Innovatieve benadering van triage van orale prekanker (iTOP)

Patiëntopbouw Dit onderzoek zal plaatsvinden in de Otolaryngology Clinic, het Vancouver General Hospital. Driehonderdzestig vrijwillige proefpersonen zullen worden ingeschreven om deel te nemen aan het onderzoek. Gedetailleerde stappen van de opbouw van de studiepatiënt worden hieronder gegeven.

1. Het opzetten van verwijzingspijplijnen voor een echt populatiegebaseerd OPL-cohort in BC.

   In BC ontvangen de BC Oral Biopsy Service (OBS) en de Pathology Department van het Vancouver General Hospital (VGH) respectievelijk biopsie en chirurgische monsters van de tandheelkundige en medische gemeenschap. Deze gecentraliseerde biopsiediensten bieden een zeer zeldzame kans om een ​​populatiegebaseerd cohort van OPL's op te zetten. Het team van pathologen identificeert in aanmerking komende patiënten via het afmeldingsproces voor pathologie en belt de indienende artsen om de potentiële verwijzingspijplijn op de hoogte te stellen als alternatief beheer voor deze patiënten. Momenteel bestaat er een verwijzingspijplijn voor ernstige dysplasie of meer geavanceerde orale maligniteit die dit model gebruikt en is opgezet om chirurgische patiënten door te verwijzen naar de door TFRI gefinancierde COOLS-studie (door Drs. Durham en Poh; H09-03090). Ditzelfde systeem/pijplijn zal worden gebruikt om in aanmerking komende patiënten te identificeren met de diagnose milde en/of matige dysplasie, geïdentificeerd uit zowel medische als tandheelkundige gemeenschappen.

2. Geschiktheid Proefpersonen ouder dan 19 gaan naar de tandheelkundige of otolaryngologiekliniek in het Vancouver General Hospital (Vancouver Acute) voor beoordeling van orale laesies gediagnosticeerd met milde of matige dysplasie; bereid zijn de geïnformeerde toestemming te geven.
3. Procedures voor werving en geïnformeerde toestemming Een week voor hun afspraakdatum zal samen met het toestemmingsdocument een uitnodigingsbrief met betrekking tot dit onderzoek naar de mogelijk in aanmerking komende patiënten worden gestuurd. Op de dag van het klinische bezoek legt de onderzoeksassistent het onderzoek uit aan de in aanmerking komende proefpersoon en verkrijgt hij ondertekende toestemming van de deelnemers. Er zullen 400 proefpersonen worden aangeworven. Deze patiënten zullen eens in de zes maanden worden gecontroleerd (de huidige zorgstandaard). Indien klinisch gerechtvaardigd vanwege tekenen van ziekteprogressie of na 2 jaar follow-up, zullen twee 5-mm ponsbiopten worden uitgevoerd op laesiegebieden met verschillende ernst (zoals bepaald door beeldvormingstechnologieën). Een vergelijkende biopsie van twee jaar bij een stabiele laesie is de huidige zorgstandaard.

Studieprocedures De studie is een longitudinaal onderzoek volgens het follow-upschema van de huidige zorgstandaard voor dergelijke laesies, d.w.z. eenmaal per 6 maanden en vergelijkende biopsie eenmaal per 2-3 jaar. De belangrijke tijdstippen zijn het eerste bezoek (baseline), aan het einde van het tweede, vijfde en achtste jaar van vervolgbezoeken. Het tijdstip van biopsie is echter uitsluitend gebaseerd op het klinische oordeel van de clinici, d.w.z. tekenen van ziekteprogressie.

1. Verzameling van klinische gegevens Nadat de proefpersoon toestemming heeft gegeven, wordt hem gevraagd een reeks vragenlijsten in te vullen voor het verzamelen van demografische gegevens en informatie over risicofactoren. De proefpersoon krijgt een studie-ID toegewezen en er wordt geen unieke identificatie gekoppeld aan de verzamelde gegevens. Er wordt een apart bestand gebruikt om de studie-ID en patiënt-ID's te koppelen. Dit is belangrijk om het patiëntenbeheer te vergemakkelijken en de uitkomstinformatie vast te leggen. Dit bestand met de unieke identificatiecode van de patiënt wordt bewaard in het met een wachtwoord beveiligde bestand op de computer van het BC Cancer Research Center (BCCRC) in een afgesloten kantoor in het BCCCRC en alleen PI's hebben toegang tot het bestand. De gezondheidsstatus- en HAI-vragenlijst is niet voor diagnostische doeleinden. Als de clinici denken dat er sprake is van depressie of angst bij de deelnemer (klinisch oordeel van de clinicus), zullen de studieclinici die verantwoordelijk zijn voor deze specifieke deelnemer communiceren met de huisarts van de patiënt en de deelnemer doorverwijzen naar een geschikte bron voor verdere evaluatie en behandeling.

