Enfoque innovador para el triaje del precáncer oral (iTOP)

Acumulación de pacientes Este estudio se llevará a cabo en la Clínica de Otorrinolaringología del Hospital General de Vancouver. Trescientos sesenta sujetos voluntarios se inscribirán para participar en el estudio. Los pasos detallados de la acumulación de pacientes del estudio se proporcionan a continuación.

1. El establecimiento de canales de referencia para una verdadera cohorte de OPL basada en la población en BC.

   En BC, el Servicio de Biopsia Oral de BC (OBS) y el Departamento de Patología del Hospital General de Vancouver (VGH) reciben biopsias y muestras quirúrgicas de las comunidades dental y médica, respectivamente. Estos servicios de biopsia centralizados ofrecen una oportunidad muy rara de establecer una cohorte de OPL basada en la población. El equipo de patólogos identificará a los pacientes elegibles a través del proceso de cierre de sesión de patología y llamará a los médicos remitentes para notificarles la canalización potencial de derivación como un manejo alternativo para estos pacientes. Actualmente, existe un canal de derivación para displasia grave o malignidad oral más avanzada utilizando este modelo y se ha establecido para derivar pacientes quirúrgicos para el ensayo COOLS financiado por TFRI (por los Dres. Durham y Poh; H09-03090). Este mismo sistema/canalización se utilizará para identificar a los pacientes elegibles diagnosticados con displasias leves y/o moderadas identificadas en las comunidades médica y dental.

2. Elegibilidad Sujetos mayores de 19 años asisten a la clínica Dental u Otorrinolaringología en el Hospital General de Vancouver (Vancouver Acute) para evaluación de lesiones orales diagnosticadas con displasia leve o moderada; están dispuestos a dar el consentimiento informado.
3. Procedimientos de reclutamiento y consentimiento informado Se enviará por correo una carta de invitación con respecto a este estudio a los pacientes potencialmente elegibles una semana antes de la fecha de su cita junto con el documento de consentimiento. El día de la visita clínica, el asistente de investigación explicará el estudio al sujeto elegible y obtendrá el consentimiento firmado de los participantes. Se reclutarán 400 sujetos. Estos pacientes serán monitoreados una vez cada seis meses (el estándar actual de atención). Cuando esté clínicamente justificado debido a signos de progresión de la enfermedad o en el seguimiento de 2 años, se realizarán dos biopsias con sacabocados de 5 mm en áreas de lesión con diferente gravedad (según lo determinen las tecnologías de imágenes). La biopsia comparativa de dos años en una lesión estable es el estándar de atención actual.

Procedimientos del estudio El estudio es un estudio longitudinal que sigue el programa de seguimiento del estándar actual de atención para este tipo de lesiones, es decir, una vez cada 6 meses y una biopsia comparativa una vez cada 2-3 años. Los puntos de tiempo importantes son la visita inicial (línea de base), al final del segundo, quinto y octavo año de las visitas de seguimiento. Sin embargo, el momento de la biopsia se basa únicamente en el juicio clínico de los médicos, es decir, signos de progresión de la enfermedad.

1. Recopilación de datos clínicos Después de que el sujeto haya dado su consentimiento, se le pedirá que complete una serie de cuestionarios para recopilar información demográfica y de factores de riesgo. Al sujeto se le asignará una ID de estudio y no se vinculará ningún identificador único a los datos recopilados. Se usará un archivo separado para vincular la ID del estudio y los identificadores del paciente. Esto es importante para facilitar el manejo del paciente y capturar la información del resultado. Este archivo con el identificador único de los pacientes se mantendrá en el archivo protegido con contraseña en la computadora del BC Cancer Research Center (BCCCRC) en una oficina cerrada en el BCCCRC y solo los PI pueden acceder al archivo. El cuestionario de estado de salud y HAI no tiene fines diagnósticos. Si los médicos creen que hay depresión o ansiedad en el participante (juicio clínico de los médicos), los médicos del estudio a cargo de este participante específico se comunicarán con el médico de familia del paciente y derivarán al participante a una fuente adecuada para una evaluación y manejo adicionales.

