Innovatiivinen lähestymistapa suun esisyövän hoitoon (iTOP)

Potilaskertymä Tämä tutkimus tehdään Otolaryngology Clinicissä, Vancouver General Hospitalissa. Kolmesataakuusikymmentä vapaaehtoista tutkittavaa otetaan mukaan osallistumaan tutkimukseen. Tutkimuspotilaiden kerryttämisen yksityiskohtaiset vaiheet esitetään alla.

1. Suositusputkien perustaminen todellista väestöpohjaista OPL-kohorttia varten BC:ssä.

   BC:ssä BC:n suun biopsiapalvelu (OBS) ja Vancouverin yleissairaalan (VGH) patologian osasto vastaanottavat biopsia- ja kirurgisia näytteitä hammaslääkäreiltä ja lääketieteellisiltä yhteisöiltä. Nämä keskitetyt biopsiapalvelut tarjoavat erittäin harvinaisen mahdollisuuden perustaa väestöpohjainen OPL-kohortti. Patologitiimi tunnistaa kelvolliset potilaat patologian kirjautumisprosessin kautta ja soittaa lähettäneille lääkäreille ilmoittaakseen mahdollisesta läheteputkistosta näiden potilaiden vaihtoehtoisena hoitona. Tällä hetkellä on olemassa tätä mallia käyttävä läheteputki vakavaan dysplasiaan tai pidemmälle edenneeseen suun pahanlaatuisuuteen, ja se on perustettu ohjaamaan kirurgisia potilaita TFRI-rahoitteiseen COOLS-tutkimukseen (tohtori Drs. Durham ja Poh; H09-03090). Tätä samaa järjestelmää/putkea käytetään tunnistamaan kelvolliset potilaat, joilla on diagnosoitu lievä ja/tai keskivaikea dysplasia sekä lääketieteellisistä että hammaslääkäreistä.

2. Kelpoisuus Yli 19-vuotiaat tutkittavat käyvät Vancouverin yleissairaalan (Vancouver Acute) hammas- tai kurkku- ja kurkkutautiklinikalla arvioimaan suun leesiot, joissa on diagnosoitu lievä tai kohtalainen dysplasia; ovat valmiita antamaan tietoisen suostumuksen.
3. Rekrytointi- ja tietoon perustuvat suostumusmenettelyt Tätä tutkimusta koskeva kutsukirje postitetaan mahdollisille kelpoisille potilaille viikkoa ennen heidän vastaanottopäiväänsä suostumusasiakirjan kanssa. Kliinisen käynnin päivänä tutkimusassistentti selittää tutkimuksen sopivalle koehenkilölle ja hankkii osallistujilta allekirjoitetun suostumuksen. Rekrytoidaan 400 tutkittavaa. Näitä potilaita seurataan kuuden kuukauden välein (nykyinen hoitostandardi). Kun se on kliinisesti perusteltua taudin etenemisen merkkien vuoksi tai 2 vuoden seuranta-ajan jälkeen, kaksi 5 mm:n lyöntibiopsiaa tehdään vaurioalueille, joilla on eri vakavuus (kuvantamistekniikoiden mukaan). Kahden vuoden vertaileva biopsia vakaassa vauriossa on nykyinen hoidon standardi.

Tutkimusmenettelyt Tutkimus on pitkittäistutkimus, jossa noudatetaan tällaisten leesioiden nykyisen hoitostandardin seuranta-aikataulua, eli kerran 6 kuukaudessa ja vertaileva biopsia kerran 2-3 vuodessa. Tärkeitä ajankohtia ovat ensimmäinen käynti (perustilanne), seurantakäyntien toisen, 5. ja 8. vuoden lopussa. Biopsian ajankohta perustuu kuitenkin yksinomaan kliinikon kliiniseen arvioon eli taudin etenemisen merkkeihin.

1. Kliinisen tiedon kerääminen Kun tutkittava on antanut suostumuksensa, häntä pyydetään täyttämään joukko kyselylomakkeita demografisten ja riskitekijöiden tietojen keräämiseksi. Koehenkilölle annetaan tutkimustunnus, eikä kerättyyn tietoon linkitetä yksilöllistä tunnistetta. Tutkimustunnuksen ja potilastunnisteiden linkittämiseen käytetään erillistä tiedostoa. Tämä on tärkeää potilaan hallinnan helpottamiseksi ja tulostietojen keräämiseksi. Tämä tiedosto, jossa on potilaiden yksilöllinen tunniste, säilytetään salasanalla suojatussa tiedostossa BC Cancer Research Centerin (BCRCC) tietokoneessa BCCCRC:n lukitussa toimistossa, ja vain PI:t voivat käyttää tiedostoa. Terveydentila- ja HAI-kysely ei ole diagnostisia tarkoituksia varten. Jos kliinikot uskovat, että osallistujalla on masennusta tai ahdistusta (kliinikon kliininen harkinta), kyseisestä osallistujasta vastaavat tutkimuskliinikot kommunikoivat potilaan perhelääkärin kanssa ja ohjaavat osallistujan asianmukaiseen lähteeseen lisäarviointia ja -hallintaa varten.

