Abordagem inovadora para pré-câncer oral de triagem (iTOP)

Seleção de pacientes Este estudo será realizado na Clínica de Otorrinolaringologia do Hospital Geral de Vancouver. Trezentos e sessenta indivíduos voluntários serão inscritos para participar do estudo. As etapas detalhadas do acúmulo de pacientes do estudo são fornecidas abaixo.

1. O estabelecimento de pipelines de referência para uma verdadeira coorte OPL baseada na população em BC.

   Em BC, o BC Oral Biopsy Service (OBS) e o Departamento de Patologia do Vancouver General Hospital (VGH) recebem biópsias e espécimes cirúrgicos das comunidades odontológica e médica, respectivamente. Esses serviços de biópsia centralizada oferecem uma oportunidade muito rara de estabelecer uma coorte populacional de OPLs. A equipe de patologistas identificará os pacientes elegíveis por meio do processo de desativação da patologia e ligará para os médicos solicitantes para notificar o canal de encaminhamento potencial como um tratamento alternativo para esses pacientes. Atualmente, existe um canal de referência para displasia grave ou malignidade oral mais avançada usando este modelo e foi estabelecido para encaminhar pacientes cirúrgicos para o estudo COOLS financiado pelo TFRI (pelos Drs. Durham e Poh; H09-03090). Este mesmo sistema/pipeline será usado para identificar pacientes elegíveis diagnosticados com displasias leves e/ou moderadas identificados nas comunidades médica e odontológica.

2. Elegibilidade Indivíduos com mais de 19 anos de idade frequentam a clínica odontológica ou otorrinolaringológica no Hospital Geral de Vancouver (Vancouver Acute) para avaliação de lesões orais diagnosticadas com displasia leve ou moderada; estão dispostos a dar o consentimento informado.
3. Procedimentos de recrutamento e consentimento informado Uma carta de convite referente a este estudo será enviada aos pacientes potencialmente elegíveis uma semana antes da data marcada junto com o documento de consentimento. No dia da visita clínica, o assistente de pesquisa explicará o estudo ao sujeito elegível e obterá o consentimento assinado dos participantes. Serão recrutados 400 indivíduos. Esses pacientes serão monitorados uma vez a cada seis meses (o padrão de atendimento atual). Quando justificado clinicamente devido a sinais de progressão da doença ou na marca de acompanhamento de 2 anos, duas biópsias de punção de 5 mm serão realizadas em áreas de lesão com gravidade diferente (conforme determinado pelas tecnologias de imagem). A biópsia comparativa de dois anos em uma lesão estável é o padrão de tratamento atual.

Procedimentos do estudo O estudo é um estudo longitudinal seguindo o cronograma de acompanhamento do padrão atual de tratamento para tais lesões, ou seja, uma vez a cada 6 meses e biópsia comparativa uma vez a cada 2-3 anos. Os pontos de tempo importantes são a visita inicial (linha de base), no final do segundo, 5º e 8º ano de visitas de acompanhamento. No entanto, o momento da biópsia é baseado exclusivamente no julgamento clínico dos médicos, ou seja, sinais de progressão da doença.

1. Coleta de dados clínicos Após o consentimento do sujeito, ele será solicitado a preencher um conjunto de questionários para a coleta de informações demográficas e de fatores de risco. O sujeito receberá um ID do estudo e nenhum identificador exclusivo será vinculado aos dados coletados. Um arquivo separado será usado para vincular a ID do estudo e os identificadores do paciente. Isso é importante para facilitar o gerenciamento do paciente e capturar as informações do resultado. Este arquivo com o identificador exclusivo dos pacientes será mantido no arquivo protegido por senha no computador do BC Cancer Research Center (BCCRC) em um escritório fechado no BCCCRC e somente PIs podem acessar o arquivo. O questionário de estado de saúde e HAI não tem finalidade diagnóstica. Se os médicos acreditarem que há depressão ou ansiedade presente no participante (julgamento clínico dos médicos), os médicos do estudo responsáveis ​​por esse participante específico se comunicarão com o médico de família do paciente e encaminharão o participante a uma fonte adequada para avaliação e tratamento adicionais.