2. Recopilación de datos utilizando el dispositivo de estudio

   • Los médicos examinarán a los pacientes utilizando WL, VELScope VX para FV (previamente aprobado, R05-0116), OCT (previamente aprobado, H09-01955) y un microscopio confocal de mano (H11-00011).
   • Imágenes de OCT: después de identificar las áreas anormales para la biopsia mediante el examen WL y FV, el médico colocará una sonda de fibra óptica de OCT en las áreas de interés de la mucosa oral. El sitio para la colocación de la sonda lo determinarán los PI (cirujanos de cabeza y cuello de otorrinolaringología (SD/DA) y/o especialistas en medicina bucal/patología bucal (Ng/Poh)). Las imágenes serán grabadas por la máquina para su posterior análisis.
   • Obtención de imágenes con microscopio confocal: después de la toma de imágenes de OCT, el médico aplicará una solución de clorhidrato de acriflavina al 0,05 % por vía tópica en las áreas de interés de la mucosa oral durante 30 segundos antes de la toma de imágenes. El médico colocará un microscopio confocal manual en la superficie de la mucosa para registrar la observación para un análisis posterior.
   • Se harán todos los esfuerzos necesarios para reducir cualquier molestia leve que pueda estar asociada con la colocación de la sonda dentro de la cavidad oral de un sujeto. La sonda OCT o el microscopio confocal se cubrirán con una barrera de plástico y se desinfectarán mediante los métodos estándar utilizados para los instrumentos de la cavidad oral antes y después de su uso por parte del sujeto. El examen del dispositivo no tomará más de 15 minutos además de la hora de la cita del sujeto para sus visitas de rutina. La intensidad máxima de iluminación del tejido para cada medición será inferior al valor límite umbral (TLV) establecido por la Conferencia Estadounidense de Higienistas Industriales Gubernamentales (ACGIH)11 para la exposición a la luz de banda ancha.
   • La información obtenida de las mediciones de reflectancia polarizada se comparará con la histología y la patología cuantitativa (puntuación de fenotipo nuclear) de las secciones de tejido de la lesión. Los datos de espectro recopilados de las áreas de aspecto normal de la mucosa adyacente de aspecto normal y la mucosa contralateral se utilizarán para determinar la variación de paciente a paciente en la reflectancia polarizada de la mucosa oral.
3. Recolección de muestras de cepillado exfoliativo (previamente aprobado, R05-0116) Se usa un cepillo de citología Innovatec (Arcona Inc) para recolectar células exfoliadas de la lesión oral. Estos cepillados se transfieren a PreservCyt® Solution (Cytyc Corp.) y se mantienen en nevera a 4ºC.
4. Recolección de muestras de sangre En total, se recolectarán 12 ml (3/4 de cucharada) de muestra de sangre en 1 vacutainer de SST y 1 de EDTA en la clínica por parte de personal de investigación capacitado. La muestra de sangre será procesada y las muestras de suero, plasma y pelaje hinchado serán alícuotas y congeladas a -80ºC para futuros análisis. Las muestras de ADN del pelaje hinchado se extraerán y se utilizarán como muestra de control normal para el análisis de pérdida de heterocigosidad (LOH). Se utilizará un consentimiento por separado para este propósito. Anticipamos que todas las alícuotas de suero, plasma y capa hinchada se agotarán. Cualquier tejido restante no se desechará ni se venderá, sino que se almacenará en un congelador cerrado con llave en la Agencia del Cáncer de Columbia Británica durante un período de hasta quince años para que los resultados de este estudio puedan confirmarse.
5. Recolección de tejido congelado En caso de biopsia, el tejido se dividirá en dos. La mitad de la muestra se fijará en la solución de formalina y se enviará al laboratorio de patología para su análisis como parte normal del procedimiento de diagnóstico médico. Parte de este tejido se conservará y utilizará solo después de que se haya realizado el diagnóstico. En ningún momento se extraerá tejido únicamente con fines de investigación. El tejido donado recibirá un código de identificación por parte del líder del proyecto y se mantendrá en congeladores seguros en la Agencia de Cáncer de BC hasta que se haya extraído el material genético (ADN y ARN) para su análisis. Se utilizará un consentimiento por separado para este propósito. Anticipamos que todo el tejido donado se agotará. Cualquier tejido restante no se desechará ni se venderá, sino que se almacenará en un congelador cerrado con llave en la Agencia del Cáncer de Columbia Británica durante un período de hasta quince años para que los resultados de este estudio puedan confirmarse.
6. Microdisección de tejidos y extracción de ADN. Los bloques de tejido incluidos en parafina y fijados en formalina de la biopsia inicial y la biopsia de la visita de seguimiento se obtendrán del Departamento de Patología Anatómica del Hospital General de Vancouver. en el momento del cambio clínico oa los 24 meses se solicitará visita de seguimiento para su trámite. Diez secciones de 10 µm de espesor para muestra de ADN, 2 secciones de tejido sin teñir de 4 µm para análisis histológico cuantitativo. Se identificarán y microdisectarán áreas de displasia en las secciones gruesas. La muestra de ADN del epitelio se extraerá y utilizará para el análisis LOH.