2. Tiedonkeruu tutkimuslaitteella

   • Lääkärit tutkivat potilaat WL:llä, VELScope VX for FV:llä (aiemmin hyväksytty, R05-0116), OCT:llä (aiemmin hyväksytty, H09-01955) ja kädessä pidettävällä konfokaalimikroskoopilla (H11-00011).
   • OCT-kuvaus: Kun kliinikko on tunnistanut epänormaalit alueet biopsiaa varten WL- ja FV-tutkimuksen avulla, lääkäri asettaa OCT:n kuituoptisen anturin kiinnostuksen kohteena oleville suun limakalvoalueille. PI:t (Otolaryngology-pään ja kaulan kirurgit (SD/DA) ja/tai suun lääketieteen/suun patologian erikoislääkäri (Ng/Poh)) määrittävät paikan, johon koetin asetetaan. Kone tallentaa kuvat myöhempää analysointia varten.
   • Konfokaalinen mikroskooppikuvaus: OCT-kuvauksen jälkeen kliinikko levittää 0,05 % Acriflavine Hydrochloride -liuosta paikallisesti kiinnostaville suun limakalvoille 30 sekunnin ajan ennen kuvantamista. Kliinikko asettaa kädessä pidettävän konfokaalimikroskoopin limakalvon pinnalle tallentaakseen havainnon myöhempää analyysiä varten.
   • Kaikki tarvittavat toimet toteutetaan lievän epämukavuuden vähentämiseksi, joka voi liittyä anturin sijoittamiseen potilaan suuonteloon. OCT-anturi tai konfokaalinen mikroskooppi peitetään muovisuojalla ja desinfioidaan suuonteloinstrumenteissa käytetyillä tavanomaisilla menetelmillä ennen ja jälkeen kohteen käyttöä. Laitetarkastus vie enintään 15 minuuttia tutkittavan rutiinikäyntien ajanvarauksen lisäksi. Kudosten valaistuksen enimmäisintensiteetti kussakin mittauksessa on pienempi kuin Amerikan hallitusten teollisuushygienistien konferenssin (ACGIH)11 asettama raja-arvo (TLV) laajakaistavalolle altistumiselle.
   • Polarisoiduista heijastusmittauksista saatuja tietoja verrataan vauriosta peräisin olevien kudosleikkeiden histologiaan ja kvantitatiiviseen patologiaan (nukleaarinen fenotyyppipisteet). Kerättyjä spektritietoja normaalin näköisiltä alueilta viereiseltä normaalilta näyttävältä limakalvolta ja vastakkaiselta limakalvolta käytetään potilaan välisen vaihtelun määrittämiseen suun limakalvon polarisoidussa heijastuskyvyssä.
3. Kuorintanäytteenotto (aiemmin hyväksytty, R05-0116) Innovatecin sytologiaharjaa (Arcona Inc.) käytetään kuoriutuneiden solujen keräämiseen suuvauriosta. Nämä harjat siirretään PreservCyt® Solutioniin (Cytyc Corp.) ja säilytetään 4 ºC:n jääkaapissa.
4. Verinäytteiden otto Koulutettu tutkimushenkilöstö ottaa kaikkiaan 12 ml (3/4 ruokalusikallista) verinäytettä 1 SST- ja 1 EDTA-vacutaineriin klinikalla. Verinäyte käsitellään ja seerumi-, plasma- ja turvotustakkinäytteet jaetaan eriin ja pakastetaan -80 ºC:een tulevaa analysointia varten. Pöyhistyneessä turkissa olevat DNA-näytteet uutetaan ja niitä käytetään normaalina kontrollinäytteenä heterotsygoottisuuden (LOH) menettämiseen. Tähän tarkoitukseen käytetään erillistä suostumusta. Odotamme, että kaikki seerumi-, plasma- ja turvotustakit käytetään loppuun. Jäljellä olevaa kudosta ei hävitetä tai myydä, vaan niitä säilytetään BC Cancer Agencyn lukitussa pakastimessa enintään viidentoista vuoden ajan, jotta tämän tutkimuksen tulokset voidaan vahvistaa.
5. Jäädytettyjen kudosten kerääminen Biopsian yhteydessä kudos leikataan kahtia. Puolet näytteestä kiinnitetään formaliiniliuokseen ja lähetetään patologian laboratorioon analysoitavaksi normaalina osana lääketieteellistä diagnostiikkaa. Osa tästä kudoksesta säilytetään ja käytetään vasta diagnoosin jälkeen. Kudosta ei missään vaiheessa poisteta yksinomaan tutkimusta varten. Hankkeen johtaja antaa luovutetulle kudokselle koodin tunnistamista varten, ja sitä säilytetään BC Cancer Agencyn suojatuissa pakastimissa, kunnes geneettinen materiaali (DNA ja RNA) on erotettu analysointia varten. Tähän tarkoitukseen käytetään erillistä suostumusta. Odotamme, että kaikki luovutettu kudos käytetään loppuun. Jäljellä olevaa kudosta ei hävitetä tai myydä, vaan niitä säilytetään BC Cancer Agencyn lukitussa pakastimessa enintään viidentoista vuoden ajan, jotta tämän tutkimuksen tulokset voidaan vahvistaa.
6. Kudosten mikrodissektio ja DNA:n uutto. Formaliinikiinnitetyt, parafiiniin upotetut kudoslohkot alkuperäisestä biopsiasta ja seurantakäynnistä saadut Vancouverin yleissairaalan anatomisen patologian osastolta. kliinisen muutoksen tai 24 kuukauden seurantakäynnin yhteydessä pyydetään käsittelyä. Kymmenen 10 µm paksuista leikkettä DNA-näytteelle, 2 4 µm värjäämätöntä kudosleiketta kvantitatiiviseen histologiseen analyysiin. Paksuilla osilla olevat dysplasia-alueet tunnistetaan ja leikataan mikroleikkauksella. Epiteelistä otettu DNA-näyte uutetaan ja sitä käytetään LOH-analyysiin.