдения, будут выполнены две 5-мм биопсии на участках поражения с разной степенью тяжести (как определено с помощью технологий визуализации). Двухлетняя сравнительная биопсия при стабильном поражении является текущим стандартом лечения.

Процедуры исследования. Исследование представляет собой лонгитюдное исследование в соответствии с графиком последующего наблюдения в соответствии с текущим стандартом лечения таких поражений, т.е. один раз в 6 месяцев и сравнительная биопсия один раз в 2-3 года. Важными моментами времени являются первоначальный визит (исходный уровень), в конце второго, 5-го и 8-го года последующих посещений. Однако время биопсии зависит исключительно от клинической оценки клиницистов, т. е. признаков прогрессирования заболевания.

1. Сбор клинических данных После того, как субъект дал согласие, его попросят заполнить набор анкет для сбора демографической информации и информации о факторах риска. Субъекту будет присвоен идентификатор исследования, и к собранным данным не будет привязан уникальный идентификатор. Для связывания идентификатора исследования и идентификаторов пациентов будет использоваться отдельный файл. Это важно для облегчения ведения пациентов и сбора информации о результатах. Этот файл с уникальным идентификатором пациента будет храниться в защищенном паролем файле на компьютере Центра исследования рака Британской Колумбии (BCCCRC) в запертом офисе в BCCCRC, и только PI могут получить доступ к файлу. Состояние здоровья и анкета HAI не предназначены для диагностических целей. Если клиницисты считают, что у участника присутствует депрессия или тревога (клиническое заключение клиницистов), клиницисты исследования, ответственные за этого конкретного участника, свяжутся с семейным врачом пациента и направят участника к соответствующему источнику для дальнейшего обследования и лечения.

2. Сбор данных с помощью исследовательского устройства

   • Клиницисты будут обследовать пациентов, используя WL, VELScope VX для FV (ранее одобренный, R05-0116), OCT (ранее одобренный, H09-01955) и ручной конфокальный микроскоп (H11-00011).
   • ОКТ-визуализация: после определения аномальных участков для биопсии с помощью исследования WL и FV клиницист помещает оптоволоконный датчик ОКТ на интересующие области слизистой оболочки полости рта. Место для размещения зонда будет определено PI (отоларингологи-хирурги головы и шеи (SD/DA) и/или специалист по оральной медицине/патологии полости рта (Ng/Poh)). Изображения будут записаны машиной для последующего анализа.
   • Конфокальная микроскопия: после ОКТ врач наносит 0,05% раствор акрифлавина гидрохлорида местно на интересующие области слизистой оболочки полости рта на 30 секунд перед визуализацией. Клиницист поместит ручной конфокальный микроскоп на поверхность слизистой оболочки, чтобы записать наблюдение для последующего анализа.
   • Будут предприняты все необходимые усилия для уменьшения легкого дискомфорта, который может быть связан с размещением зонда в ротовой полости субъекта. Зонд ОКТ или конфокальный микроскоп будут закрыты пластиковым барьером и продезинфицированы стандартными методами, используемыми для инструментов полости рта, до и после использования субъектом. Осмотр устройства займет не более 15 минут в дополнение к времени приема испытуемого для его обычных посещений. Максимальная интенсивность освещения ткани для каждого измерения будет меньше предельного порогового значения (TLV), установленного Американской конференцией государственных специалистов по промышленной гигиене (ACGIH)11 для воздействия широкополосного света.
   • Информация, полученная из измерений поляризованной отражательной способности, будет сравниваться с гистологией и количественной патологией (оценка ядерного фенотипа) срезов ткани из очага поражения. Собранные данные спектров нормально выглядящих областей соседней нормально выглядящей слизистой оболочки и контралатеральной слизистой оболочки будут использоваться для определения различий от пациента к пациенту в поляризованной отражательной способности слизистой оболочки полости рта.
3. Сбор образцов эксфолиативной щеткой (ранее утвержденный, R05-0116) Цитологическая щетка Innovatec (Arcona Inc) используется для сбора отслоившихся клеток из поражения полости рта. Эти щетки переносят в раствор PreservCyt® (Cytyc Corp.) и хранят в холодильнике при 4ºC.
4. Сбор образцов крови В общей сложности 12 мл (3/4 столовой ложки) образцов крови будут собраны в 1 вакутейнер SST и 1 EDTA в клинике обученным исследовательским персоналом. Образец крови будет обработан, а образцы сыворотки, плазмы и пухлого слоя будут разделены на аликвоты и заморожены при температуре -80ºC для последующего анализа. Образцы ДНК в пухлой шерсти будут извлечены и использованы в качестве нормального контрольного образца для анализа потери гетерозиготности (LOH). Для этой цели будет использоваться отдельное согласие. Мы ожидаем, что все аликвоты сыворотки, плазмы и отечного слоя будут израсходованы. Любая оставшаяся ткань не будет выброшена или продана, а будет храниться в запертой морозильной камере в Онкологическом агентстве Британской Колумбии в течение периода до пятнадцати лет, чтобы результаты этого исследования могли быть подтверждены.
5. Сбор замороженных тканей В случае биопсии ткань будет разделена пополам. Половина образца будет зафиксирована в растворе формалина и отправлена ​​​​в патологоанатомическую лабораторию для анализа в рамках обычной процедуры медицинской диагностики. Часть этой ткани будет сохранена и использована только после постановки диагноза. Ни в коем случае ткань не будет удаляться исключительно в целях исследования. Пожертвованная ткань получит код для идентификации руководителем проекта и будет храниться в безопасных морозильных камерах в Агентстве по борьбе с раком Британской Колумбии до тех пор, пока генетический материал (ДНК и РНК) не будет извлечен для анализа. Для этой цели будет использоваться отдельное согласие. Мы ожидаем, что вся донорская ткань будет использована. Любая оставшаяся ткань не будет выброшена или продана, а будет храниться в запертой морозильной камере в Онкологическом агентстве Британской Колумбии в течение периода до пятнадцати лет, чтобы результаты этого исследования могли быть подтверждены.
6. Микродиссекция тканей и выделение ДНК. Фиксированные формалином и залитые парафином блоки тканей исходной биопсии и биопсии, полученной при последующем посещении, будут получены в отделении анатомической патологии Ванкуверской больницы общего профиля. во время клинических изменений или через 24 месяца последующее посещение будет запрошено для обработки. Десять срезов толщиной 10 мкм для образца ДНК, 2 неокрашенных среза ткани толщиной 4 мкм для количественного гистологического анализа. Области дисплазии на толстых срезах будут идентифицированы и подвергнуты микродиссекции. Образец ДНК из эпителия будет извлечен и использован для анализа LOH.