2. Coleta de dados usando dispositivo de estudo

   • Os médicos examinarão os pacientes usando WL, VELScope VX para FV (anteriormente aprovado, R05-0116), OCT (anteriormente aprovado, H09-01955) e um microscópio confocal portátil (H11-00011).
   • Imagem de OCT: Depois de identificar as áreas anormais para biópsia usando o exame WL e FV, o clínico colocará uma sonda de fibra óptica da OCT nas áreas de interesse da mucosa oral. O local para colocação da sonda será determinado pelos PIs (Otorrinolaringologistas-cirurgiões de cabeça e pescoço (SD/DA) e/ou Especialista em Medicina Oral/Patologia Oral (Ng/Poh)). As imagens serão gravadas pela máquina para análise posterior.
   • Imagem de microscópio confocal: após a imagem de OCT, o clínico aplicará solução de cloridrato de acriflavina a 0,05% topicamente nas áreas de interesse da mucosa oral por 30 segundos antes da imagem. O clínico colocará um microscópio confocal portátil na superfície da mucosa para registrar a observação para análise posterior.
   • Todos os esforços necessários serão tomados para reduzir qualquer desconforto leve que possa estar associado à colocação da sonda dentro da cavidade oral de um indivíduo. A sonda OCT ou o microscópio confocal serão cobertos por uma barreira de plástico e desinfetados por métodos padrão usados ​​para instrumentos de cavidade oral antes e depois do uso do sujeito. O exame do dispositivo não levará mais de 15 minutos, além do tempo de consulta do sujeito para suas visitas de rotina. A intensidade máxima de iluminação do tecido para cada medição será menor que o Threshold Limit Value (TLV) estabelecido pela Conferência Americana de Higienistas Industriais Governamentais (ACGIH)11 para exposição à luz de banda larga.
   • As informações obtidas a partir das medidas de refletância polarizada serão comparadas com a histologia e a patologia quantitativa (pontuação do fenótipo nuclear) dos cortes teciduais da lesão. Os dados de espectro coletados de áreas de aparência normal da mucosa de aparência normal adjacente e da mucosa contralateral serão usados ​​para determinar a variação de paciente para paciente na refletância polarizada da mucosa oral.
3. Coleta de amostras com escova esfoliativa (anteriormente aprovada, R05-0116) Uma escova de citologia Innovatec (Arcona Inc) é usada para coletar células esfoliadas da lesão oral. Essas escovas são transferidas para PreservCyt® Solution (Cytyc Corp.) e mantidas em geladeira a 4ºC.
4. Coleta de amostras de sangue No total, 12 ml (3/4 de uma colher de sopa) de amostra de sangue serão coletados em 1 vacutainers SST e 1 EDTA na clínica por pessoal de pesquisa treinado. A amostra de sangue será processada e as amostras de soro, plasma e puffy coat serão alíquotas e congeladas a -80ºC para análises futuras. As amostras de DNA no revestimento inchado serão extraídas e usadas como amostra de controle normal para a análise de perda de heterozigosidade (LOH). Um consentimento separado será usado para essa finalidade. Prevemos que todas as alíquotas de soro, plasma e puffy coat serão usadas. Qualquer tecido remanescente não será descartado ou vendido, mas será armazenado em um freezer trancado na BC Cancer Agency por um período de até quinze anos para que os resultados deste estudo possam ser confirmados.
5. Coleta de tecido congelado No caso de biópsia, o tecido será dividido ao meio. Metade da amostra será fixada na solução de formalina e enviada ao laboratório de patologia para análise como parte normal do procedimento de diagnóstico médico. Parte desse tecido será mantida e utilizada somente após o diagnóstico. Em nenhum momento o tecido será removido apenas para fins de pesquisa. O tecido doado receberá um código de identificação do líder do projeto e será mantido em freezers seguros na BC Cancer Agency até que o material genético (DNA e RNA) seja extraído para análise. Um consentimento separado será usado para essa finalidade. Prevemos que todo o tecido doado será usado. Qualquer tecido remanescente não será descartado ou vendido, mas será armazenado em um freezer trancado na BC Cancer Agency por um período de até quinze anos para que os resultados deste estudo possam ser confirmados.
6. Microdissecção de tecidos e extração de DNA. Os blocos de tecido fixados em formalina e embebidos em parafina da biópsia inicial e da visita de acompanhamento serão obtidos no Departamento de Patologia Anatômica do Hospital Geral de Vancouver. no momento da alteração clínica ou aos 24 meses será solicitada visita de acompanhamento para processamento. Dez seções de 10 µm de espessura para amostra de DNA, 2 seções de tecido não coradas de 4 µm para análise histológica quantitativa. Áreas de displasia nos cortes espessos serão identificadas e microdissecadas. A amostra de DNA do epitélio será extraída e utilizada para a análise de LOH.