2. Gegevensverzameling met behulp van een studieapparaat

   • De clinici zullen de patiënten onderzoeken met behulp van WL, VELScope VX voor FV (eerder goedgekeurd, R05-0116), OCT (eerder goedgekeurd, H09-01955) en een draagbare confocale microscoop (H11-00011).
   • OCT-beeldvorming: Na het identificeren van de abnormale gebieden voor biopsie met behulp van WL- en FV-onderzoek, plaatst de arts een glasvezelsonde van de OCT op de van belang zijnde gebieden van het mondslijmvlies. De plaats voor plaatsing van de sonde wordt bepaald door PI's (KNO-hoofd-halschirurgen (SD/DA) en/of Oral Medicine/Oral Pathology Specialist (Ng/Poh)). De beelden worden door de machine opgenomen voor latere analyse.
   • Confocale microscoopbeeldvorming: Na OCT-beeldvorming zal de arts 0,05% Acriflavine Hydrochloride-oplossing topisch aanbrengen op de orale mucosale gebieden van belang gedurende 30 seconden voorafgaand aan beeldvorming. De clinicus plaatst een draagbare confocale microscoop op het slijmvliesoppervlak om de observatie vast te leggen voor latere analyse.
   • Alle nodige inspanningen zullen worden geleverd om enig licht ongemak te verminderen dat zou kunnen worden geassocieerd met de plaatsing van de sonde in de mondholte van een proefpersoon. De OCT-sonde of de confocale microscoop wordt afgedekt door een plastic barrière en gedesinfecteerd volgens standaardmethoden die worden gebruikt voor mondholte-instrumenten voor en na gebruik door de patiënt. Het apparaatonderzoek duurt niet langer dan 15 minuten, bovenop de afspraaktijd van de proefpersoon voor hun routinebezoeken. De maximale intensiteit van weefselverlichting voor elke meting zal lager zijn dan de Threshold Limit Value (TLV) die is vastgesteld door de American Conference of Governmental Industrial Hygienists (ACGIH)11 voor blootstelling aan breedbandlicht.
   • De informatie verkregen uit gepolariseerde reflectiemetingen zal worden vergeleken met de histologie en kwantitatieve pathologie (nucleaire fenotypescore) van de weefselcoupes van de laesie. De verzamelde spectragegevens van normaal uitziende gebieden van aangrenzende normaal uitziende mucosa en contralaterale mucosa zullen worden gebruikt om de variatie van patiënt tot patiënt in de gepolariseerde reflectie van orale mucosa te bepalen.
3. Exfoliatief borstelen monsterverzameling (eerder goedgekeurd, R05-0116) Een Innovatec cytologieborstel (Arcona Inc) wordt gebruikt om geëxfolieerde cellen van de orale laesie te verzamelen. Deze poetsbeurten worden overgebracht in PreservCyt®-oplossing (Cytyc Corp.) en in de koelkast van 4 °C bewaard.
4. Afname van bloedmonsters In totaal wordt 12 ml (3/4 van een eetlepel) bloedmonster afgenomen in 1 SST- en 1 EDTA-vacutainer in de kliniek door getraind onderzoekspersoneel. Het bloedmonster wordt verwerkt en serum-, plasma- en gezwollen vachtmonsters worden aliquot en ingevroren bij -80°C voor toekomstige analyse. De DNA-monsters in de gezwollen vacht worden geëxtraheerd en gebruikt als het normale controlemonster voor de analyse van het verlies van heterozygositeit (LOH). Hiervoor wordt een aparte toestemming gebruikt. We verwachten dat alle aliquots van serum, plasma en gezwollen vacht zullen worden opgebruikt. Resterend weefsel wordt niet weggegooid of verkocht, maar wordt voor een periode van maximaal vijftien jaar opgeslagen in een afgesloten vriescel bij het BC Cancer Agency, zodat de resultaten van dit onderzoek kunnen worden bevestigd.
5. Bevroren weefselverzameling Bij biopsie wordt het weefsel in tweeën gedeeld. De helft van het monster wordt in de formaline-oplossing gefixeerd en voor analyse naar het pathologielaboratorium gestuurd als een normaal onderdeel van de medische diagnoseprocedure. Een deel van dit weefsel wordt pas bewaard en gebruikt nadat de diagnose is gesteld. Er wordt nooit weefsel weggenomen uitsluitend ten behoeve van onderzoek. Het gedoneerde weefsel krijgt een identificatiecode van de projectleider en wordt bewaard in beveiligde vriezers bij het BC Cancer Agency totdat erfelijk materiaal (DNA en RNA) is geëxtraheerd voor analyse. Hiervoor wordt een aparte toestemming gebruikt. We verwachten dat al het gedoneerde weefsel opgebruikt zal zijn. Resterend weefsel wordt niet weggegooid of verkocht, maar wordt voor een periode van maximaal vijftien jaar opgeslagen in een afgesloten vriescel bij het BC Cancer Agency, zodat de resultaten van dit onderzoek kunnen worden bevestigd.
6. Weefselmicrodissectie en DNA-extractie. De in formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde weefselblokken van de initiële biopsie en biopsie van het vervolgbezoek zullen worden verkregen van de afdeling Anatomische Pathologie, het Vancouver General Hospital. op het moment van klinische verandering of na 24 maanden zal een follow-upbezoek worden aangevraagd voor verwerking. Tien 10 µm dikke coupes voor DNA-monster, 2 4 µm ongekleurde weefselcoupes voor kwantitatieve histologische analyse. Gebieden van dysplasie op de dikke secties zullen worden geïdentificeerd en microdissectie. Het DNA-monster van het epitheel wordt geëxtraheerd en gebruikt voor de LOH-analyse.