Innovatív megközelítés a szájüregi precancer triage kezelésére (iTOP)

Betegfelhalmozás Ez a vizsgálat a Vancouveri Általános Kórház fül-orr-gégészeti klinikáján történik. Háromszázhatvan önkéntes alanyt vesznek részt a vizsgálatban. A vizsgálati betegek felhalmozásának részletes lépései az alábbiakban találhatók.

1. Áttételi folyamatok létrehozása egy valódi népesség alapú OPL kohorsz számára Kr. e.

   BC-ben a BC Oral Biopsy Service (OBS) és a Vancouver General Hospital (VGH) Patológiai Osztálya biopsziás és sebészeti mintákat kap a fogorvosi, illetve az orvosi közösségtől. Ezek a központosított biopsziás szolgáltatások nagyon ritka lehetőséget kínálnak az OPL-ek populációalapú kohorszának létrehozására. A patológusok csoportja a patológia kijelentkezési folyamata során azonosítja a jogosult betegeket, és felhívja a benyújtó orvosokat, hogy értesítsék a lehetséges beutalót, mint alternatív kezelést ezen betegek számára. Jelenleg ezt a modellt alkalmazó, súlyos diszpláziára vagy előrehaladottabb szájüregi rosszindulatú daganatokra utaló rendszer létezik, és a sebészeti betegeket a TFRI által finanszírozott COOLS-vizsgálatra irányítják (Dr. Durham és Poh; H09-03090). Ugyanezt a rendszert/vezetéket fogják használni a jogosult betegek azonosítására, akiknél enyhe és/vagy közepesen súlyos diszpláziát diagnosztizáltak az orvosi és fogorvosi közösségekben.

2. Jogosultság A 19 éven felüli alanyok a Vancouveri Általános Kórház (Vancouver Acute) fogászati ​​vagy fül-orr-gégészeti klinikáján vesznek részt az enyhe vagy közepesen súlyos diszpláziával diagnosztizált szájsérülések felmérése céljából; hajlandóak tájékozott beleegyezést adni.
3. Toborzási és tájékoztatáson alapuló beleegyezési eljárások A vizsgálatra vonatkozó meghívólevelet postai úton küldjük a potenciálisan jogosult betegeknek a kinevezésük dátuma előtt egy héttel a beleegyező dokumentummal együtt. A klinikai látogatás napján a kutatási asszisztens elmagyarázza a vizsgálatot a jogosult alanynak, és aláírt beleegyezést kér a résztvevőktől. 400 alanyt vesznek fel. Ezeket a betegeket félévente egyszer ellenőrizni fogják (az ellátás jelenlegi színvonala). Ha a betegség progressziójának jelei miatt klinikailag indokolt, vagy a 2 éves követési idő lejártakor, két 5 mm-es punch biopsziát kell végezni a különböző súlyosságú (a képalkotó technológiák által meghatározott) elváltozási területeken. A kétéves összehasonlító biopszia stabil elváltozás esetén az ellátás jelenlegi standardja.

Vizsgálati eljárások A vizsgálat egy longitudinális vizsgálat, amely az ilyen elváltozások jelenlegi ellátási standardjának követési ütemtervét követi, azaz 6 havonta egyszer, és összehasonlító biopsziát 2-3 évente egyszer. A fontos időpontok a kezdeti látogatás (alapvonal), a második, 5. és 8. év utáni nyomon követési látogatások végén. A biopszia időpontja azonban kizárólag a klinikusok klinikai megítélésén, azaz a betegség progressziójának jelein alapul.

1. Klinikai adatok gyűjtése Miután az alany beleegyezett, egy kérdőívet kell kitöltenie a demográfiai és kockázati tényezők információinak összegyűjtéséhez. Az alanyhoz vizsgálati azonosítót rendelünk, és nem kapcsolunk egyedi azonosítót az összegyűjtött adatokhoz. A vizsgálati azonosító és a betegazonosítók összekapcsolására külön fájlt használunk. Ez fontos a betegkezelés megkönnyítése és a kimenetelre vonatkozó információk rögzítése érdekében. Ezt a páciens egyedi azonosítóját tartalmazó fájlt a BC Cancer Research Center (BCCCC) számítógépének jelszóval védett fájljában tárolják a BCCCRC zárt irodájában, és csak a PI-k férhetnek hozzá a fájlhoz. Az egészségi állapot és a HAI kérdőív nem diagnosztikai célokat szolgál. Ha a klinikusok úgy vélik, hogy depresszió vagy szorongás van jelen a résztvevőben (a klinikusok klinikai megítélése), az adott résztvevőért felelős vizsgálati klinikusok kapcsolatba lépnek a páciens háziorvosával, és megfelelő forráshoz irányítják a résztvevőt további értékelés és kezelés céljából.

