Innovativer Ansatz zur Triage oraler Krebsvorstufen (iTOP)

Patientenrekrutierung Diese Studie wird an der HNO-Klinik des Vancouver General Hospital durchgeführt. 360 Freiwillige werden für die Teilnahme an der Studie eingeschrieben. Detaillierte Schritte der Rekrutierung von Studienpatienten sind unten angegeben.

1. Die Einrichtung von Empfehlungspipelines für eine echte populationsbasierte OPL-Kohorte in BC.

   In BC erhalten der BC Oral Biopsy Service (OBS) und die Pathologieabteilung des Vancouver General Hospital (VGH) Biopsie- und chirurgische Proben von Zahnärzten bzw. Ärzten. Diese zentralisierten Biopsiedienste bieten eine sehr seltene Gelegenheit, eine populationsbasierte Kohorte von OPLs aufzubauen. Das Pathologenteam wird geeignete Patienten durch den Pathologie-Abmeldeprozess identifizieren und die einreichenden Ärzte anrufen, um die potenzielle Überweisungspipeline als alternatives Management für diese Patienten mitzuteilen. Derzeit existiert eine Überweisungspipeline für schwere Dysplasien oder fortgeschrittenere orale Malignome unter Verwendung dieses Modells und wurde eingerichtet, um chirurgische Patienten für die TFRI-finanzierte COOLS-Studie (von Dr. Durham und Poh; H09-03090). Dasselbe System/dieselbe Pipeline wird verwendet, um geeignete Patienten zu identifizieren, bei denen leichte und/oder mittelschwere Dysplasien diagnostiziert wurden, die sowohl von Ärzten als auch von Zahnärzten identifiziert wurden.

2. Teilnahmeberechtigung Probanden über 19 Jahren besuchen die Klinik für Zahn- oder Hals-Nasen-Ohrenheilkunde des Vancouver General Hospital (Vancouver Acute) zur Beurteilung oraler Läsionen, bei denen eine leichte oder mittelschwere Dysplasie diagnostiziert wurde; sind bereit, die informierte Zustimmung zu geben.
3. Verfahren der Rekrutierung und Einverständniserklärung Ein Einladungsschreiben zu dieser Studie wird den potenziell geeigneten Patienten eine Woche vor ihrem Termin zusammen mit dem Einverständnisdokument zugesandt. Am Tag des klinischen Besuchs erklärt der wissenschaftliche Mitarbeiter dem geeigneten Probanden die Studie und holt die unterschriebene Zustimmung der Teilnehmer ein. 400 Probanden werden rekrutiert. Diese Patienten werden alle sechs Monate überwacht (aktueller Behandlungsstandard). Wenn dies aufgrund von Anzeichen einer Krankheitsprogression klinisch gerechtfertigt ist oder bei der 2-Jahres-Follow-up-Marke, werden zwei 5-mm-Stanzbiopsien an Läsionsbereichen mit unterschiedlichem Schweregrad (wie durch Bildgebungstechnologien bestimmt) durchgeführt. Eine zweijährige Vergleichsbiopsie an einer stabilen Läsion ist aktueller Behandlungsstandard.

Studienverfahren Die Studie ist eine Längsschnittstudie, die dem Nachsorgeplan des aktuellen Behandlungsstandards für solche Läsionen folgt, d. h. einmal alle 6 Monate und vergleichende Biopsie einmal alle 2-3 Jahre. Die wichtigen Zeitpunkte sind der erste Besuch (Baseline), am Ende des zweiten, 5. und 8. Jahres der Folgebesuche. Der Zeitpunkt der Biopsie basiert jedoch ausschließlich auf der klinischen Beurteilung der Kliniker, d. h. auf Anzeichen einer Krankheitsprogression.

1. Klinische Datenerhebung Nachdem der Patient eingewilligt hat, wird er gebeten, eine Reihe von Fragebögen zur Erhebung von demografischen Daten und Informationen zu Risikofaktoren auszufüllen. Dem Probanden wird eine Studien-ID zugewiesen und es wird kein eindeutiger Identifikator mit den gesammelten Daten verknüpft. Eine separate Datei wird verwendet, um die Studien-ID und die Patienten-IDs zu verknüpfen. Dies ist wichtig, um das Patientenmanagement zu erleichtern und die Ergebnisinformationen zu erfassen. Diese Datei mit der eindeutigen Patientenkennung wird in der passwortgeschützten Datei auf dem Computer des BC Cancer Research Center (BCCCRC) in einem verschlossenen Büro im BCCCRC aufbewahrt, und nur PIs können auf die Datei zugreifen. Der Gesundheitsstatus- und HAI-Fragebogen dient nicht diagnostischen Zwecken. Sollten die Kliniker glauben, dass der Teilnehmer an Depressionen oder Angstzuständen leidet (klinisches Urteil der Kliniker), werden die für diesen spezifischen Teilnehmer verantwortlichen Studienkliniker mit dem Hausarzt des Patienten kommunizieren und den Teilnehmer an eine geeignete Quelle zur weiteren Bewertung und Behandlung verweisen.