2. Adatgyűjtés vizsgálati eszközzel

   • A klinikusok WL, VELScope VX for FV (korábban jóváhagyott, R05-0116), OCT (korábban jóváhagyott, H09-01955) és kézi konfokális mikroszkóp (H11-00011) segítségével vizsgálják meg a betegeket.
   • OCT képalkotás: A biopsziás kóros területek WL és FV vizsgálattal történő azonosítása után a klinikus az OCT száloptikai szondáját helyezi a szájnyálkahártya érdeklődésére számot tartó területekre. A szonda elhelyezésének helyét a PI-k (fül-orr-gégészeti fej-nyaki sebészek (SD/DA) és/vagy szájgyógyász/szájpatológiai szakorvos (Ng/Poh) határozzák meg). A képeket a gép rögzíti későbbi elemzés céljából.
   • Konfokális mikroszkópos képalkotás: Az OCT képalkotás után a klinikus 0,05%-os Acriflavin-hidroklorid oldatot alkalmaz helyileg a szájnyálkahártya érdeklődésére számot tartó területeken 30 másodpercig a képalkotás előtt. A klinikus egy kézi konfokális mikroszkópot helyez a nyálkahártya felületére, hogy rögzítse a megfigyelést későbbi elemzés céljából.
   • Minden szükséges erőfeszítést megtesznek annak érdekében, hogy csökkentsék azokat az enyhe kényelmetlenségeket, amelyek a vizsgált személy szájüregébe történő elhelyezésével járhatnak. Az OCT szondát vagy a konfokális mikroszkópot műanyag gáttal kell lefedni, és a szájüregi műszereknél szokásos módszerekkel fertőtleníteni kell az alany használat előtt és után. A készülék vizsgálata legfeljebb 15 percet vesz igénybe a vizsgálati alany rutinlátogatásának időpontján felül. A szövetek megvilágításának maximális intenzitása minden mérésnél kisebb lesz, mint az Amerikai Kormányzati Ipari Higiénikusok Konferencia (ACGIH)11 által a szélessávú fénynek való kitettségre megállapított küszöbérték (TLV).
   • A polarizált reflexiós mérésekből nyert információkat összehasonlítják a lézióból származó szövetmetszet szövettani és kvantitatív patológiájával (nukleáris fenotípus pontszám). A szomszédos, normális kinézetű nyálkahártyákról és az ellenoldali nyálkahártyákról származó, normál kinézetű területekről összegyűjtött spektrumadatokat a szájnyálkahártya polarizált reflexiójának páciensenkénti eltérésének meghatározására fogják használni.
3. Hámlasztó kefés mintagyűjtés (korábban engedélyezett, R05-0116) Az Innovatec citológiai kefét (Arcona Inc) használjuk a szájsérülésből hámló sejtek összegyűjtésére. Ezeket a fogkeféket a PreservCyt® Solution-ba (Cytyc Corp.) helyezik át, és 4°C-os hűtőszekrényben tárolják.
4. Vérmintavétel Összesen 12 ml (3/4 evőkanál) vérmintát vesznek a klinikán 1 SST és 1 EDTA vakutainerben, képzett kutatószemélyzet által. A vérmintát feldolgozzák, a szérum-, plazma- és puffadt köpenymintákat alikvot részekre osztják, és -80 °C-on lefagyasztják későbbi elemzés céljából. A puffadt bundában lévő DNS-mintákat kivonják és normál kontrollmintaként használják fel a heterozigóta (LOH) elemzéshez. Erre a célra külön hozzájárulás kerül felhasználásra. Arra számítunk, hogy a szérum, a plazma és a puffadt bevonat minden aliquot része elhasználódik. A megmaradt szöveteket nem dobják el vagy nem adják el, hanem a BC Cancer Agency zárt fagyasztóhelyiségében tárolják legfeljebb tizenöt évig, hogy megerősíthessék a vizsgálat eredményeit.
5. Fagyasztott szövetgyűjtés Biopszia esetén a szövetet kettévágják. A minta felét a formalinoldatban rögzítik, és az orvosi diagnosztikai eljárás szokásos részeként a patológiai laboratóriumba küldik elemzésre. Ennek a szövetnek egy részét megőrzik és csak a diagnózis felállítása után használják fel. Soha nem távolítanak el szövetet kizárólag kutatási célból. Az adományozott szövetet a projektvezető azonosítási kóddal látja el, és a BC Cancer Agency biztonságos fagyasztóiban tárolja, amíg a genetikai anyagot (DNS és RNS) ki nem nyerik elemzés céljából. Erre a célra külön hozzájárulás kerül felhasználásra. Arra számítunk, hogy az összes adományozott szövet elhasználódik. A megmaradt szöveteket nem dobják el vagy nem adják el, hanem a BC Cancer Agency zárt fagyasztóhelyiségében tárolják legfeljebb tizenöt évig, hogy megerősíthessék a vizsgálat eredményeit.
6. Szövet mikrodisszekció és DNS extrakció. A kezdeti biopszia és a biopszia formalinnal rögzített, paraffinba ágyazott szöveti blokkjait az utóvizsgálat során a Vancouveri Általános Kórház Anatómiai Patológiai Osztályától szerezzük be. a klinikai változás időpontjában vagy 24 hónapos utóellenőrző látogatást kérünk feldolgozásra. Tíz 10 µm vastag metszet DNS mintához, 2 4 µm festetlen szövetmetszet a kvantitatív szövettani elemzéshez. A vastag részeken lévő diszpláziás területeket azonosítani és mikrodisszekcióval kell ellátni. A hámból származó DNS-mintát kivonják és felhasználják az LOH-analízishez.