2. Datenerhebung mit Studiengerät

   • Die Kliniker werden die Patienten mit WL, VELScope VX für FV (zuvor zugelassen, R05-0116), OCT (zuvor zugelassen, H09-01955) und einem konfokalen Handmikroskop (H11-00011) untersuchen.
   • OCT-Bildgebung: Nach der Identifizierung der abnormalen Bereiche für die Biopsie mittels WL- und FV-Untersuchung platziert der Arzt eine faseroptische Sonde des OCT auf den interessierenden Bereichen der Mundschleimhaut. Die Stelle für die Platzierung der Sonde wird von PIs (HNO-Chirurgen (SD/DA) und/oder Facharzt für Mundheilkunde/Oralpathologie (Ng/Poh)) festgelegt. Die Bilder werden von der Maschine zur späteren Analyse aufgezeichnet.
   • Konfokalmikroskopische Bildgebung: Nach der OCT-Bildgebung trägt der Arzt vor der Bildgebung 30 Sekunden lang 0,05 % Acriflavinhydrochlorid-Lösung topisch auf die interessierenden Bereiche der Mundschleimhaut auf. Der Arzt platziert ein konfokales Handmikroskop auf der Schleimhautoberfläche, um die Beobachtung für eine spätere Analyse aufzuzeichnen.
   • Es werden alle notwendigen Anstrengungen unternommen, um leichte Beschwerden zu reduzieren, die mit der Platzierung der Sonde in der Mundhöhle eines Patienten verbunden sein könnten. Die OCT-Sonde oder das konfokale Mikroskop wird mit einer Kunststoffbarriere abgedeckt und vor und nach der Verwendung durch Standardmethoden für Mundhöhleninstrumente desinfiziert. Die Untersuchung des Geräts dauert nicht länger als 15 Minuten zusätzlich zu der Terminzeit des Probanden für seine Routinebesuche. Die maximale Intensität der Gewebebeleuchtung für jede Messung ist geringer als der von der American Conference of Governmental Industrial Hygienists (ACGIH)11 festgelegte Schwellenwert (Threshold Limit Value, TLV) für die Exposition gegenüber Breitbandlicht.
   • Die aus polarisierten Reflexionsmessungen gewonnenen Informationen werden mit der Histologie und quantitativen Pathologie (Kernphänotyp-Score) der Gewebeschnitte der Läsion verglichen. Die gesammelten Spektrendaten von normal aussehenden Bereichen von benachbarter normal aussehender Schleimhaut und kontralateraler Schleimhaut werden verwendet, um die Abweichung von Patient zu Patient in der polarisierten Reflexion der Mundschleimhaut zu bestimmen.
3. Probenentnahme durch exfoliatives Bürsten (zuvor genehmigt, R05-0116) Eine Innovatec-Zytologiebürste (Arcona Inc) wird verwendet, um exfolierte Zellen aus der oralen Läsion zu sammeln. Diese Bürsten werden in PreservCyt®-Lösung (Cytyc Corp.) überführt und im Kühlschrank bei 4 °C aufbewahrt.
4. Blutprobenentnahme Insgesamt werden 12 ml (3/4 Esslöffel) Blutprobe in 1 SST- und 1 EDTA-Vacutainer in der Klinik durch geschultes Forschungspersonal gesammelt. Die Blutprobe wird verarbeitet und Serum-, Plasma- und Puffy-Coat-Proben werden aliquotiert und für zukünftige Analysen bei -80 °C eingefroren. Die DNA-Proben im Puffy Coat werden extrahiert und als normale Kontrollprobe für die Analyse des Verlusts der Heterozygotie (LOH) verwendet. Hierfür wird eine gesonderte Einwilligung verwendet. Wir gehen davon aus, dass alle Aliquots von Serum, Plasma und Puffy Coat aufgebraucht werden. Verbleibendes Gewebe wird nicht entsorgt oder verkauft, sondern in einem verschlossenen Gefrierraum der BC Cancer Agency für einen Zeitraum von bis zu fünfzehn Jahren gelagert, damit die Ergebnisse dieser Studie bestätigt werden können.
5. Gefrorene Gewebeentnahme Im Falle einer Biopsie wird das Gewebe halbiert. Die Hälfte der Probe wird in der Formalinlösung fixiert und als normaler Teil des medizinischen Diagnoseverfahrens zur Analyse an das Pathologielabor geschickt. Ein Teil dieses Gewebes wird aufbewahrt und erst nach Diagnosestellung verwendet. Zu keinem Zeitpunkt wird Gewebe ausschließlich zu Forschungszwecken entnommen. Das gespendete Gewebe erhält vom Projektleiter einen Code zur Identifizierung und wird in sicheren Gefrierschränken der BC Cancer Agency aufbewahrt, bis das genetische Material (DNA und RNA) zur Analyse extrahiert wurde. Hierfür wird eine gesonderte Einwilligung verwendet. Wir gehen davon aus, dass alle gespendeten Gewebe verbraucht werden. Verbleibendes Gewebe wird nicht entsorgt oder verkauft, sondern in einem verschlossenen Gefrierraum der BC Cancer Agency für einen Zeitraum von bis zu fünfzehn Jahren gelagert, damit die Ergebnisse dieser Studie bestätigt werden können.
6. Gewebemikrodissektion und DNA-Extraktion. Die formalinfixierten, paraffineingebetteten Gewebeblöcke der ersten Biopsie und der Biopsie des Nachsorgebesuchs werden von der Abteilung für anatomische Pathologie des Vancouver General Hospital bezogen. zum Zeitpunkt der klinischen Änderung oder nach 24 Monaten wird ein Folgebesuch zur Bearbeitung angefordert. Zehn 10-µm-dicke Schnitte für die DNA-Probe, 2 4-µm-ungefärbte Gewebeschnitte für die quantitative histologische Analyse. Bereiche mit Dysplasie auf den dicken Schnitten werden identifiziert und mikrodisseziert. Die DNA-Probe aus dem Epithel wird extrahiert und für die LOH-Analyse verwendet.